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组织半胱氨酸(cysteine)含量比色法定量

阅读:1540          发布时间:2015-5-19
提 供 商 上海哈灵生物科技有限公司 资料大小 45.5KB
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资料类型 WORD 文档 浏览次数 1540次
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主要用途


 组织半胱氨酸(cysteine)含量比色法定量检测试剂是一种旨在通过先酸性预处理,有机溶剂萃取后,在碱性条件下,与萘醌磺酸钠进行反应后,由次亚硫酸钠作用产生的红色显色产物,在分光光度仪下,即采用比色法来测定样品中半胱氨酸含量的而经典的技术方法。该技术经过精心改沙利文反应Sullivan Reaction、成功实验证明的其适用于各种组织(动物、人体等)裂解萃取液样品中半胱氨酸水平检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。


技术背景


L-半胱氨酸(L-cysteine;Cys;C学名为2-氨基-3-巯基丙酸,是一种疏水性非必需α-氨基酸,分子式是HO2CCH(NH2)CH2SH或C3H7NO2S,分子量121.16,编码为UGU和UGC。其侧链是巯基(thiol),为非极性,作为亲核剂(nucleophile),参与酶类反应。氧化后,产生二硫化物和衍生物(disulfide derivative)胱氨酸(cystine),二硫化物成为蛋白质的结构形式。动物通过胱硫醚β合酶(cystathionine beta synthase)和胱硫醚γ裂合酶(cystathione gamma lyase)由丝氨酸(serine)和蛋氨酸(methionine)转化成同源半胱氨酸(homocysteine)、S-腺苷蛋氨酸(S-adenosylmethionine)、胱硫醚(cystathionine),后产生半胱氨酸和α-酮基丁酸(α-ketobutyrate)。而植物和细菌通过丝氨酸乙酰基转移酶(transacetylase)和O-乙酰丝氨酸巯基裂合酶(O-acetylserine(thio)lyase),由丝氨酸产生半胱氨酸和乙酸。半胱氨酸,是谷胱苷肽的前体,具有抗氧化作用、抗蛋白水解、使蛋白分子之间交联、参与硫化物代谢、与各种金属原子,例如铁、锌、铜等结合、参与蛋白质的转录后修饰、中和酒精毒性等功能。应用于食品调味和添加、化妆品防护、生物标记、药物等。血浆半胱氨酸水平用于评估心血管疾病风险;半胱氨酸和同源半胱氨酸的比例可以评价静脉血栓形成、心肌梗死、肾衰的风险。在植物中,半胱氨酸参与各种植物生理活动,例如光质流动(photoplasmic streaming)、电子传导、光合成磷酸化、细胞分裂、维持抗坏血酸还原状态、抗寒性(frost hardiness)、调节作物成熟等。半胱氨酸代谢异常将导致胱氨酸病(cystinosis)、胱氨醇尿(cystinuria)、肝损伤、生长迟缓、毛发去色(hair depigmentation)、水肿(edema)、嗜睡(lethargy)等。基于半胱氨酸,通过酸性预处理,有机溶剂萃取,进而在碱性条件下,与萘醌磺酸钠(1,2-naphthoquinone-4-sodium sulfonate)进行反应,由次亚硫酸钠(sodium hyposulfite)作用,产生显色产物,呈现红色,通过分光光度仪(505nm波长)来定量分析半胱氨酸的含量。

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