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精子顶体形态花生凝集素荧光标记(PNA-FITC)染色试剂盒

阅读:1134          发布时间:2015-5-12
提 供 商 上海哈灵生物科技有限公司 资料大小 46KB
资料图片 下载次数 389次
资料类型 WORD 文档 浏览次数 1134次
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主要用途


 精子顶体形态花生凝集素荧光标记(PNA-FITC)染色试剂是一种旨在使用荧光素标记的花生凝集素和赫斯特33258双重荧光染色技术,分析生理性反应性或病理性退行性顶体缺失而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适用于各种动物或人体精子细胞以及冻存精子细胞,以及受精时的精子细胞。产品严格无菌,即到即用,操作简便,性能稳定,荧光清晰。


技术背景


在男科学Andrology中,精子(spermatozoa)分析提供了精子生成(spermatogenesis)、精子寿命、以及生育能力的基础信息。其中精子的活力(vitality)、运动能力(motility)、授精潜力(fertilizing potential)、膜结构或染色质结构完整性(integrity)、顶体反应(acrosomal reaction)功能的评价是精子分析的重要指标,也是决定人工受孕或体外授精(in vitro fertilizationIVF)的重要参数。其中顶体反应,是指当精子接近卵子实施授精时,精子头部前半端的帽状结构顶体,释放出溶解酶,以便精子和卵子的膜融合。顶体反应测试是一项稳定的精子功能参数,可以用于预测受精成功率。因此顶体的结构完整性(intact)是评价的主要标志,也是不育症和避孕药物研究的对象。使用荧光素标记的花生凝集素(Isothiocyano-fluoresceinated peanut Arachis hypogaea agglutinin;PNA-FITC和赫斯特33258(Hoechst 33258)双重荧光染色技术,是精子顶体反应分析和授精效率评价的常用的方法。首先使用赫斯特33258染色,分析精子活力,基于赫斯特33258具有有限的膜通透性特点,受到活体精子细胞(包括游动性和非游动性精子)的排斥,而容易进入死亡精子细胞。其次使用荧光素标记的花生凝集素染料,与顶体外膜糖蛋白上的半乳糖残基(β-D-galactosyl residue)的结合,显示完整性(未反应性unreacted)顶体,同时可以应用于受精时的精卵反应。双染的作用,以帮助区分生理性反应性顶体缺失(loss)或病理性退行性顶体缺失。通过常用的荧光显微镜(激发波长488nm,散发波长530nm)便可清晰观察到绿色顶体状态(status)。 

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