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细胞蛋白磷酸酶1(PP1)活性定磷比色法定量检测
阅读:2148 发布时间:2015-4-7提 供 商 | 上海哈灵生物科技有限公司 | 资料大小 | 47.3KB |
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资料类型 | WORD 文档 | 浏览次数 | 2148次 |
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要用途
细胞蛋白磷酸酶1(PP1)活性定磷比色法定量检测试剂是一种旨在使用特异性底物糖原磷酸化酶a,在PP2A抑制剂存在下,受到PP1去磷酸化后,释放出游离磷酸根,与孔雀绿染料发生显色反应后,采用比色法测定其峰值的变化,以此进行测算单位酶活性的而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适合于各种细胞裂解悬液样品包括免疫沉淀复合物和粗提或部分纯化酶样品的蛋白磷酸化酶1活性及其抑制剂的检测。广泛应用于细胞凋亡、蛋白组学、病理生理学、神经病变等研究。产品不含污染性蛋白酶,严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,反应优化,检测敏感。
技术背景
蛋白磷酸化酶1(protein phosphatase 1;PP1;EC 3.1.3.48),又称为1型蛋白丝/苏氨酸磷酸化酶,是7个主要丝/苏氨酸磷酸化酶(包括PP1、PP2A、PP2B、PP2C、PP4、PP5、PP6)成员之一,从酵母到人类高度进化保留。其参与调节多种重要的细胞生理功能,包括糖原代谢、细胞分裂、肌肉收缩、信号传导、神经元功能、转录、翻译等,以及与HIV-1转录过程的调节,并且与老年性痴呆等多种疾病密切相关。PP1分子结构表面的3个凹槽及β 12-β 13 Loop环结构,是底物与抑制剂的结合部位;其催化亚体为37kd,调节亚体有2种:目标亚体和抑制亚体。基于特异性底物糖原磷酸化酶a,在PP2A抑制剂福司曲星(fostriecin;FOS)存在的情况下,受到蛋白磷酸化酶1的去磷酸化作用,释放出游离磷酸根,与孔雀绿(malachite green)染料发生显色反应后,在分光光度仪下(660nm波长)产生峰值的变化,由此测定蛋白磷酸化酶1(PP1)的特异活性。