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HEPES缓冲盐溶液(2×HeBS,7.05)

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更新时间:2025-05-13 09:10:09浏览次数:56次

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用途:磷酸钙法进行细胞转染,可用于即时转染和稳定转染,pH值为7.05-7.12。

外源基因导入真核细胞的方法有很多种,如磷酸钙转染法、DEAE-葡聚糖转染法、脂质体法、电穿孔法、显微注射法等,2×HEPES缓冲盐溶液主要用于磷酸钙转染,其主要成分为HEPES,HEPES是一种非离子两性缓冲剂,能有效控制pH值在6.8~8.2范围,尤其在pH7.2~7.4具有较好的缓冲能力,终浓度一般为10~50mmol/L,培养液内含20mmol/LHEPES即可达到较好的缓冲能力。

Leagene HEPES缓冲盐溶液(2×HeBS)是一种常用的细胞转染溶液,主要由HEPES、氯化钠、磷酸盐等组成,其pH值为7.05~7.12,经过滤除菌处理;影响磷酸钙转染效率的因素主要有沉淀中DNA含量、DNA在细胞上停留的时间、休克时间;Leagene 2×HeBS要求DNA浓度在10~50μg为宜,Hela、BALB等细胞沉淀放置16h,CHO、DUKX、BⅡ等细胞可以通过甘油、DMSO进行热休克处理以提高转染效率。该试剂仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。


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