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碱裂解法是的小量制备质粒DNA的方法,可用于抽提微克级别的质粒DNA,葡萄糖-Tris-EDTA溶液(GTE)、NaOH/SDS溶液和乙酸钾溶液(5mol/L,pH4.8)是其常用试剂。
NaOH/SDS溶液由NaOH溶液和SDS溶液等组成,临用前等量混合使用,溶液呈碱性,是碱裂解法提DNA的重要成分,其原理是当菌体在NaOH和SDS溶液中裂解时,蛋白质与DNA发生变性,加入中和液(乙酸钾溶液)后,质粒DNA分子迅速复性,呈溶解状态,离心时留在上清中,由于蛋白质和染色体DNA不复性而呈絮状,离心时可沉淀下来。该试剂仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。
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