北京荧光显微镜的原理和结构类型

北京荧光显微镜的原理和结构类型

北京荧光显微镜的原理和结构类型

*：徕卡荧光显微镜DM500/DM750/DM1000/DM2000荧光显微镜

第二：尼康荧光显微镜E100/E200/50I/80I/CI/NI

第三：奥林巴斯荧光显微镜CX22/CX31/CX41/BX43/BX53/

第四：蔡司荧光显微镜

荧光显微镜原理；

     荧光显微镜 通常是利用一个高发光效率的点光源，并经过滤色系统发出一定波长的光作为激发光、激发标本内的荧光物质发射出各种颜色的荧光后，然后再通过物镜和目镜进行放大，以便更好地进行观察。同时在强烈的对衬背景下，即使荧光很微弱也很容易辨认，且敏感性较高，主要可用于细胞结构和功能及化学成分等的研究。 
     

荧光显微镜的基本构造通常由普通光学显微镜再加一些如荧光光源 、激发滤片、双色束分离器及阻断滤片等附件的基础上组成。同时采用的荧光光源一般为超高压汞灯，它可发出各种波长的光，且每种荧光物质都会有一个产生强荧光的激发光波长 ，这时需加置激发滤片，通常有紫外、紫色、蓝色及绿色激发滤片，仅需使一定波长的激发光透过并照射到标本上，并将其他光都吸收掉。同时在每种物质被激发光照射后，更可在极短时间内发射出比照射波长更长的可见荧光。 
 

      需要注意的是，荧光通常具有专一性，一般都较激发光弱，且为了能观察到更专一的荧光，并在物镜后面需加阻断或压制滤光片。其作用是：一是吸收或阻挡激发光进入目镜、以更好的避免干扰荧光或损伤到眼睛，二是可选择并使特异的荧光透过，更能表现出专一的荧光色彩。同时注意，两种滤光片须选择配合使用。 
透射式荧光显微镜:  
 激发光源常会通过聚光镜穿过标本材料来激发荧光。常用的有暗视野集光器，更可用普通集光器，同时可调节反光镜并使激发光转射和旁射到标本上。其优点为低倍镜时荧光强，而缺点就是随放大倍数的增加而令荧光减弱，所以对于观察较大的标本材料来说是较好的。 
落射式荧光显微镜： 
 

      落射式荧光显微镜是近代发展较快的新式荧光显微镜，较为不同的是激发光从物镜向下落射标本表面，并可用同一物镜作为照明聚光器和收集荧光的物镜。同时光路中需加上一个双色束分离器，一般他与光铀呈45°角，激发光被反射到物镜中，并聚集到样品上，且样品所产生的荧光及由物镜透镜表面、盖玻片表面反射的激发光会同时进入物镜，反射回到双色束分离器，并使激发光和荧光分开，且残余的激发光会再被阻断滤片吸收。可换用不同的激发滤片、双色束分离器及阻断滤片的组合插块，更可满足不同荧光反应产物的需要。这种荧光显微镜的优点就是视野照明较为均匀，且成像清晰，通常放大倍数越大荧光会越强。