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显微镜-观察鲜活生物细胞的重大革新:晶格层光显微术
活生生的细胞在显微镜下是什麼样子?科学家今年有了重大突破。2014年10月24日《科学》(Science)期刊,封面故事是现任*研究院应用科学中心助研究员陈壁彰,在美国诺贝尔化学奖得主Betzig实验室所做的研究「晶格层光显微术」(latticelightsheetmicroscopy)。此技术成功提昇了扫描速度,并且降低对生物样品的光损害,可应用於单分子侦测、超分辨显微术及活体生物细胞或胚胎发育上,具有3D空间和时间的解析能力,还可进行即时动态研究,再度改革了活体光学显微术。
晶格层光显微术1秒内取得1活体影像
此种新研发出的光学显微镜,有别於世面上所看到的光学显微镜,在於它是用一种所谓的「晶格层光显微术」(latticelightsheetmicroscopy)。通常显微镜是用同一个镜头做放光及侦测,而层光显微镜则是用两个正交的镜头;一个镜头将光聚焦產生一条非常细的笔状光源,照射在有萤光分子的生物样品,產生萤光;另一个採用宽场成像收集萤光,使得3D高解析生物影像可经由面扫描以快速取得。
显微镜的速度究竟是多快呢?以一个正在做细胞分裂的细胞来说(大约15x15x10µm3),「晶格层光显微术」可以用不到1秒时间取得一个活体影像,而且可以研究整个细胞分裂的过程(大约20几分鐘)。这样快速、高解析又对样品低伤害的显微镜,不只用在细胞观察,连线虫和果蝇的蛋都可以。
这项技术的主要突破关键,就是在如何同时形成100多条笔状的光束,来增加扫描速度,降低对生物样品的伤害;而且要能控制每条光束的距离及形状,这些都是靠空间光调製器(spatiallightmodulator,简称SLM)来达成。
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