小鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)Elisa试剂盒实验原理:
用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗该指标抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗该指标抗体、HRP标记的亲和素,经过*洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的该指标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
小鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)Elisa试剂盒酶标仪的使用过程中的一些问题:
1.阈值可疑范围的设定 一般酶标仪阈值矩阵设定可设定阴性、可疑、阳性3个范围。有经验表明可疑范围的设定要设定为临界上下15%(也称灰色区)为宜;同时阴性范围下限和阳性范围应该充分考虑到影响ELISA结果因素的存在,可疑范围上限必须考虑到双波长情况下出现负吸光度值和超范围报告影响结果的可能性。“灰色区"的结果的真实性是ELISA定性测定中zui需要把握的环节,也是实验室引起医疗纠纷的主要方面,因此必须对可疑结果进行复检,用两种试剂盒。
2.样板程序文件设定 一个实验室同一试验可能使用不同厂家试剂盒,但不同试剂盒规定的设定对照数量、阈值判定标准等均可能不*,酶标仪所设样板程序也不*。为了使用方便,可在样板程序文件中用后缀加以区别。
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