氨基功能化上转换纳米颗粒UCNPS-NH2
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氨基功能化上转换纳米颗粒UCNPS-NH2
纳米粒子已经被报道可以对聚合链式反应(PCR)产生影响。然而,目前为止一些报道不够,而且很多机理都是基于推测。在此,我们用氨基化硅包磁性纳米粒子(可以轻松的实现磁性分离)为主要模型,金纳米粒子(已经被报道)为参照揭示了纳米粒子影响PCR的机理。我们发现纳米粒子主要通过和PCR成分互相作用从而影响PCR:1)抑制PCR:过量的纳米粒子可以抑制PCR扩增,这是因为纳米粒子会吸附Mg2+、dNTP、引物、模板、聚合等,尤其是纳米粒子表面的活性基团是关键因素;2)特异性:A.纳米粒子并不能增加因为假启动而引起的非特异性扩增,而是先抑制长片段的扩增,再抑制短片段扩增,随着浓度增加片段的扩增都被抑制。这种现象的机理是模板缠绕在纳米粒子表面,当扩增片段位于这些缠绕处PCR扩增受到抑制。B.纳米粒子可以增加过早结束而引起的非特异性扩增,这是因为随着温度升,未完成扩增的片段会先与纳米粒子结合,从而导致不会在随后的中反复扩增。3)效率与产率:一些纳米粒子(如金纳米粒子)可以增加PCR扩增的产率与效率,这是因为这些纳米粒子与单链结合具有的亲和力,从而导致模板在初始变性的时候得到多的可扩增的单链模板。基于以上这些,我们发现纳米粒子的表面与PCR成分相互作用可以解释大多数纳米粒子对PCR产生的影响。
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