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半乳糖苷化修饰葡萄糖氧化
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半乳糖苷化修饰葡萄糖氧化
葡萄糖氧化(Glucose Oxidase,E.C.1.1.3.4,简称GOD)是一种专一性催化β-D-葡萄糖的需氧脱氢,应用于、饲料、等行业中。研究利用一种单胺化的半乳糖衍生物,在炭化二亚胺的催化下,对GOD进行糖苷化修饰,并利用蓖麻凝集素亲和层析分离已修饰的和未修饰的。结果表明,蓖麻凝集素作为一种专一性半乳糖结合蛋白,能够的与修饰后的GOD(结合了半乳糖的GOD,Gal-GOD)结合,将其从反应混合液中纯化出来。利用N2000色谱工作站软件进行面积积分,计算出GOD的修饰率已经80%。Gal-GOD经吸收光谱和荧光光谱分析,证实其结构发生了变化。吸收光谱在380nm处的吸收峰消失,280nm的吸收峰也变矮变宽;荧光光谱在340nm的色氨酸残基特征发射峰有降低,并且发生一定的红移。活性检测证明了Gal-GOD的热稳定性增加,在较温度如在55℃下活性提了7.28倍。为GOD的应用了基础。
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