快速组织固定液

快速组织固定液公司正在销售的产品：鸡纤维蛋白肽B(F)试剂盒 Anti-SMAD1/5 Antibody碱性磷酸酶（AP）标记的羊抗小鼠IgG
鸡α1连接素(CTNNα1)试剂盒Anti-Smad1/5 AntibodyFITC标记的羊抗小鼠IgG
鸡钙调结合蛋白(CALD)试剂盒 Anti-SMAD2 AntibodyPE-Cy3标记的羊抗小鼠IgG
鸡胎儿血红蛋白(HBF)试剂盒 An

产品分类：固定液

储存条件：室温,18个月

用途：用于新鲜组织样本的固定。

注意事项：主要组成成份： 水溶性多元醇,甲醛、异丙醇、乙醇、甲醇

公司产品仅用于科研具有质量可靠、效果稳定、灵敏度高、操作简单、易保存等特点，咨询并订购！

 

配制与标定的实验原理：

1、用EDTA二钠盐配制EDTA标准溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一种白色晶体粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室温溶解度为0.02g/100g H2O。

2、标定EDTA标准溶液的工作基准试剂，基准试剂的预处理：称量前一般应先用稀盐酸洗去氧化层，然后用水洗净，烘干。

配制步骤：

1、取适量锌片放在100mL烧杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自来水、纯水洗净，烘干、冷却。

2、用直接称量法在干燥小烧杯中准确称取0.15～0.2g Zn，盖好小表面皿。

3、用滴管从烧杯口加入5mL 1:1 盐酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地将溶液转移至250mL容量瓶中，用纯水稀释至标线，摇匀。

 

 

实验方法与判定：

1.对照品溶液的稳定性

2.对照品溶液的配制：精密量取脑对照品适量，加无水乙醇制成每1ml含脑1mg的溶液，作为对照品溶液。

3.色谱条件：以交联键合聚乙二醇为固定相的毛细管柱；柱温120℃；进样口温度250℃；检测器温度250℃；分流进样，分流比10:1。理论塔板数按脑计算应不低于10000。

4.实验方法：配制的对照品溶液，一份置冷处保存，一份置室温中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份对照品溶液，三种储备液同时稀释制成每1ml中约含50ug的溶液。照气相色谱法，并依据新对照品的峰面积计算原对照品溶液的含量。记录下来，保证原对照品溶液含量在考察期相对平均偏差不超过2.0%，验证对照品溶液在使用期内稳定可靠。

使用方法：

1.  常用筛选浓度

注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线（kill curve），即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。

一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL；细菌/植物细胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 杀灭曲线的建立

注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线（剂量反应曲线）来实现，至少选择5个浓度。

1）  第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜；注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。

2）  根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。

3）  第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。

4）  接下来每3-4天更换新的含药物培养基。

5）  按照固定的周期（如每2天）进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数（通常是7-10天）内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。

3.   稳定转染细胞的筛选

1）  转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞（直接传代或者稀释后传代）。

注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%

2）  每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。

3）  筛选7天后观察并评估细胞克隆（集落）的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。

4）   挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。

5）   之后更换正常培养基培养即可。

人参皂苷Rk1（标准品） Rebaudioside DMHC I类链相关蛋白B包装5g

人参皂苷Rk2(标准品) Geraniin膜蛋白MLC1抗体包装1g

人参皂苷RK3(标准品) Tyrosol磷化丝裂原活化蛋白激磷-1抗体包装250mg

人参皂苷Ro（标准品） Triptophenolide磷化丝裂原活化蛋白激磷-1抗体包装100g

人工虎骨（标准品） Celastrol丝/苏蛋白激MLK3抗体包装25g

（标准品） Triptolide磷化丝/苏蛋白激MLK3抗体包装500g

忍冬藤（标准品） Triptonide有丝分裂原和应激活化型蛋白激1抗体包装1g

绒毛龙芽草（标准品） Acteoside磷化有丝分裂原和应激活化型蛋白激1抗体包装5g

鞣花(标准品) (-)-Licarin B磷化有丝分裂原和应激活化型蛋白激1抗体包装1g

肉苁蓉（标准品） Reserpine磷化有丝分裂原和应激活化型蛋白激1抗体包装1g

肉苁蓉（管花肉苁蓉）（标准品） Roburic acid磷化有丝分裂原和应激活化型蛋白激1抗体包装250mg

肉苁蓉苷A(标准品) Phillyrin肌球蛋白磷抗体包装5g

肉豆蔻（标准品） Forsythoside A磷化肌球蛋白磷抗体包装25g

肉豆蔻木脂(标准品) Forsythoside B磷化肌球蛋白磷抗体包装5g

肉豆蔻,十四烷(标准品) Liensinine磷化肌球蛋白磷抗体包装100g

酿酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 质量规格：>97.0%抗纺锤体抗体试剂盒豆甾;Stigmasterol

窄盖针层孔菌Phellinus│tremulae (Bondartsev) Bondartsev & P.N. Borisov 质量规格：HPLC>97.0%,标准品抗二氢嘧啶相关蛋白5试剂盒胆固;Cholesterol

澳大亚平脐蠕孢Bipolaris│australiensis 质量规格：>97%抗多发性肌炎硬皮病抗体试剂盒单宁;Glycerite
快速组织固定液VEGF-R2  大鼠血管内皮生长因子受体2规格： 48T

UPAR  大鼠尿激mei样纤溶mei原活化物受体规格： 48T

TH1/TH2  大鼠细胞内细胞因子规格： 48T

HLA-G  大鼠白细胞抗原G规格： 48T

CTGF  大鼠结缔组织生长因子规格： 48T