详细介绍
产品分类:酶类染色
储存条件:4℃,避光,6个月
用途:氧化酶的组织化学染色
注意事项:主要由MAO孵育液、甲醛钙固定液等组成,MAO活性部位呈蓝色或紫色沉淀。
公司产品仅用于科研具有质量可靠、效果稳定、灵敏度高、操作简单、易保存等特点,咨询并订购!
产品名称 | 规格 | 货号 |
单胺氧化酶染色液 | 2×50ml | FS-R6778 |
配制与标定的实验原理:
1、用EDTA二钠盐配制EDTA标准溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一种白色晶体粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室温溶解度为0.02g/100g H2O。
2、标定EDTA标准溶液的工作基准试剂,基准试剂的预处理:称量前一般应先用稀盐酸洗去氧化层,然后用水洗净,烘干。
配制步骤:
1、取适量锌片放在100mL烧杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自来水、纯水洗净,烘干、冷却。
2、用直接称量法在干燥小烧杯中准确称取0.15~0.2g Zn,盖好小表面皿。
3、用滴管从烧杯口加入5mL 1:1 盐酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地将溶液转移至250mL容量瓶中,用纯水稀释至标线,摇匀。
实验方法与判定:
1.对照品溶液的稳定性
2.对照品溶液的配制:精密量取脑对照品适量,加无水乙醇制成每1ml含脑1mg的溶液,作为对照品溶液。
3.色谱条件:以交联键合聚乙二醇为固定相的毛细管柱;柱温120℃;进样口温度250℃;检测器温度250℃;分流进样,分流比10:1。理论塔板数按脑计算应不低于10000。
4.实验方法:配制的对照品溶液,一份置冷处保存,一份置室温中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份对照品溶液,三种储备液同时稀释制成每1ml中约含50ug的溶液。照气相色谱法,并依据新对照品的峰面积计算原对照品溶液的含量。记录下来,保证原对照品溶液含量在考察期相对平均偏差不超过2.0%,验证对照品溶液在使用期内稳定可靠。
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意:用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。
一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
1) 第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
2) 根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
冬凌草(标准品) Broussonetine A alpha干扰诱导蛋白27抗体包装100mg
冬青苷D Oleanolic acid-3-O-β-D-glucopyranosyl (1→2)-α-L-arabinopyranoside纤毛内转运同源蛋白81抗体包装500mg
豆腐果苷(标准品) Sapindoside AGamma干扰诱导蛋白16抗体包装1g
豆甾(标准品) Cabozantinib (S)-malate(BMS907351-(S)-malate)异柠檬脱氢3 beta亚基抗体包装5g
豆甾葡萄糖苷(标准品) Presapogenin CP4干扰诱导的三角形四肽重复蛋白1抗体包装25g
胡萝卜 12-O-Tiglylphorbol-13 –isobutyrate异柠檬脱氢gamma亚基抗体包装5g
独活(标准品) Phorbol 12-myristate 13-acetateBipped B样蛋白抗体包装25g
味(标准品) Gambogic acid艾杜糖-2-硫酯抗体包装5g
杜鹃(标准品) schisanhenol α-L-艾杜糖苷抗体包装100g
杜仲(标准品) FMoc-Tyr(3,5-I2)-OH纤毛内转运同源蛋白122抗体包装1g
杜仲叶(标准品) Bupivacaine base纤毛内转运同源蛋白140抗体包装25g
短葶山麦冬皂苷C Bupivacaine base纤毛内转运同源蛋白20抗体包装5g
短葶山麦冬皂苷C(标准品) Cinepazide maleate纤毛内转运同源蛋白43抗体包装1g
短叶松(标准品) Cinepazide maleate纤毛内转运同源蛋白80抗体包装5g
皂苷A(标准品) Sodium sulfadiazine(SD-Na)CD101抗体包装100g
大肠埃希菌Escherichia│coli 质量规格:≥99.0%,BR柯萨奇病试剂盒胡黄连苷Ⅰ;PicrosideⅠ
ATCC21749资源名称: 尿氧化节杆菌 质量规格:HPLC≥98%,标准品柯萨奇病试剂盒黄杞苷;Emgelitin
不动杆菌Acinetobacter│sp. 质量规格:>500U/mg,BR抗组织转谷酰试剂盒和厚朴;Honokiol
单胺氧化酶染色液human PL-A2 (phospholipase A2) 人磷脂meiA2规格: 48T
Human visfatin 人内脏脂肪su规格: 48T
Humen IFN- Alpha 人α-干扰su规格: 48T
Humen IFN- Beta 人β-干扰su规格: 48T
Humen IFN- Gamma 人γ-干扰su规格: 48T