DNA凝胶加样缓冲液

DNA凝胶加样缓冲液公司正在销售的产品：Anti-OR52W1 Antibody大鼠Smad1
Anti-OR52W1 Antibody小鼠Ⅰ型胶原N末端肽
Anti-OR56B1 Antibody人碱性成纤维生长因子9
Anti-OR56B4 Antibody大鼠Smad7
Anti-OR56A3 Antibody大鼠26S蛋白酶体
Anti-OR56B4 Antibody小鼠5核苷酸酶
Ant

产品分类：核酸电泳

储存条件：4℃,12个月

用途：常规琼脂糖凝胶电泳中DNA凝胶加样缓冲液

注意事项：主要由溴酚蓝、甘油、蔗糖、二甲苯青FF等组成。

公司产品仅用于科研具有质量可靠、效果稳定、灵敏度高、操作简单、易保存等特点，咨询并订购！

 

 

 

配制与标定的实验原理：

1、用EDTA二钠盐配制EDTA标准溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一种白色晶体粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室温溶解度为0.02g/100g H2O。

2、标定EDTA标准溶液的工作基准试剂，基准试剂的预处理：称量前一般应先用稀盐酸洗去氧化层，然后用水洗净，烘干。

配制步骤：

1、取适量锌片放在100mL烧杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自来水、纯水洗净，烘干、冷却。

2、用直接称量法在干燥小烧杯中准确称取0.15～0.2g Zn，盖好小表面皿。

3、用滴管从烧杯口加入5mL 1:1 盐酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地将溶液转移至250mL容量瓶中，用纯水稀释至标线，摇匀。

 

 

实验方法与判定：

1.对照品溶液的稳定性

2.对照品溶液的配制：精密量取脑对照品适量，加无水乙醇制成每1ml含脑1mg的溶液，作为对照品溶液。

3.色谱条件：以交联键合聚乙二醇为固定相的毛细管柱；柱温120℃；进样口温度250℃；检测器温度250℃；分流进样，分流比10:1。理论塔板数按脑计算应不低于10000。

4.实验方法：配制的对照品溶液，一份置冷处保存，一份置室温中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份对照品溶液，三种储备液同时稀释制成每1ml中约含50ug的溶液。照气相色谱法，并依据新对照品的峰面积计算原对照品溶液的含量。记录下来，保证原对照品溶液含量在考察期相对平均偏差不超过2.0%，验证对照品溶液在使用期内稳定可靠。

使用方法：

1.  常用筛选浓度

注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线（kill curve），即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。

一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL；细菌/植物细胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 杀灭曲线的建立

注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线（剂量反应曲线）来实现，至少选择5个浓度。

1）  第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜；注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。

2）  根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。

3）  第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。

4）  接下来每3-4天更换新的含药物培养基。

5）  按照固定的周期（如每2天）进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数（通常是7-10天）内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。

3.   稳定转染细胞的筛选

1）  转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞（直接传代或者稀释后传代）。

注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%

2）  每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。

3）  筛选7天后观察并评估细胞克隆（集落）的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。

4）   挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。

5）   之后更换正常培养基培养即可。

茄镰孢14号染色体开放阅读框94抗体Human SEPHS1 ELISA Kit仓鼠E选择(SELE)免疫试剂盒

交链孢属四磷鸟苷水解抗体Human BGN(Biglycan) ELISA Kit骆驼

假丝酵母属人类免疫缺陷病2型/2型艾滋病病gp36抗体Human SERAC1 ELISA Kit骆驼转化生长因子β2(TGFβ2)免疫试剂盒

大豆慢生根瘤菌激上调神经肿瘤相关激抗体Human SERINC2 ELISA Kit骆驼脂蛋白磷脂A2(Lp-PL-A2)免疫试剂盒

双孢蘑菇β基己糖苷A抗体Human SERINC1 ELISA Kit骆驼天门冬基转移(AST)免疫试剂盒

空肠弯曲杆菌肌侧索硬化症相关蛋白HECW1抗体Human SERF2 ELISA Kit骆驼过氧化氢免疫试剂盒

烟色毛霉3-羟甲双加氧抗体Human SEMA3C ELISA Kit骆驼过氧化物(GSH-PX)免疫试剂盒

Gillisia limnaea舞蹈症相关蛋白40/8相关蛋白/第八因子相关蛋白抗体Human SELK ELISA Kit骆驼基转移(ALT)免疫试剂盒

大肠埃希菌舞蹈症相关相互作用蛋白1/雌激相关受体样蛋白1抗体Human SEMA4B ELISA Kit骆驼β内啡肽(β-EP)免疫试剂盒

柳巴克酵母舞蹈症蛋白相互作用蛋白13抗体Human SEMA3D ELISA Kit裸鼠

德尔布有孢酵母神经性舞蹈病蛋白抗体Human SEC5/EXOC2 ELISA Kit裸鼠克蛋白(CC16)免疫试剂盒

绿针假单胞菌舞蹈症相关蛋白1抗体Human SEMA4A ELISA Kit裸鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)免疫试剂盒

黄多孔菌亨廷顿(舞蹈症)相互作用蛋白1抗体Human SEC61alpha ELISA Kit裸鼠环加氧2(COX-2)免疫试剂盒

粪肠球菌葡萄糖氧化1抗体Human SDSL ELISA Kit驴

阿孙链霉菌转录调节因子HOXD9抗体Human SEC11A ELISA Kit驴孕激/孕(PROG)免疫试剂盒

同丝毛壳羟基酰水解样蛋白抗体Human SEC13 ELISA Kit驴透明质(HA)免疫试剂盒

节葡萄孢霉属Gonatobotrys│sp. 质量规格：分析标准品化矢车菊

红曲霉Monascus│sp. 质量规格：0.99矢车菊-3-O-葡萄糖苷

大肠埃希氏菌DH5a/pET30a/sigH M.SmegmatisEscherichia│coli 质量规格：分析标准品左旋肉碱
DNA凝胶加样缓冲液VD ELISA Kit  大鼠维生suD规格： 48T

VK1 ELISA Kit  大鼠维生suK1规格： 48T

VB12 ELISA Kit  大鼠维生suB12规格： 48T

VD3 ELISA Kit  大鼠维生suD3规格： 48T

VD2 ELISA Kit  大鼠维生suD2规格： 48T