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详细介绍
产品分类：酶抑制剂
储存条件：—20℃,12个月
用途：用于动物细胞或组织蛋白的提取,能zui大程度地保持蛋白质磷酸化,常用于动物细胞或组织中蛋白激酶活性和信号传导的研究。
注意事项：为多种磷酸酶抑制剂混合液,可有效抑制酪氨酸磷酸酶、丝氨酸磷酸酶、苏氨酸磷酸酶、酸性和碱性磷酸酶等各种磷酸酶。
公司产品仅用于科研具有质量可靠、效果稳定、灵敏度高、操作简单、易保存等特点，咨询并订购！
产品名称 | 规格 | 货号 |
磷酸酶抑制剂 | 10ml | FS-R7523 |
配制与标定的实验原理：
1、用EDTA二钠盐配制EDTA标准溶液的原因；
EDTA是四元酸，是一种白色晶体粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室温溶解度为0.02g/100g H2O。
2、标定EDTA标准溶液的工作基准试剂，基准试剂的预处理：称量前一般应先用稀盐酸洗去氧化层，然后用水洗净，烘干。
配制步骤：
1、取适量锌片放在100mL烧杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自来水、纯水洗净，烘干、冷却。
2、用直接称量法在干燥小烧杯中准确称取0.15～0.2g Zn，盖好小表面皿。
3、用滴管从烧杯口加入5mL 1:1 盐酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地将溶液转移至250mL容量瓶中，用纯水稀释至标线，摇匀。
实验方法与判定：
1.对照品溶液的稳定性
2.对照品溶液的配制：精密量取脑对照品适量，加无水乙醇制成每1ml含脑1mg的溶液，作为对照品溶液。
3.色谱条件：以交联键合聚乙二醇为固定相的毛细管柱；柱温120℃；进样口温度250℃；检测器温度250℃；分流进样，分流比10:1。理论塔板数按脑计算应不低于10000。
4.实验方法：配制的对照品溶液，一份置冷处保存，一份置室温中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份对照品溶液，三种储备液同时稀释制成每1ml中约含50ug的溶液。照气相色谱法，并依据新对照品的峰面积计算原对照品溶液的含量。记录下来，保证原对照品溶液含量在考察期相对平均偏差不超过2.0%，验证对照品溶液在使用期内稳定可靠。
使用方法：
1. 常用筛选浓度
注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线（kill curve），即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。
一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL；细菌/植物细胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线（剂量反应曲线）来实现，至少选择5个浓度。
1） 第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜；注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。
2） 根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3） 第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4） 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5） 按照固定的周期（如每2天）进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数（通常是7-10天）内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1） 转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞（直接传代或者稀释后传代）。
注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2） 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3） 筛选7天后观察并评估细胞克隆（集落）的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。
4） 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5） 之后更换正常培养基培养即可。
林生蜡蘑磷化Rad51抗体Anti-EDA Antibody2(PRM2)
具核梭杆菌聚核亚种磷化成骨特异性转录因子抗体Anti-EDA Antibody釉原蛋白Y-连锁(AMELY)
毛木耳（台耳）磷化G蛋白信号转导调节因子19抗体Anti-EDNRB Antibody釉原蛋白X-连锁(AMELX)
藤仓镰孢G蛋白信号转导调节因子19抗体Anti-EDNRB Antibody(PB0585)釉成熟蛋白(AMTN)
枯草芽孢杆菌环指蛋白1抗体Anti-EED Antibody诱导型一氧化氮合(NOS2)
粪肠球菌原癌基因c-Met相关酪激抗体Anti-EEA1 Antibody有机溶质载体伴侣1(OSCP1)
尿八叠球菌磷化原癌基因c-Met相关酪激抗体Anti-EGF Antibody游离脂肪受体1(FFAR1)
类诺氏菌属肿瘤血管内皮调节蛋白Robo4抗体Anti-EGF Antibody硬脂酰去饱和(SCD)
马里斯棒状杆菌轴突导向受体抗体Anti-EGF Antibody硬纤毛蛋白(STRC)
马赛菌络丝蛋白抗体Anti-EGF Antibody应激诱导磷蛋白1(STIP1)
头花革菌RUSC1抗体Anti-EGFR Antibody营养蛋白(TRO)
枯草芽胞杆菌RUSC2抗体Anti-EGFL6 Antibody隐花色2(CRY2)
酿酒酵母RAGEF2蛋白抗体Anti-EGFR Antibody隐花色1(CRY1)
酿酒酵母G蛋白偶联受体RAB23抗体Anti-EGFR Antibody乙-N-甲基转移(INMT)
山茶G蛋白信号调节因子14抗体Anti-EGFR Antibody阴离子/糖转运蛋白(AST)
油菜假单胞菌核转录因子NF-κB受体/核因子kB受体活化因子抗体Anti-EGFR Antibody易位关联膜蛋白1(TRAM1)
致病性大肠埃希菌Escherichia│coli 质量规格：>98%,BR
拟内孢霉Endomycopsis│sp. 质量规格：>98%,可用于培养
茎点霉Phoma│sp. 质量规格：>98%,BR
磷酸酶抑制剂ATRN/FITC 荧光su标记吸引suIgG规格： 0.2ml
ATX/Autotaxin/E-NPP2/FITC 荧光su标记自分泌运动因子IgG规格： 0.2ml
ATXN1/Ataxin 1/FITC 荧光su标记兔抗人、大、小鼠失调症蛋白1IgG规格： 0.2ml
Ataxin-1(phospho Ser776)/FITC 荧光su标记兔抗人、大、小鼠磷suan化失调症蛋白1IgG规格： 0.2ml
AU5 tag/FITC 荧光su标记AU5 tag标签IgG规格： 0.2ml
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