哺乳动物基因组DNA抽提试剂盒

哺乳动物基因组DNA抽提试剂盒公司正在销售的产品：Anti-PROCR Antibody人幽门螺杆素相关基因蛋白A-IgG
Anti-PRPF31 Antibody大鼠P53
Anti-PRPF19 Antibody人粘蛋白/粘液素7
Anti-PRPF39 Antibody大鼠环磷酸鸟苷
Anti-PRPF39 Antibody小鼠血管内皮生长因子受体1
Anti-PRPH Antibody大鼠

公司产品仅用于科研具有质量可靠、效果稳定、灵敏度高、操作简单、易保存等特点，咨询并订购！

产品分类：核酸提取

储存条件：—20℃,12个月

用途：采用了经典的蛋白酶K处理法,可以抽提到100-150kb以上的基因组DNA

 

 

配制与标定的实验原理：

1、用EDTA二钠盐配制EDTA标准溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一种白色晶体粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室温溶解度为0.02g/100g H2O。

2、标定EDTA标准溶液的工作基准试剂，基准试剂的预处理：称量前一般应先用稀盐酸洗去氧化层，然后用水洗净，烘干。

配制步骤：

1、取适量锌片放在100mL烧杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自来水、纯水洗净，烘干、冷却。

2、用直接称量法在干燥小烧杯中准确称取0.15～0.2g Zn，盖好小表面皿。

3、用滴管从烧杯口加入5mL 1:1 盐酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地将溶液转移至250mL容量瓶中，用纯水稀释至标线，摇匀。

 

 

实验方法与判定：

1.对照品溶液的稳定性

2.对照品溶液的配制：精密量取脑对照品适量，加无水乙醇制成每1ml含脑1mg的溶液，作为对照品溶液。

3.色谱条件：以交联键合聚乙二醇为固定相的毛细管柱；柱温120℃；进样口温度250℃；检测器温度250℃；分流进样，分流比10:1。理论塔板数按脑计算应不低于10000。

4.实验方法：配制的对照品溶液，一份置冷处保存，一份置室温中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份对照品溶液，三种储备液同时稀释制成每1ml中约含50ug的溶液。照气相色谱法，并依据新对照品的峰面积计算原对照品溶液的含量。记录下来，保证原对照品溶液含量在考察期相对平均偏差不超过2.0%，验证对照品溶液在使用期内稳定可靠。

葡萄生拟茎点霉菌肌肉特异性环指蛋白3抗体Human NUP50 ELISA Kit山梨脱氢(SDH)

芽孢杆菌属磷化原癌基因c-Met相关酪激抗体Human NUP205 ELISA Kit沙眼衣原体抗原(CT)

酿酒酵母丝裂原活化蛋白激13抗体Human NUDT6 ELISA Kit沙眼衣原体抗体(CT)

酿酒酵母多纤毛蛋白抗体Human NUP53 ELISA Kit沙眼衣原体蛋白样活性因子(CPAF)

枯草芽孢杆菌肌管相关蛋白8抗体Human NUMBL ELISA Kit沙眼衣原体(CT)

吉氏芽孢杆菌巨噬甘露糖受体2抗体Human PYGB(Glycogen phosphorylase, brain form) ELISA Kit沙漠猬因子(DHH)

不动杆菌周期G1的相互作用蛋白抗体Human NUDT8 ELISA Kit杀伤凝集样受体(KLR)

芽胞杆菌主导控制样蛋白3抗体Human NUP107 ELISA Kit杀伤免疫球蛋白样受体(KIR)

枯草芽孢杆菌斯氏亚种丝裂原活化蛋白激MKK3抗体Human NUP133 ELISA Kit杀菌性/通透性增加蛋白(BPI)

脱叶链霉菌MYSM1抗体Human NUP160 ELISA Kit杀菌肽B(CecB)

新月弯孢单羧转运蛋白-1抗体Human F11(Coagulation factor XI) ELISA Kit杀菌肽(cecropin)

巴斯德毕赤酵母微管相关蛋白1A抗体Human NUP153 ELISA Kit色上皮衍生因子(PEDF)

汉逊德巴酵母中期因子/肝结合生长因子抗体Human NUP50 ELISA Kit色酰tRNA合成(WARS)

米曲霉盐皮质激受体抗体Human NUP205 ELISA Kit色羟化(TPH)

类马链球菌促黑激α抗体Human NUDT6 ELISA Kit三角形四肽重复蛋白1(TTC1/TPR1)

桃中田壳小圆孢菌Myc基因相关X因子抗体Human NUP53 ELISA Kit状腺原(T3)

ATCC53103资源名称: 鼠李糖乳杆菌 质量规格：螯合剂五味子乙

链霉菌Streptomyces│sp. 质量规格：螯合剂五味子酯

铜绿假单胞菌Pseudomonas│aeruginosa 质量规格：>98.0%(T)五味子酯乙
哺乳动物基因组DNA抽提试剂盒MDC/CCL22(Mouse Macrophage-Derived Chemokine) ELISA Kit  小鼠巨噬细胞来源的趋化因子规格： 48T

RANTES/CCL5(Mouse regulated on activation in normal T-cell expressed and secreted) ELISA Kit  小鼠正常T细胞表达和分泌因子规格： 48T

MIP-2(Mouse Macrophage Inflammatory Protein 2) ELISA Kit  小鼠巨噬细胞炎性蛋白2规格： 48T

OT(Mouse oxytocin) ELISA Kit  小鼠催产su规格： 48T

MIP-3 Beta/ELC/CCL19(Mouse macrophage inflammatory protein 3 Beta) ELISA Kit  小鼠巨噬细胞炎性蛋白3β规格： 48T

使用方法：

1.  常用筛选浓度

注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线（kill curve），即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。

一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL；细菌/植物细胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 杀灭曲线的建立

注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线（剂量反应曲线）来实现，至少选择5个浓度。

1）  第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜；注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。

2）  根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。

3）  第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。

4）  接下来每3-4天更换新的含药物培养基。

5）  按照固定的周期（如每2天）进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数（通常是7-10天）内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。

3.   稳定转染细胞的筛选

1）  转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞（直接传代或者稀释后传代）。

注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%

2）  每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。

3）  筛选7天后观察并评估细胞克隆（集落）的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。

4）   挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。

5）   之后更换正常培养基培养即可。