详细介绍
商品属性:
产品名称 | |
检测方法 | 微量法 |
产品规格 | 100管/96样 |
产品货号 | AS632132 |
商品介绍:
测定意义: GST是一种具有多种生理功能的蛋白质家族,主要存在于细胞质内。GST是体内解毒酶系统的重要组成部分,主要催化各种化学物质及其代谢产物与GSH的巯基共价结合,使亲电化合物变为亲水物质,易于从胆汁或尿液中排泄,达到将体内各种潜在或具备毒性的物质降解并排出体外的目的。因此,GST在保护细胞免受亲电子化合物的损伤中发挥着重要的生物学功能。此外,因为GST具有GSH-Px活性,亦称为non-Se GSH-Px,具有修复氧化破坏的大分子如DNA、蛋白质等的功能。注意,GST催化的反应减少GSH含量,但是不增加GSSG含量。 测定原理: GST催化GSH与CDNB结合,其结合产物的光吸收峰波长为340nm;通过测定340nm波长处吸光度上升速率,即可计算出GST活性。 自备仪器和用品: 低温离心机、水浴锅、可调节移液器、紫外-可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、和蒸馏水。 |
试剂的组成和配制:
酸性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;碱性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体10 mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体3 mL×1瓶,4℃保存;试剂三:粉剂×1瓶,-20 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂四:粉剂×1瓶,4 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂五:液体3.6mL×1瓶,4 ℃保存;试剂六:液体30mL×1瓶,4 ℃保存;试剂七:液体50mL×1瓶,4 ℃保存。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(浆)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(浆)体积(ml):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照血清(浆)体积(ml):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml碱性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照组织质量(g):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照组织质量(g):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml碱性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):酸性 提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):碱 性提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 |
ADH测定操作:
1. 分光光度计预热30 min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意:空白管只需测定一次。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
CD30分子(CD30)英文名:CD30 ELISA Kit大脑蛋白2抗体包装1g
CD19分子(CD19)英文名:CD19 ELISA KitB转录激活因子抗体包装250mg
CC趋化因子受体6(CCR-6)英文名:CCR-6 ELISA KitBCL6B抗体包装5g
cAMP反应元件结合蛋白(CREB)英文名:CREB ELISA KitBAP31蛋白抗体包装1g
Ca-ATP(Ca-ATPase)英文名:Ca-ATPase ELISA Kit支链基转2抗体包装1g
B因子(BF)英文名:BF ELISA KitBCL2相关蛋白A1抗体包装250mg
B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)英文名:Bcl-2 ELISA KitB淋巴瘤蛋白3抗体包装5g
B细胞淋巴瘤-XL(Bcl-xl)英文名:Bcl-xl ELISA Kit转录因子MYB相关蛋白B抗体包装1g
B细胞活化因子(BAFF)英文名:BAFF ELISA Kit防御β1/Defensin β1抗体包装25g
BH3结构域凋亡诱导蛋白(Bid)英文名:Bid ELISA KitB活化因子受体抗体包装5g
Bcl-2相关X蛋白(BAX)英文名:BAX ELISA KitTNF家族B激活因子抗体包装1g
Apelin 13(AP13)英文名:AP13 ELISA Kit蛇巴曲抗体包装5g
apelin 12(AP12)英文名:AP12 ELISA Kit大脑蛋白2抗体包装100g
Ⅳ型胶原(Col Ⅳ)英文名:Col Ⅳ ELISA Kit程序性死亡配体1抗体包装25g
Ⅲ型前胶原肽(PⅢP)英文名:PⅢP ELISA KitB7-H4抗体包装1g
糖还原相关蛋白质抗体促状腺胚胎因子(TEF)MDM2 antagonist nutlin-3 is a potent inducer of apoptosis.
谷胱甘肽S转移酶(GST)测试盒100管/96样微小毛霉 5-溴吡啶-3-(N-乙基)甲酰磷酸化IκB激-αElisa
Rhizobium multihospitium 3,4-二苄磷酸化N-甲基-D-天冬Elisa
Pseudomonas eucalypticola 3,5-二-2,4,6-三氟吡啶磷酸化α-氨基羟甲基恶唑酸Elisa
树舌1-2 2,5-二溴对苯二甲酸二乙酯磷酸化表皮生长因子受体Elisa
短小芽孢杆 6-三氟甲基-2-氧化磷酸化肌球蛋白轻链Elisa
短小芽孢杆 4-氟-2-甲氧基苯酸磷酸化神经丝HElisa
多形环纹炭团 3--2,4,5,6-四氟吡啶磷酸化外信号调节激Elisa
友好戈登氏 ,6-二溴-4-氟苯磷酸化外信号调节激Elisa
瑞士乳杆 三(6,6,7,7,8,8,8-七氟-2,2-二甲基-3,5-辛二酮基)镨(Ⅲ)[核磁共振位移试剂]磷酸化腺苷酸活化蛋白激Elisa
麦芽糖假丝酵母 十二碳二酸二甲酯磷酸化信号传导子及转录激活子1Elisa
粗糙脉孢 6-乙酸基-7-甲氧基-3H-喹唑啉-4-酮磷酸化信号传导子及转录激活子3Elisa
德夸链霉 二十二烷基基化磷酸肌酸激Elisa
禾谷丝核 6-羟基-7-甲氧基喹唑啉-4-酮磷酸烯式酮酸羧激Elisa
两型蜡蚧 2,3-二甲酯磷脂Elisa
葡萄牙棒孢酵母 4-溴-2,6-二氟甲苯磷脂肌3激Elisa