即用型细菌冻存液

即用型细菌冻存液公司正在销售的产品：Anti-SLC26A3 Antibody人低密度脂蛋白复合物
Anti-SLC27A5 Antibody小鼠胆囊收缩素/肠促肽
Anti-SLC28A2 Antibody大鼠17羟皮质类固
Anti-SLC28A2 Antibody小鼠脑肠肽
Anti-SLC30A9 Antibody人抗增殖核抗原抗体
Anti-SLC34A2 Antibody大鼠N-乙

公司产品仅用于科研具有质量可靠、效果稳定、灵敏度高、操作简单、易保存等特点，咨询并订购！

储存条件：室温,12个月

用途：各种常见细菌的冷冻保存

注意事项：主要由无菌甘油、防腐剂等组成。

 

 

配制与标定的实验原理：

1、用EDTA二钠盐配制EDTA标准溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一种白色晶体粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室温溶解度为0.02g/100g H2O。

2、标定EDTA标准溶液的工作基准试剂，基准试剂的预处理：称量前一般应先用稀盐酸洗去氧化层，然后用水洗净，烘干。

配制步骤：

1、取适量锌片放在100mL烧杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自来水、纯水洗净，烘干、冷却。

2、用直接称量法在干燥小烧杯中准确称取0.15～0.2g Zn，盖好小表面皿。

3、用滴管从烧杯口加入5mL 1:1 盐酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地将溶液转移至250mL容量瓶中，用纯水稀释至标线，摇匀。

 

 

实验方法与判定：

1.对照品溶液的稳定性

2.对照品溶液的配制：精密量取脑对照品适量，加无水乙醇制成每1ml含脑1mg的溶液，作为对照品溶液。

3.色谱条件：以交联键合聚乙二醇为固定相的毛细管柱；柱温120℃；进样口温度250℃；检测器温度250℃；分流进样，分流比10:1。理论塔板数按脑计算应不低于10000。

4.实验方法：配制的对照品溶液，一份置冷处保存，一份置室温中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份对照品溶液，三种储备液同时稀释制成每1ml中约含50ug的溶液。照气相色谱法，并依据新对照品的峰面积计算原对照品溶液的含量。记录下来，保证原对照品溶液含量在考察期相对平均偏差不超过2.0%，验证对照品溶液在使用期内稳定可靠。

鲁氏接合酵母NADH氧化还原辅10抗体Human ADAM12(Disintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 12) ELISA Kit钙调磷(CaN)

乳乳球菌膜相关的蛋白质HEM2抗体Human CD200(OX-2 membrane glycoprotein) ELISA Kit钙调结合蛋白(CALD)

木伏革菌=佐佐木薄膜革菌跨膜受体蛋白Notch-2抗体Human CCL8(C-C motif chemokine 8) ELISA Kit钙腔蛋白(CALU)

黄杆菌磷化KB抑制蛋白β抗体Human MME(Neprilysin) ELISA Kit钙联蛋白(CNX)

变黑梨花欧文氏菌磷化核因子p50/k基因结合核因子抗体Human ENG(Endoglin) ELISA Kit钙联蛋白(calnexin)

球形节杆菌泛样蛋白NEDD8抗体Human CD147(Extracellular Matrix Metalloproteinase Inducer) ELISA Kit钙离子通道抗体(VGCC)

拟茎点霉核因子1C型抗体Human CD13(Aminopeptidase N) ELISA Kit钙结合蛋白(CR)

酿酒酵母磷化神经正五聚体1抗体Human sCD163(Soluble Cluster of Differentiation 163) ELISA Kit钙激活中性蛋白6(CAPN6)

黑曲霉RNA结合蛋白NOB1抗体Human ApoB100(Apolipoprotein B100) ELISA Kit钙激活中性蛋白1(CAPN1)

简青霉磷化T激活核转录因子4抗体Human CCL17(C-C motif chemokine 17) ELISA Kit钙蛋白抑制蛋白(CAST)

酿酒酵母胆汁受体抗体Human ADAM9(Disintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 9) ELISA Kit钙蛋白抑抗体(ACAST-DⅣ)

 (蜡状芽胞杆菌)NFKB激活蛋白抗体Human CCL18(C-C motif chemokine 18) ELISA Kit钙蛋白2(M/II)大亚基(CAPN2)(CAPN2)

根瘤菌NLE1蛋白抗体Human ADAMTS1(A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 1) ELISA Kit钙/钙调依赖性蛋白激2(CAMK 2)

季也蒙假丝酵母磷化一氧化氮合成3（内皮型）抗体Human MIF(Macrophage migRation inhibitory factor) ELISA Kit富组蛋白(HTN5)

传染性法氏囊病病磷化一氧化氮合成3（内皮型）抗体Human MICA(MHC class I polypeptide-related sequence A) ELISA Kit富组蛋白(histatin-5)

芽孢杆菌属磷化一氧化氮合成3（内皮型）抗体Human MIP-3β(Macrophage Inflammatory Protein 3β) ELISA Kit富组糖蛋白(HRG)

凝结芽孢杆菌Bacillus│coagulans 质量规格：>98%,VEGFR2选择性抑制剂

大肠埃希菌Escherichia│coli 质量规格：>98%,BR

变异链霉菌Streptomyces│variabilis 质量规格：>98%,标准品
即用型细菌冻存液sPECAM-1/sCD31(Mouse soluble platelet endothelial cell adhesion molecule 1) ELISA Kit  小鼠可溶性血小板内皮细胞粘附分子1规格： 48T

BMP-7(Mouse Bone morphogenetic protein 7) ELISA Kit  小鼠骨成型蛋白7规格： 48T

HA(Mouse Hyaluronic acid) ELISA Kit  小鼠透明质suan规格： 96T

GLP-1HA(Mouse ghcagons-like pepfide 1) ELISA Kit  小鼠胰高血糖su样肽1规格： 48T

CCK(Mouse Cholecystokinin) ELISA Kit  小鼠胆囊收缩su/肠促胰mei肽规格： 48T

使用方法：

1.  常用筛选浓度

注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线（kill curve），即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。

一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL；细菌/植物细胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 杀灭曲线的建立

注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线（剂量反应曲线）来实现，至少选择5个浓度。

1）  第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜；注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。

2）  根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。

3）  第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。

4）  接下来每3-4天更换新的含药物培养基。

5）  按照固定的周期（如每2天）进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数（通常是7-10天）内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。

3.   稳定转染细胞的筛选

1）  转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞（直接传代或者稀释后传代）。

注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%

2）  每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。

3）  筛选7天后观察并评估细胞克隆（集落）的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。

4）   挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。

5）   之后更换正常培养基培养即可。