双链DNA中和缓冲液

双链DNA中和缓冲液公司正在销售的产品：Anti-RPL15 AntibodyHpt/HP小鼠16α羟基雌酮1
Anti-RPL12 Antibody人抗载脂蛋白抗体A1
Anti-RPL18 Antibody小鼠α1酸性糖蛋白
Anti-RPL14 Antibody大鼠25羟基
Anti-RPL26L1 Antibody人抗胰岛素受体抗体
Anti-RPL27A Antibody人抗胃

公司产品仅用于科研具有质量可靠、效果稳定、灵敏度高、操作简单、易保存等特点，咨询并订购！

产品分类：核酸杂交

储存条件：室温,12个月

用途：又称为中性转移缓冲液,仅用于双链DNA的杂交

注意事项：由tris-hcl、氯化钠组成。

 

 

配制与标定的实验原理：

1、用EDTA二钠盐配制EDTA标准溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一种白色晶体粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室温溶解度为0.02g/100g H2O。

2、标定EDTA标准溶液的工作基准试剂，基准试剂的预处理：称量前一般应先用稀盐酸洗去氧化层，然后用水洗净，烘干。

配制步骤：

1、取适量锌片放在100mL烧杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自来水、纯水洗净，烘干、冷却。

2、用直接称量法在干燥小烧杯中准确称取0.15～0.2g Zn，盖好小表面皿。

3、用滴管从烧杯口加入5mL 1:1 盐酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地将溶液转移至250mL容量瓶中，用纯水稀释至标线，摇匀。

 

 

实验方法与判定：

1.对照品溶液的稳定性

2.对照品溶液的配制：精密量取脑对照品适量，加无水乙醇制成每1ml含脑1mg的溶液，作为对照品溶液。

3.色谱条件：以交联键合聚乙二醇为固定相的毛细管柱；柱温120℃；进样口温度250℃；检测器温度250℃；分流进样，分流比10:1。理论塔板数按脑计算应不低于10000。

4.实验方法：配制的对照品溶液，一份置冷处保存，一份置室温中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份对照品溶液，三种储备液同时稀释制成每1ml中约含50ug的溶液。照气相色谱法，并依据新对照品的峰面积计算原对照品溶液的含量。记录下来，保证原对照品溶液含量在考察期相对平均偏差不超过2.0%，验证对照品溶液在使用期内稳定可靠。

樟疫霉粘蛋白-2/上皮膜抗原2抗体Human RGS3(Regulator of G-protein signaling 3) ELISA Kit人抗增殖核抗原抗体(PCNA)

贝伦格勒座腔菌梨专化型粘蛋白4抗体Human RGS10(Regulator of G-protein signaling 10) ELISA Kit人抗载脂蛋白抗体A1(Apo A1)

酿酒酵母v-maf 肌腱膜纤维肉瘤癌基因同源物A抗体Human HMGB4(High mobility group protein B4) ELISA Kit人抗原提呈相关转运蛋白/T活化蛋白(TAP)

Phoma medicaginis var. medicaginis基质金属蛋白-10抗体Human PENK(Proenkephalin-A) ELISA Kit人抗硬皮病抗体70(SCL70/topoⅠ)

松乳菇突变型P53抗体Human RGS10(Regulator of G-protein signaling 10) ELISA Kit人抗异质型核糖核蛋白抗体/抗RA33抗体(anti-hnRNP-ab/anti-RA33-ab)

黄盖蜜环菌蜜蜂微孢子虫蛋白抗体Human ARSA(Arylsulfatase A) ELISA Kit人抗胰岛受体抗体(AIRA)

粉状毕赤氏酵母基质金属蛋白-24抗体Human HMGB4(High mobility group protein B4) ELISA Kit人抗(AT)

黑络丸巨噬甘露糖受体抗体Human RGS3(Regulator of G-protein signaling 3) ELISA Kit人抗眼肌抗体(EMAb)

酿酒酵母胃粘液抗体Human ATOH1(Protein atonal homolog 1) ELISA Kit人抗血小板抗体IgM(PA-IgM)

枯草芽孢杆菌基质金属蛋白20抗体Human KLF14(Krueppel-like factor 14) ELISA Kit人抗血小板抗体IgG/M/A(PA-IgG/M/A)

平脐蠕孢菌尿调节蛋白抗体Human MYH9(Myosin-9) ELISA Kit人抗血小板抗体IgG(PA-IgG)

根瘤菌肌增强因子2抗体Human AMSH(alpha-MSH) ELISA Kit人抗血小板抗体IgA(PA-IgA)

枯草芽孢杆菌肌原调节蛋白抗体Human PRSS2(Trypsin-2) ELISA Kit人抗血小板抗体(anti-PA Ab)

越南芽孢杆菌神经母特异性转移因子抗体Human IL17RB(Interleukin-17 receptor B) ELISA Kit人抗胸腺球蛋白(ATG)

酿酒酵母组织相关抗原HLA-B15抗体Human CDO1(Cysteine dioxygenase type 1) ELISA Kit人抗信号识别颗粒抗体(SRP)

Gordonia蛋腺苷转移抗体Human CYP2D6(Cytochrome P450 2D6) ELISA Kit人抗心磷脂抗体IgM(ACA-IgM)

腐生葡萄球菌Staphylococcus│saprophyticus 质量规格：≥30units/mg protein,sigma原装蒙花苷

细极链格孢蒜生变种Alternaria│tenuissima var. alliicola 质量规格：进分没食子

无乳链球菌Streptococcus│agalactiae 质量规格：≥95%,半硫盐木犀草苷
双链DNA中和缓冲液ENA-78/CXCL5(Mouse Epithelial neutrophil activating peptide 78) ELISA Kit  小鼠上皮中性粒细胞活化肽78规格： 48T

OLAb(Mouse oxidized lowdensity lipoprotein antibody) ELISA KIT  小鼠氧化低密度脂蛋白规格： 48T

ASMA(Mouse Smooth Muscle Antibody) ELISA Kit  小鼠抗平滑肌规格： 48T

M30(Mouse Embryonic Stem MESPU30) ELISA Kit  小鼠胚胎干细胞系MESPU30规格： 48T

NF-κB p65(Mouse nuclear factor-κB p65) ELISA Kit  小鼠核因子κB亚基p65亲和肽规格： 48T

使用方法：

1.  常用筛选浓度

注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线（kill curve），即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。

一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL；细菌/植物细胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 杀灭曲线的建立

注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线（剂量反应曲线）来实现，至少选择5个浓度。

1）  第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜；注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。

2）  根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。

3）  第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。

4）  接下来每3-4天更换新的含药物培养基。

5）  按照固定的周期（如每2天）进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数（通常是7-10天）内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。

3.   稳定转染细胞的筛选

1）  转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞（直接传代或者稀释后传代）。

注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%

2）  每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。

3）  筛选7天后观察并评估细胞克隆（集落）的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。

4）   挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。

5）   之后更换正常培养基培养即可。