化工仪器网
详细介绍
商品介绍：
测定意义： α-GAL (EC 3.2.1.22)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，能专一地催化α半乳糖苷键的水解，主要参与棉子糖、水苏糖、蜜二糖和半乳甘露聚糖等半乳糖苷的降解。α-GAL对于植物种子的萌发至关重要，种子萌发初期，其催化产生的D-半乳糖通过糖酵解途径迅速转化和消耗，为种子的萌发提供最初的能量来源，后期则主要参与细胞壁储藏多糖水解。 测定原理： α-GAL分解对-硝基苯-α-D-吡喃半乳糖苷生成对-硝基苯酚，后者在400nm有最大吸收峰，通过测定吸光值升高速率来计算α-GAL活性。 自备用品： 可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。 |
商品属性：
产品名称 | |
检测方法 | 微量法 |
产品规格 | 100管/48样 |
产品货号 | AS6321244 |
试剂的组成和配制：
酸性提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；碱性提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体10 mL×1瓶，4℃保存；试剂二：液体3 mL×1瓶，4℃保存；试剂三：粉剂×1瓶，-20 ℃保存，用时加入3mL蒸馏水，混匀，用不完的试剂4℃保存一周；试剂四：粉剂×1瓶，4 ℃保存，用时加入3mL蒸馏水，混匀，用不完的试剂4℃保存一周；试剂五：液体3.6mL×1瓶，4 ℃保存；试剂六：液体30mL×1瓶，4 ℃保存；试剂七：液体50mL×1瓶，4 ℃保存。
自备仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
NAD+和NADH的提取：
1、血清（浆）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取：按照血清（浆）体积（ml）：酸性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建 议取约0.1ml血清（浆），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）； 冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl碱性提取液使之中 和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提取：按照血清（浆）体积（ml）：碱性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建 议取约0.1ml血清（浆），加入1ml碱性提取液），95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）； 冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：按照组织质量（g）：酸性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建议取约0.1g 组织，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）；冰浴 中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提取：按照组织质量（g）：碱性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建议取约0.1g 组织，加入1ml碱性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）；冰浴 中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：先收集细胞或细菌到离心管内，弃上清，按照细菌或细胞数量（104个）：酸性 提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液）， 超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次），95℃水浴5min （盖紧，以防止水分散失）；冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加 入500μl碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提取：先收集细胞或细菌到离心管内，弃上清，按照细菌或细胞数量（104个）：碱 性提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液）， 超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次），95℃水浴5min （盖紧，以防止水分散失）；冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 |
ADH测定操作：
1. 分光光度计预热30 min，调节波长到340 nm，蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四，迅速混匀后于340nm测定吸光值变化，分别记录15s和75s时吸光值，分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四，迅速混匀后于340nm测定吸光值变化，分别记录15s和75s时吸光值，分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意：空白管只需测定一次。
羚羊角（标准品）英文名： 1,1-Cyclopropanedicarboxylic acid脂肪瘤相关蛋白抗体包装5g
硫基葡萄糖（标准品）英文名： TAPS层粘连蛋白β4抗体包装5MG
硫长春质碱(标准品)英文名： LY294002黄体激释放激/促性腺激释放激抗体包装1g
硫黄连碱（标准品）英文名： SHES蛋白赖-6-氧化抗体包装5g
硫氢小檗碱（标准品）英文名： PHES白酪激受体抗体包装25g
硫软骨(标准品)英文名： AHES同源盒转录因子LMX1A抗体包装5g
硫小檗碱（标准品）英文名： HES转化生长因子β1结合蛋白1抗体包装25g
柳穿鱼黄（标准品）英文名： DIPSO Monosodium狂躁基因同源蛋白MFNG抗体包装5g
龙胆（坚龙胆）（标准品）英文名： DIPSOE3泛蛋白连接MIB1抗体包装100g
龙胆（龙胆）（标准品）英文名： DMPS主导控制样蛋白1抗体包装25g
龙胆花（标准品）英文名： CHPS-Na主导控制样蛋白2抗体包装500g
龙胆苦苷（标准品）英文名： Sodium 2-bromoethanesulphonate丝裂原活化蛋白激6抗体包装100g
龙胆；2,5-二羟基(标准品)英文名： BICINE磷化丝/苏蛋白激MST4,MST3,STK25抗体包装25g
龙脷叶（标准品）英文名： BES Sodium Salt表皮生长因子样蛋白Megf10抗体包装1g
龙脑（标准品）英文名： BES free acidMPP4蛋白抗体包装5g
结核分枝杆菌Mycobacterium│tuberculosis 质量规格：99%，santa原装sc-203765抗磷脂酰甘油抗体试剂盒β，β’-二基烯酰阿宁;β, β-
中国动性微菌Planomicrobium│chinense 质量规格：>98%,BR抗磷脂酰甘油抗体试剂盒3,29-二酰基栝楼仁三;3,29
根瘤菌Rhizobium│sp. 质量规格：>98%,BR培养级抗磷脂酰抗体试剂盒二羟E;Coronarin E
α半乳糖苷酶（αGAL）测试盒100管/48样猪丹丝 1,4-二-2,5-二甲α-乳白蛋白Elisa
越南芽孢杆 1-(4-溴苯基)辛烷ACC合成Elisa
红缘层孔 -甲基-2-苯基烷乙酸氧化Elisa
平田头菇10-4 2-氨基-6-羟基吡啶麦芽糖Elisa
大肠埃希 1-苄基-5-氧-3-吡咯烷羧酸甲酯糖磷酸异构Elisa
嗜酸乳杆 盐酸氟哌噻吨果糖-1,6-二磷酸缩Elisa
高卢蜜环 5-氨基-1-(4-)-1H-吡唑-4-甲果糖-6-磷酸-1-磷酸转移Elisa
黑根霉 L-苯甘甲酯盐酸盐结合态乙酸Elisa
聚生壳 2-溴-3-氟-5-吡啶β甘露聚糖Elisa
枯草芽孢杆枯草亚种 4-甲基苄磺酰β-木糖苷Elisa
沃氏富盐 BOC-甲基-L-丝二环己基盐查尔异构Elisa
多主葡萄壳 3-溴吡-2-羧酸甲酯亚硝酸还原Elisa
变异链霉 3,4-二甲基异酸苯酯辣椒斑驳病Elisa
明尼苏达被毛孢 丁酸异戊酯脱氢奎尼酸合成Elisa
双孢蘑菇 5-硝基-3,4-二氢萘-1(2H)-酮3-脱氧-阿伯庚酮酸糖-7-磷酸合Elisa
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
化工仪器网