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详细介绍
产品分类：核酸杂交
储存条件：室温,12个月
用途：用于将DNA转移至不带电荷的膜上
注意事项：由tris-hcl、氯化钠组成。
公司产品仅用于科研具有质量可靠、效果稳定、灵敏度高、操作简单、易保存等特点，咨询并订购！
产品名称 | 规格 | 货号 |
DNA中和缓冲液Ⅰ | 100ml | FS-R7405 |
配制与标定的实验原理：
1、用EDTA二钠盐配制EDTA标准溶液的原因；
EDTA是四元酸，是一种白色晶体粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室温溶解度为0.02g/100g H2O。
2、标定EDTA标准溶液的工作基准试剂，基准试剂的预处理：称量前一般应先用稀盐酸洗去氧化层，然后用水洗净，烘干。
配制步骤：
1、取适量锌片放在100mL烧杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自来水、纯水洗净，烘干、冷却。
2、用直接称量法在干燥小烧杯中准确称取0.15～0.2g Zn，盖好小表面皿。
3、用滴管从烧杯口加入5mL 1:1 盐酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地将溶液转移至250mL容量瓶中，用纯水稀释至标线，摇匀。
实验方法与判定：
1.对照品溶液的稳定性
2.对照品溶液的配制：精密量取脑对照品适量，加无水乙醇制成每1ml含脑1mg的溶液，作为对照品溶液。
3.色谱条件：以交联键合聚乙二醇为固定相的毛细管柱；柱温120℃；进样口温度250℃；检测器温度250℃；分流进样，分流比10:1。理论塔板数按脑计算应不低于10000。
4.实验方法：配制的对照品溶液，一份置冷处保存，一份置室温中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份对照品溶液，三种储备液同时稀释制成每1ml中约含50ug的溶液。照气相色谱法，并依据新对照品的峰面积计算原对照品溶液的含量。记录下来，保证原对照品溶液含量在考察期相对平均偏差不超过2.0%，验证对照品溶液在使用期内稳定可靠。
使用方法：
1. 常用筛选浓度
注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线（kill curve），即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。
一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL；细菌/植物细胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线（剂量反应曲线）来实现，至少选择5个浓度。
1） 第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜；注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。
2） 根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3） 第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4） 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5） 按照固定的周期（如每2天）进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数（通常是7-10天）内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1） 转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞（直接传代或者稀释后传代）。
注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2） 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3） 筛选7天后观察并评估细胞克隆（集落）的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。
4） 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5） 之后更换正常培养基培养即可。
芽孢杆菌属胃动抗体Human CAV1(Caveolin-1) ELISA Kit人抗糖蛋白抗体(GP)
酿酒酵母甘露聚糖结合凝集抗体Human MYH9(Myosin-9) ELISA Kit人抗髓鞘相关糖蛋白抗体(MAG Ab)
双孢菇膜相关环指蛋白11抗体Human AMSH(alpha-MSH) ELISA Kit人抗髓磷脂抗体IgA(anti-myelin Ab)
异常威克汉姆酵母结核分枝杆菌Ag85B抗体Human SERPINA6(Corticosteroid-binding globulin) ELISA Kit人抗髓磷脂抗体IgA(AMA IgA)
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球孢白僵菌磷化微管相关蛋白4抗体Human NR1H2(Oxysterols receptor LXR-beta) ELISA Kit人抗鼠抗体(HAMA)
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巴氏醋杆菌黑色瘤相关抗原C2抗体Human CAV1(Caveolin-1) ELISA Kit人抗肾上腺皮质抗体(AAA)
酿酒酵母黑色瘤抗原样基因2抗体Human HPR(Haptoglobin-related protein) ELISA Kit人抗神经元核抗体2型/抗Ri抗体(ANNA-2/Ri)
假交替单孢菌黑色瘤相关抗原C1抗体Human TALDO1(Transaldolase) ELISA Kit人抗神经元核抗体1型/抗Hu抗体(ANNA-1/Hu)
日本慢生根瘤菌黑色瘤相关抗原B2抗体Human PSG3(Pregnancy-specific beta-1-glycoprotein 3) ELISA Kit人抗抗体(GM1)
运动节杆菌黑色瘤相关抗原B4抗体Human FABP4(Fatty acid-binding protein, adipocyte) ELISA Kit人抗杀菌通透性增高蛋白抗体(BPI-Ab)
乡间布丘氏菌组蛋白乙酰转移抗体（脑膜瘤表达抗原5）Human ELANE(Neutrophil elastase) ELISA Kit人抗腮腺管抗体(anti-parotid duct Ab)
叶点霉属磷化微管相关蛋白4抗体Human COL4A1(Collagen alpha-1(IV) chain) ELISA Kit人抗软骨抗体(anti-cartilage-Ab)
假单胞菌Pseudomonas│sp. 质量规格：BR,70万u/ml液体乙
柑橘绿霉病Penicillium│digitatum (Pers.) Sacc. 质量规格：BR,活5万,粉末
大肠埃希氏菌Escherichia│coli 质量规格：≥2000KU/mg protein,(牛胰)芦丁
DNA中和缓冲液Ⅰhiston-H2b(Mouse histon-H2b) ELISA Kit 小鼠组蛋白H2b规格： 48T
VCAM-1/CD6(Mouse Vascuolar cell adhesion molecule 1) ELISA Kit 小鼠血管内皮细胞粘附分子1规格： 48T
GR(Mouse glucocorticoid receptor) ELISA Kit 小鼠糖皮质类固chun受体规格： 48T
LHRH(Mouse Luteinizing Hormone-Releasing Hormone) ELISA Kit 小鼠黄体生成su释放激su规格： 48T
NGB(Mouse Neuroglobin) ELISA Kit 小鼠脑红蛋白规格： 48T
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