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详细介绍
商品介绍：
测定意义： GCS（EC 2.4.1.11）催化UDPG和葡萄糖残基生成糖原和UTP，以α-1，4-糖苷键相连延长糖链，是肝和肌肉糖原合成酶的限速酶，是胰岛素作用的主要靶酶，对糖代谢的调节和血糖稳态的维持具有重要作用。 测定原理： GCS催化UDPG和葡萄糖残基生成糖原和UTP，丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶进一步依次催化NADH氧化生成NAD+，在340nm下测定NADH下降速率，即可反映GCS活性。 需自备的仪器和用品： 紫外分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL微量石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。 |
商品属性：
产品名称 | |
检测方法 | 紫外分光光度法 |
产品规格 | 50管/48样 |
产品货号 | AS6321377 |
试剂的组成和配制：
酸性提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；碱性提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体10 mL×1瓶，4℃保存；试剂二：液体3 mL×1瓶，4℃保存；试剂三：粉剂×1瓶，-20 ℃保存，用时加入3mL蒸馏水，混匀，用不完的试剂4℃保存一周；试剂四：粉剂×1瓶，4 ℃保存，用时加入3mL蒸馏水，混匀，用不完的试剂4℃保存一周；试剂五：液体3.6mL×1瓶，4 ℃保存；试剂六：液体30mL×1瓶，4 ℃保存；试剂七：液体50mL×1瓶，4 ℃保存。
自备仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
NAD+和NADH的提取：
1、血清（浆）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取：按照血清（浆）体积（ml）：酸性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建 议取约0.1ml血清（浆），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）； 冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl碱性提取液使之中 和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提取：按照血清（浆）体积（ml）：碱性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建 议取约0.1ml血清（浆），加入1ml碱性提取液），95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）； 冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：按照组织质量（g）：酸性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建议取约0.1g 组织，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）；冰浴 中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提取：按照组织质量（g）：碱性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建议取约0.1g 组织，加入1ml碱性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）；冰浴 中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：先收集细胞或细菌到离心管内，弃上清，按照细菌或细胞数量（104个）：酸性 提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液）， 超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次），95℃水浴5min （盖紧，以防止水分散失）；冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加 入500μl碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提取：先收集细胞或细菌到离心管内，弃上清，按照细菌或细胞数量（104个）：碱 性提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液）， 超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次），95℃水浴5min （盖紧，以防止水分散失）；冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 |
ADH测定操作：
1. 分光光度计预热30 min，调节波长到340 nm，蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四，迅速混匀后于340nm测定吸光值变化，分别记录15s和75s时吸光值，分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四，迅速混匀后于340nm测定吸光值变化，分别记录15s和75s时吸光值，分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意：空白管只需测定一次。
谷棒杆菌Ⅲ型磷化丝切蛋白抗体Human FGL1(Fibrinogen Like Protein 1) ELISA Kit人泡状过表达癌症促生存蛋白1(VOPP1/ECOP/GASP)免疫试剂盒
中慢生华癸根瘤菌磷化周期检测点激2抗体Human FGL2(Fibrinogen Like Protein 2) ELISA Kit人排序连接蛋白3(SNX3)免疫试剂盒
库尔勒海洋杆菌磷化分裂周期蛋白25抗体Human FRS2(Fibroblast Growth Factor Receptor SubstRate 2) ELISA Kit人偶联因子6(CF6)免疫试剂盒
香菇磷化分裂周期蛋白25抗体Human fPSA(Free Prostate Specific Antigen) ELISA Kit人牛小肠碱性磷(CIAP)免疫试剂盒
木糖葡糖醋杆菌后期促进复合蛋白3抗体Human FSHR(Follicle Stimulating Hormone Receptor) ELISA Kit人牛奶过敏原特异性IgE抗体免疫试剂盒
植物乳杆菌磷化CRK抗体Human FGL1(Fibrinogen Like Protein 1) ELISA Kit人牛儿基焦磷合(GGPS1)免疫试剂盒
枯草芽孢杆菌钙粘蛋白6抗体Human FGFR4(Fibroblast Growth Factor Receptor 4) ELISA Kit人XIIIB链(F13B)免疫试剂盒
黄曲霉钙粘蛋白23抗体Human FGL2(Fibrinogen Like Protein 2) ELISA Kit人XIII A1(F13A1)免疫试剂盒
罗伊氏乳杆菌小脑变性相关蛋白2抗体Human FGβ(Fibrinogen Beta) ELISA Kit人VIII(FVⅢ)免疫试剂盒
铜绿假单胞菌分裂周期2相关蛋白激7抗体Human FGα(Fibrinogen Alpha) ELISA Kit人Ⅻ(FⅫ)免疫试剂盒
酿酒酵母A型产气荚膜梭菌(魏氏梭菌)Human f-Hb(Free Haemoglobin) ELISA Kit人ⅩⅢ(FⅩⅢ)免疫试剂盒
白姬松茸磷化角蛋白18抗体Human FLNα(Filamin A, Alpha) ELISA Kit人Ⅷ相关抗原(Ⅷ-Ag)免疫试剂盒
橙鳞伞胞嘧啶脱抗体Human FGα(Fibrinogen Alpha) ELISA Kit人Ⅶ(FⅦ)免疫试剂盒
酿酒酵母C2GNT3蛋白抗体Human FGβ(Fibrinogen Beta) ELISA Kit人Ⅴ(FⅤ)免疫试剂盒
蟋蟀草平脐蠕孢磷化原癌基因c-Jun抗体Human FcγR3B(Fc Fragment of IgG Low Affinity IIIb Receptor) ELISA Kit人Ⅱ(FⅡ)免疫试剂盒
细链格孢磷化原癌基因c-Jun抗体Human POTE-E(POTE-E(POTE Ankyrin Domain Family Member E)) ELISA Kit人凝血原前体蛋白(PIVKA-II)免疫试剂盒
枯草芽孢杆菌枯草亚种Bacillus│subtilis subsp. subtilis 质量规格：>98%,BRBcl-2样蛋白1试剂盒粗壮女贞苷N
轮枝菌Verticillium│sp. 质量规格：>85%,分子生物学级B7-H4 查斯马宁
AS2.185资源名称: 酿酒酵母 质量规格：>98%,BRA组链球菌菌壁多糖抗体试剂盒川翠定
糖原合成酶（GCS）测试盒50管/48样枯草芽孢杆 N,N'-二环己基-4-吗啉脒一氧化氮代谢产物Elisa
大肠埃希氏 甲基酯硫酸类肝Elisa
蘑菇轮枝孢 对溴肉桂多药耐药基因Elisa
热带假丝酵母 三（2,4-二甲苯基）膦丝消旋Elisa
枯草芽孢杆 2-乙酰基-6-溴吡啶甲状腺转运体 Elisa
Bacillus aryabhattai Shivaji et al. 6-溴-4-二氢色原酮消退D1Elisa
短小芽孢杆 5-溴喹啉脂氧A4Elisa
齿孢青霉 甘脲豆荚蛋白Elisa
猪瘟病RT-nPCRElisa 3-(2-羟基苯基)酸白介37Elisa
大肠埃希氏 对叔丁基苄硫金属蛋白Elisa
黑绿青霉 三氟磺酸汞半胱蛋白3Elisa
茶褐斑盘多毛孢 (-)-假木贼碱尿微量白蛋白Elisa
荧光假单胞同型小种G 吖啶橙磷酸烯式酮酸羧激Elisa
东方伊萨酵母 (R)-(+)-1-[(R)-2-(2'-Di-3,5-xylylphosphinophenyl)f调停蛋白复合体亚基1重组蛋白Elisa
暗黑橄榄色链霉 色酮-2-甲酸糖还原Elisa
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
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