详细介绍
商品介绍:
测定意义: 土壤蛋白酶参与土壤中存在的氨基酸、蛋白质以及其他含蛋白质氮的有机化合物的转化,其水解产物是高等植物的氮源之一。S-NPT在中性环境下催化蛋白质水解,与土壤有机质含量、氮素及其他土壤性质有关。 测定原理: 中性条件下,S-NPT可将酪蛋白水解产生酪氨酸;在碱性条件下,酪氨酸还原磷钼酸化合物生成钨蓝;在680nm有特征吸收峰。 实验中所需仪器及设备: 可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、磁力搅拌器、可调式移液枪、微量石英比色皿/96孔板、双蒸水 |
商品属性:
产品名称 | |
检测方法 | 微量法 |
产品规格 | 100管/48样 |
产品货号 | AS6321301 |
试剂的组成和配制:
酸性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;碱性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体10 mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体3 mL×1瓶,4℃保存;试剂三:粉剂×1瓶,-20 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂四:粉剂×1瓶,4 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂五:液体3.6mL×1瓶,4 ℃保存;试剂六:液体30mL×1瓶,4 ℃保存;试剂七:液体50mL×1瓶,4 ℃保存。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(浆)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(浆)体积(ml):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照血清(浆)体积(ml):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml碱性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照组织质量(g):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照组织质量(g):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml碱性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):酸性 提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):碱 性提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 |
ADH测定操作:
1. 分光光度计预热30 min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意:空白管只需测定一次。
Atopobium vaginae 磷化肾上腺能受体β2/β2-AR抗体Human LAYN ELISA Kit猪钙/钙调依赖性蛋白激2β(CAMK2B/CAM2/CAMKB)免疫试剂盒
酿酒酵母载脂蛋白D抗体Human LBR ELISA Kit猪钙/钙调依赖性蛋白激2α(CAMK2A/CAMKA/KIAA0968)免疫试剂盒
黄青霉敏感离子通道1抗体Human LAYN ELISA Kit猪脯羟化(PHD)免疫试剂盒
齿孢青霉双链RNA腺苷脱基抗体(C端)Human LCA5 ELISA Kit猪分泌型免疫球蛋白A(sIgA)免疫试剂盒
枯草芽孢杆菌髓系、淋巴、混合系白血病易位基因10抗体Human LCE1A ELISA Kit猪肺炎支原体抗体(MP-Ab)免疫试剂盒
酿酒酵母腺苷环化1抗体Human LAX1 ELISA Kit猪肺表面活性物质相关蛋白C(SP-C)免疫试剂盒
玫瑰小双孢菌玫瑰亚种腺瘤样息肉抗体Human LCE1A ELISA Kit猪肺表面活性物质相关蛋白B(SP-B)免疫试剂盒
彩色豆马勃溶血磷脂酰基转移抗体Human LCK ELISA Kit猪肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)免疫试剂盒
新疆薄层菌锚蛋白重复及SAM结构域蛋白3抗体Human LCA5 ELISA Kit猪二氧化(DAO)免疫试剂盒
异常海杆状菌磷化间变型淋巴瘤激抗体Human LBR ELISA Kit猪儿茶(CA)免疫试剂盒
异常毕赤酵母酰基脱氢很长链抗体Human LCE1B ELISA Kit猪多肽YY(PYY)免疫试剂盒
海胆橙色小单孢菌信号转导衔接结合蛋白抗体Human LARS ELISA Kit猪多巴(DA)免疫试剂盒
运动节杆菌锚蛋白重复序列-因子信号抑制物盒蛋白家族3抗体Human LARS2 ELISA Kit猪端粒(TE)免疫试剂盒
CCTCC AB 2012479有丝分裂激B抗体Human LARS ELISA Kit猪凋亡相关因子(FAS/CD95)免疫试剂盒
热带假丝酵母磷化Ack1抗体Human LAS1L ELISA Kit猪淀粉样前体蛋白(βAPP)免疫试剂盒
牛边缘无浆体(镇原株)磷化Ack1抗体Human LARS2 ELISA Kit猪低氧诱导因子1α(HIF-1α)免疫试剂盒
曲霉Aspergillus│sp. 质量规格:>98%,BR补体1q试剂盒乙酰化白藜芦
简单芽孢杆菌Bacillus│simplex 质量规格:BR玻连蛋白试剂盒茵芋苷
树舌5-1Ganoderma│applanatum (Pers.) Pat. 质量规格:>98% (HPLC),BC波形蛋白试剂盒亚油酯
土壤中性蛋白酶(SNPT)测试盒100管/48样红曲霉 2-氟-6-苯甲组蛋白抗体Elisa
樟疫霉 2-氧代-4-苯基丁酸抗猫细小病抗体Elisa
阿舒假囊酵母 4-甲氧基-3-甲谷氨酰半胱合成Elisa
链球(不定种) 4'-氨甲基-5-羧基荧光酸性神经鞘磷脂Elisa
枯草芽孢杆 1-乙基咪唑S转移Elisa
异常威克汉姆酵母 4-溴-2-氟乙酰苯载脂蛋白C3Elisa
黄曲霉 2-(氨甲基)-3--5-三氟盐酸盐葡萄糖转运蛋白3Elisa
糙皮侧耳 2--6-甲氧基胰十二指肠同源框-1基因Elisa
克鲁维毕赤酵母 5-溴苯并-3-酮生长分化因子9Elisa
红色野野村氏 2-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸N-甲基-D-天门冬(NMDA)受体A1亚单位NR4Elisa
单胞 1-Boc-3-氨甲基氮杂环丁烷P物质的受体Elisa
猴头菇 4-咪唑乙酸盐酸盐结核杆抗原Elisa
谷棒杆 N-[(1,4-苯并二噁烷-2-基)羰基]哌盐酸盐胃蛋白IIElisa
解糖假苍白杆 二乙酸根[(R)-(+)-2,2-二(二苯基膦基)-1,1-联萘基]钌(II)生长分化因子11Elisa
翅Acetobacter senegalensis 3-(三氟甲基)苯酸频哪酯CD13分子Elisa
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。