详细介绍
试剂的组成和配制:
酸性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;碱性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体10 mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体3 mL×1瓶,4℃保存;试剂三:粉剂×1瓶,-20 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂四:粉剂×1瓶,4 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂五:液体3.6mL×1瓶,4 ℃保存;试剂六:液体30mL×1瓶,4 ℃保存;试剂七:液体50mL×1瓶,4 ℃保存。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
商品介绍:
测定意义: 生物体内巯基主要包括非蛋白质巯基和蛋白质巯基。巯基化合物在体内具有重要的解毒功能,对生物体的自我调节具有非常重要的生理意义。 测定原理: 巯基基团与5,5’- 二硫代-双-硝基苯甲酸(DTNB)反应,生成黄色化合物,在412nm处有最大吸收峰。 自备实验用品: 天平、研钵、可见分光光度计、恒温水浴锅、1mL玻璃比色皿和蒸馏水,甲醇。 |
商品属性:
产品名称 | |
检测方法 | 可见分光光度法 |
产品规格 | 50管/24样 |
产品货号 | AS632180 |
NAD+和NADH的提取:
1、血清(浆)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(浆)体积(ml):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照血清(浆)体积(ml):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml碱性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照组织质量(g):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照组织质量(g):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml碱性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):酸性 提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):碱 性提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 |
ADH测定操作:
1. 分光光度计预热30 min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意:空白管只需测定一次。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
AV-951英文名: Adenosine磷化钙调磷B亚基B1抗体包装5g
BGJ398(NVP-BGJ398)英文名: Adiphenine HCl羊毛甾14α-去基化蛋白抗体包装5g
Carmustine(进分)英文名: Adiphenine HCl补体C5抗体包装1g
CEP-18770英文名: Alarelin Acetate5号染色体开放阅读框24抗体包装250mg
HSP990英文名: Alendronate Sodium5号染色体开放阅读框42抗体包装250mg
MK4827 (Niraparib)英文名: Alendronate Sodium5号染色体开放阅读框49抗体包装250mg
O-6-苄基鸟英文名: Allopurinol5号染色体开放阅读框35抗体包装1g
Ruxolitinib(INCB018424) pho...英文名: Allopurinol中心体蛋白192抗体包装25g
SB431542,SB-431542英文名: Allylestrenol中心体蛋白27抗体包装5g
TAE684英文名: Allylestrenol中心体蛋白290抗体包装100g
Tamoxifen Citrate英文名: Alprostadil,PGE1,中心体蛋白63抗体包装25g
Tariquidar,XR-9576英文名: Altrenogest中心体蛋白70/p10结合蛋白抗体包装5g
阿法替尼英文名: Altrenogest中心体蛋白72抗体包装1ml
阿法替尼双马来盐英文名: Amantadine HCl中心体蛋白95抗体包装25g
阿西替尼英文名: Amantadine HCl中心体蛋白89抗体包装1g
: AS2.606资源名称: 椭圆酿酒酵母 质量规格:>98%,BR,三合物胰高血糖样肽1试剂盒异绿原C;Isochlorogenic
豌豆根瘤菌Rhizobium│leguminosarum 质量规格:HPLC>98%,标准品,三合物胰高血糖试剂盒异绿原B;Isochlorogenic
曼小毛霉原变种Micromucor│ramarnianus 质量规格:效价≥750IU/MG,BP,BR胰多肽试剂盒异绿原A;Isochlorogenic
非蛋白质巯基测试盒50管/24样杨奇青霉 1-苯基正癸烷血管生成样蛋白8Elisa
沙诺氏芽孢杆 3-溴甲酯谷脱羧65抗体Elisa
幼角镰孢 4-邻苯二甲酰亚氨基环己酮谷脱羧65IgG抗体Elisa
黑色附球霉 3,5-二溴-4-硝基吡唑新型隐球抗原Elisa
大肠埃希 薄荷酮, mixture of isomers血管内皮生长因子DElisa
雅致枝霉 2-溴-3-氟三氟甲苯沙眼衣原体IgA抗体Elisa
谷棒杆 (S)-3-氨基四对甲苯磺酸盐枸橼酸Elisa
季也蒙迈耶氏酵母 2-氨基-2,4-二甲酯磷酸二酯9AElisa
大孔 (R)-(+)-alpha-氨基-gamma-丁内酯盐酸盐耐胆盐Elisa
嗜麦芽寡养单胞 普罗帕脒整合αMβ2Elisa
黄色糖多孢 N-苄基-双邻乙基氨基盐酸盐整合αVβ5Elisa
居真细属 微管相关蛋白轻链3IIElisa
少根根霉 3,5-二氟-4-甲氧基苯甲甲型肝炎抗原Elisa
纤维单胞 帕米韦三水合物肿瘤蛋白p53Elisa
金黄杆 阿替唑盐酸盐氧化低密度脂蛋白IgG抗体Elisa