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详细介绍
商品介绍：
测定意义 ADH是生物体内短链醇代谢的关键酶，在很多生理过程中起着重要作用。哺乳动物ADH主要在肝脏生成，肝脏损伤导致ADH释放到血清中。血清ADH活性高低反映了肝功能是否异常。 测定原理 在乙醛存在下，ADH催化NADH氧化生成NAD+；在340nm处测定NADH的减少量，可计算出ADH活性。 实验中所需仪器及用品 研钵、冰、低温离心机、紫外分光光度计、1ml石英比色皿、可调式移液器和双蒸水。 |
商品属性：
产品名称 | |
检测方法 | 紫外分光光度法 |
产品规格 | 50管/48样 |
产品货号 | AS632111 |
试剂的组成和配制：
酸性提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；碱性提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体10 mL×1瓶，4℃保存；试剂二：液体3 mL×1瓶，4℃保存；试剂三：粉剂×1瓶，-20 ℃保存，用时加入3mL蒸馏水，混匀，用不完的试剂4℃保存一周；试剂四：粉剂×1瓶，4 ℃保存，用时加入3mL蒸馏水，混匀，用不完的试剂4℃保存一周；试剂五：液体3.6mL×1瓶，4 ℃保存；试剂六：液体30mL×1瓶，4 ℃保存；试剂七：液体50mL×1瓶，4 ℃保存。
自备仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
NAD+和NADH的提取：
1、血清（浆）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取：按照血清（浆）体积（ml）：酸性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建 议取约0.1ml血清（浆），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）； 冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl碱性提取液使之中 和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提取：按照血清（浆）体积（ml）：碱性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建 议取约0.1ml血清（浆），加入1ml碱性提取液），95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）； 冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：按照组织质量（g）：酸性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建议取约0.1g 组织，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）；冰浴 中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提取：按照组织质量（g）：碱性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建议取约0.1g 组织，加入1ml碱性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）；冰浴 中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：先收集细胞或细菌到离心管内，弃上清，按照细菌或细胞数量（104个）：酸性 提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液）， 超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次），95℃水浴5min （盖紧，以防止水分散失）；冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加 入500μl碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提取：先收集细胞或细菌到离心管内，弃上清，按照细菌或细胞数量（104个）：碱 性提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液）， 超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次），95℃水浴5min （盖紧，以防止水分散失）；冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 |
ADH测定操作：
1. 分光光度计预热30 min，调节波长到340 nm，蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四，迅速混匀后于340nm测定吸光值变化，分别记录15s和75s时吸光值，分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四，迅速混匀后于340nm测定吸光值变化，分别记录15s和75s时吸光值，分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意：空白管只需测定一次。
三碘状腺原(T3)英文名：T3 ELISA Kit二磷腺苷核糖基转移4抗体包装100g
乳铁传递蛋白/乳铁蛋白(LF/LTF)英文名：LF/LTF ELISA KitAKIRIN2蛋白抗体包装25g
乳脱氢(LDH)英文名：LDH ELISA KitADP核糖基化样因子8B抗体包装5g
溶菌(LZM)英文名：LZM ELISA Kit三磷腺苷家族蛋白2抗体包装1g
绒毛膜促性腺激β(β-CG)英文名：β-CG ELISA KitAKIRIN1蛋白抗体包装5g
绒毛膜促性腺激(CG)英文名：CG ELISA Kit锚定蛋白样蛋白1抗体包装1g
妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)英文名：PAPP-A ELISA Kit腺苷激2抗体包装5g
热休克因子1(HSF1)英文名：HSF1 ELISA Kit顶体前体蛋白抗体包装1g
热休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)英文名：HSP gp96 ELISA Kit黑色瘤缺失样蛋白1抗体包装5g
热休克蛋白90(HSP-90)英文名：HSP-90 ELISA Kit未知糖基化转移AER61抗体包装100g
热休克蛋白70(HSP-70)英文名：HSP-70 ELISA Kit铁蛋白Fe65抗体包装25g
热休克蛋白60(Hsp-60)英文名：Hsp-60 ELISA Kit抑癌基因ras同源家族1抗体包装5g
热休克蛋白40(Hsp-40)英文名：Hsp-40 ELISA Kit转录激活蛋白2α/TFAP2α/AP-2α抗体包装100g
热休克蛋白27(HSP-27)英文名：HSP-27 ELISA Kit心钠抗体包装25g
热休克蛋白20(Hsp-20)英文名：Hsp-20 ELISA Kit酰tRNA合成2抗体包装1g
锚蛋白重复结构域蛋白20A3抗体纤维蛋白原(FG)BIX02188 是一种有效的选择性 MEK5 抑制剂，IC50 为 4.3 nM。 BIX02188 也选择性抑制 ERK5 活性, IC50 为 810 n
乙醇脱氢酶（ADH）测试盒50管/48样滑假丝酵母 3-氨基-5-苯基吡唑白介1Elisa
盘长孢状盘孢 苯基膦酸白介11Elisa
中国台湾假黄单胞 对甲酰基甲酯白介12Elisa
小孢链霉 2-苯基-1,3-白介12Elisa
砖红镰刀 三羟甲基烷三烯酸酯白介12Elisa
大肠埃希 5-降烯-2-羧酸叔丁酯白介12;23 p40Elisa
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芽孢杆属 4-异氧基苯酸白介17Elisa
类银白紫丝膜 3-三氟甲氧基苯白介17AElisa
酿酒酵母 间三氟酮白介17BElisa
球孢白僵 根皮苷白介17CElisa
Pseudomonas plecoglossicida 尼泊金异丁酯白介17DElisa
海枣曲霉 6,11-二氢二苯并[b,e]硫杂卓-11-酮白介17FElisa
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
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