SSPE缓冲粉剂

SSPE缓冲粉剂公司正在销售的产品：Anti-RGS5 Antibody小鼠性休克综合征素1
Anti-RGS12 Antibody小鼠环孢素A
Anti-RGS7 Antibody人血管紧张素Ⅱ受体1抗体
Anti-RGS12 Antibody大鼠生长释放多肽
Anti-RGS5 Antibody小鼠补体1抑制物抗体
Anti-RHAG Antibody人血管紧张素Ⅰ受体抗体
Anti-RHD

产品分类：核酸杂交

储存条件：室温,24个月

用途：杂交缓冲液

注意事项：其终浓度为：氯化钠3M,磷酸二氢钠0.2M、EDTA0.02M。

公司产品仅用于科研具有质量可靠、效果稳定、灵敏度高、操作简单、易保存等特点，咨询并订购！

 

配制与标定的实验原理：

1、用EDTA二钠盐配制EDTA标准溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一种白色晶体粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室温溶解度为0.02g/100g H2O。

2、标定EDTA标准溶液的工作基准试剂，基准试剂的预处理：称量前一般应先用稀盐酸洗去氧化层，然后用水洗净，烘干。

配制步骤：

1、取适量锌片放在100mL烧杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自来水、纯水洗净，烘干、冷却。

2、用直接称量法在干燥小烧杯中准确称取0.15～0.2g Zn，盖好小表面皿。

3、用滴管从烧杯口加入5mL 1:1 盐酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地将溶液转移至250mL容量瓶中，用纯水稀释至标线，摇匀。

 

 

实验方法与判定：

1.对照品溶液的稳定性

2.对照品溶液的配制：精密量取脑对照品适量，加无水乙醇制成每1ml含脑1mg的溶液，作为对照品溶液。

3.色谱条件：以交联键合聚乙二醇为固定相的毛细管柱；柱温120℃；进样口温度250℃；检测器温度250℃；分流进样，分流比10:1。理论塔板数按脑计算应不低于10000。

4.实验方法：配制的对照品溶液，一份置冷处保存，一份置室温中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份对照品溶液，三种储备液同时稀释制成每1ml中约含50ug的溶液。照气相色谱法，并依据新对照品的峰面积计算原对照品溶液的含量。记录下来，保证原对照品溶液含量在考察期相对平均偏差不超过2.0%，验证对照品溶液在使用期内稳定可靠。

使用方法：

1.  常用筛选浓度

注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线（kill curve），即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。

一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL；细菌/植物细胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 杀灭曲线的建立

注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线（剂量反应曲线）来实现，至少选择5个浓度。

1）  第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜；注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。

2）  根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。

3）  第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。

4）  接下来每3-4天更换新的含药物培养基。

5）  按照固定的周期（如每2天）进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数（通常是7-10天）内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。

3.   稳定转染细胞的筛选

1）  转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞（直接传代或者稀释后传代）。

注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%

2）  每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。

3）  筛选7天后观察并评估细胞克隆（集落）的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。

4）   挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。

5）   之后更换正常培养基培养即可。

短密青霉肌球蛋白轻链激抗体Human PICP(C-terminal propeptide of Collagen alpha-1(I) chain) ELISA Kit磷化乙酰(PaCoA)

大肠埃希氏杆菌MYCBPAP抗体Human IMPA2(Inositol monophosphatase 2) ELISA Kit磷化腺苷活化蛋白激(pAMPK)

香菇组织相容性复合体蛋白1抗体Human CARTPT(Cocaine-and amphetamine-regulated transcript protein) ELISA Kit磷化腺苷活化蛋白激(AMPK)

扩散炭层菌线粒体核糖体蛋白S22抗体Human COL1A1(Collagen Type I Alpha 1) ELISA Kit磷化外信号调节激(pERK)

毛栓孔菌棕榈酰化膜蛋白7抗体Human PTTG2(Securin-2) ELISA Kit磷化糖原合激3β(pGSK3B)

泡囊短波单胞菌小鼠抗单克抗体Human COL2A1(Collagen alpha-1(II) chain) ELISA Kit磷化糖原合成激3(pGSK-3)

乳乳球菌乳亚种肌球蛋白轻链1/3抗体Human PTTG1IP(Pituitary tumor-transforming gene 1 protein-interacting protein) ELISA Kit磷化肌球蛋白轻链(PMLC)

葡萄座腔菌属磷化肌球蛋白轻链抗体Human NUSAP1(Nucleolar and spindle-associated protein 1) ELISA Kit磷化核因子κB抑制蛋白α(pIKBα)

大肠埃希菌肌肉特异性泛蛋白连接1抗体Human OxLDL(Oxidized low-density lipoprotein) ELISA Kit磷化蛋白激C(P-PKC)

产气列契瓦尔氏菌泛蛋白连接抗体Human PIIINP(N-terminal propeptide of Collagen alpha-1(III) chain) ELISA Kit磷化蛋白激B(P-PKB)

大肠埃希菌单羧转运蛋白2抗体Human MYOCD(Myocardin) ELISA Kit磷化cAMP反应元件结合蛋白1(pCREB1)

芬青霉可溶性苹果脱氢抗体Human NRN1(Neuritin) ELISA Kit磷甘油变位2(PGAM2)

云芝栓孔菌（变色栓菌）蛋白激C亚性D型抗体Human MITF(Microphthalmia-associated transcription factor) ELISA Kit淋巴趋化因子(Lptn/LTN/XCL1)

枝孢属磷化µ-型受体抗体Human LMAN2(Vesicular integral-membrane protein VIP36) ELISA Kit淋巴抗原6复合物基因座A(Ly6a)

链霉菌磷化丝裂原活化蛋白激激1/2抗体Human MDH2(Malate dehydrogenase, mitochondrial) ELISA Kit淋巴功能相关抗原3(LFA-3/CD58)

酿酒酵母基质金属蛋白9抗体Human MMP17(Matrix metalloproteinase-17) ELISA Kit淋巴功能相关抗原2(LFA-2/CD2)

澳型核果褐腐病菌Monilinia│fructicola (G. Winter) Honey 质量规格：>98%,BR盐甜菜碱

淡紫拟青霉（新引种）Paecilomyces lilacinus 质量规格：粘度100000mPa.s甜菜碱

: SK1023/61资源名称: 坎德沙门氏菌 质量规格：4000mPa.s,BR鼠李糖
SSPE缓冲粉剂Cyclin-D3(Mouse Cyclin-D3) ELISA Kit  小鼠细胞周期suD3规格： 48T

Cyclin-D2(Mouse Cyclin-D2) ELISA Kit  小鼠细胞周期suD2规格： 48T

E(Mouse estrogen) ELISA Kit  小鼠雌激su规格： 48T

Cyclin-D1(Mouse Cyclin-D1) ELISA Kit  小鼠细胞周期suD1规格： 48T

MBP(Mouse myelin basic protein) ELISA Kit  小鼠髓磷脂性蛋白规格： 48T