化工仪器网
详细介绍
商品属性：
产品名称 | |
检测方法 | 可见分光光度法 |
产品规格 | 50管/48样 |
产品货号 | AS6321125 |
商品介绍：
测定意义哺乳动物CarE，也称脂族酯酶（aliesterase），广泛分布于组织和器官，属于丝氨酸水解酶家族。CarE催化含酯键、酰胺键和硫酯键的内源性与外源性物质水解，但不能催化水解乙酰胆碱及其类似物。CarE参与脂质运输和代谢，并且与多种药物、环境毒物以及致癌物的解毒和代谢有关，有机磷农药可结合并且抑制CarE活性。测定原理CarE能催化乙酸-1-萘酯生成萘酯，通过测定萘酯的生成速率即可计算出CarE的活性。实验中所需仪器及设备可见分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调式移液枪、1ml玻璃比色皿、双蒸水和无水乙醇。 |
试剂的组成和配制：
酸性提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；碱性提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体10 mL×1瓶，4℃保存；试剂二：液体3 mL×1瓶，4℃保存；试剂三：粉剂×1瓶，-20 ℃保存，用时加入3mL蒸馏水，混匀，用不完的试剂4℃保存一周；试剂四：粉剂×1瓶，4 ℃保存，用时加入3mL蒸馏水，混匀，用不完的试剂4℃保存一周；试剂五：液体3.6mL×1瓶，4 ℃保存；试剂六：液体30mL×1瓶，4 ℃保存；试剂七：液体50mL×1瓶，4 ℃保存。
自备仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
NAD+和NADH的提取：
1、血清（浆）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取：按照血清（浆）体积（ml）：酸性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建 议取约0.1ml血清（浆），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）； 冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl碱性提取液使之中 和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提取：按照血清（浆）体积（ml）：碱性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建 议取约0.1ml血清（浆），加入1ml碱性提取液），95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）； 冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：按照组织质量（g）：酸性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建议取约0.1g 组织，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）；冰浴 中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提取：按照组织质量（g）：碱性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建议取约0.1g 组织，加入1ml碱性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）；冰浴 中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：先收集细胞或细菌到离心管内，弃上清，按照细菌或细胞数量（104个）：酸性 提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液）， 超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次），95℃水浴5min （盖紧，以防止水分散失）；冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加 入500μl碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提取：先收集细胞或细菌到离心管内，弃上清，按照细菌或细胞数量（104个）：碱 性提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液）， 超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次），95℃水浴5min （盖紧，以防止水分散失）；冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 |
ADH测定操作：
1. 分光光度计预热30 min，调节波长到340 nm，蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四，迅速混匀后于340nm测定吸光值变化，分别记录15s和75s时吸光值，分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四，迅速混匀后于340nm测定吸光值变化，分别记录15s和75s时吸光值，分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意：空白管只需测定一次。
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
头孢匹林钠(标准品)英文名： GeniposideDYX1C1蛋白抗体包装5g
头孢羟苄 （标准品）英文名： GeniposideE3泛蛋白连接dzip3抗体包装1g
头孢曲松钠（标准品）英文名： 17-Methyltestosterone三磷腺苷依赖解旋DDX23抗体包装250mg
头孢噻吩（标准品）英文名： Tetrahydro-L-Biopterin free base多能发育相关基因5抗体包装5g
头孢噻呋钠(标准品)英文名： Tirofiban HCl三磷腺苷依赖解旋DDX3抗体包装100mg
头孢噻肟钠(标准品)英文名： Tirofiban HCl磷化三磷腺苷依赖解旋DDX3抗体包装1g
头孢妥仑匹酯(标准品)英文名： Pullulan迪格弗-梅尔基奥尔-克劳森综合征相关蛋白抗体包装500mg
头孢西丁钠（标准品）英文名： Vitamin E,dl-α-tocopherol双氧化激活因子2抗体包装5g
头孢西丁（头孢西丁）（标准品）英文名： StavudineRNA结合泛连接DZIP3抗体包装100mg
头孢唑啉(标准品)英文名： Stavudine二氢二脱氢1/2抗体包装500mg
头孢唑啉钠（标准品）英文名： Moclobemide形态发生紊乱关联激活因子2抗体包装1g
头孢唑肟(标准品)英文名： Moclobemide质分裂付出蛋白2抗体包装5g
头孢唑肟钠(标准品)英文名： Astragaloside IV质分裂付出蛋白4抗体包装1g
土霉A(标准品)英文名： Astragaloside IV质分裂付出蛋白5抗体包装250mg
褪黑,松果体（标准品）英文名： Nateglinide淋巴抗原75抗体包装50ml
: D8(1957)资源名称: 伤寒沙门氏菌 质量规格：>99%,BR维生D2试剂盒四氢小檗碱;Tetrahydroberb
大肠埃希菌Escherichia│coli 质量规格：HPLC>98%,标准品维生C试剂盒苏木;Hematoxylin
胶孢刺盘孢Colletotrichum│gloeosporioides 质量规格：>98.5%,USP,可用于培养维生B6试剂盒双醋瑞因;1,8-Diacetoxy-3
羧酸酯酶（CarE）测试盒50管/48样猪丹丝 3-苯酮状瘤病16型Elisa
卵孢木霉 异丁酸肉桂酯状瘤病18型Elisa
蜡状芽孢杆 丁酸苯乙酯铁过氧化物岐化Elisa
聚生壳 2-氨基嘧啶-5-酸前血小板碱性蛋白Elisa
伊平屋桥大洋芽孢杆 3-叔丁基己二酸泛蛋白连接E3成分N-识别蛋白1Elisa
顶青霉 邻甲基肉桂肝生长因子受体Elisa
耐久肠球 4'-溴苯酮拓扑异构ⅡElisa
豇豆慢生根瘤 丁酸苄酯抗新喋呤抗体Elisa
硫磺 2-甲基-3-吡咯甲酸乙酯硫酸角质Elisa
根瘤 异丁酸苯甲酯亲核α2Elisa
Leminorella richardii 2-溴-4-DNAⅠ样蛋白3Elisa
硝孢链霉 4-甲砜基苯乙酮Sorbin和含SH3结构域的蛋白2Elisa
色串孢属 高酸铜(II)六水合物增殖诱导配体Elisa
噬尼古丁节杆 水杨酰肼肽抑制剂16Elisa
直立枝孢 左乙西坦抑癌基因Beclin1Elisa
化工仪器网