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详细介绍
商品属性：
产品名称 | |
检测方法 | 微量法 |
产品规格 | 100管/48样 |
产品货号 | AS6321246 |
商品介绍：
测定意义： 几丁质主要存在于虾、蟹、昆虫等甲壳类动物的外壳与软体动物的器官(例如乌贼的软骨)，以及真菌类的细胞壁中。而几丁质酶(EC 3.2.1.14)可催化几丁质水解，具有抵御真菌侵染的作用，成为抗真菌病害的研究热点。 测定原理： 几丁质酶水解几丁质产生N-乙酰氨基葡萄糖，进一步与DNS试剂反应产生棕红色化合物，在540nm处有特征吸收峰，吸光值增加速率反映了几丁质酶的活性。自备实验用品及仪器 天平、水浴锅、离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、甲苯（土壤样品专用）和蒸馏水。 |
试剂的组成和配制：
酸性提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；碱性提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体10 mL×1瓶，4℃保存；试剂二：液体3 mL×1瓶，4℃保存；试剂三：粉剂×1瓶，-20 ℃保存，用时加入3mL蒸馏水，混匀，用不完的试剂4℃保存一周；试剂四：粉剂×1瓶，4 ℃保存，用时加入3mL蒸馏水，混匀，用不完的试剂4℃保存一周；试剂五：液体3.6mL×1瓶，4 ℃保存；试剂六：液体30mL×1瓶，4 ℃保存；试剂七：液体50mL×1瓶，4 ℃保存。
自备仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
NAD+和NADH的提取：
1、血清（浆）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取：按照血清（浆）体积（ml）：酸性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建 议取约0.1ml血清（浆），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）； 冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl碱性提取液使之中 和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提取：按照血清（浆）体积（ml）：碱性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建 议取约0.1ml血清（浆），加入1ml碱性提取液），95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）； 冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：按照组织质量（g）：酸性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建议取约0.1g 组织，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）；冰浴 中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提取：按照组织质量（g）：碱性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建议取约0.1g 组织，加入1ml碱性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）；冰浴 中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：先收集细胞或细菌到离心管内，弃上清，按照细菌或细胞数量（104个）：酸性 提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液）， 超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次），95℃水浴5min （盖紧，以防止水分散失）；冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加 入500μl碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提取：先收集细胞或细菌到离心管内，弃上清，按照细菌或细胞数量（104个）：碱 性提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液）， 超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次），95℃水浴5min （盖紧，以防止水分散失）；冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 |
ADH测定操作：
1. 分光光度计预热30 min，调节波长到340 nm，蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四，迅速混匀后于340nm测定吸光值变化，分别记录15s和75s时吸光值，分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四，迅速混匀后于340nm测定吸光值变化，分别记录15s和75s时吸光值，分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意：空白管只需测定一次。
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
罗汉果皂苷Ⅲe英文名： 5’-DMT-2’-TBDMS-rU中胚层诱导早期反应蛋白2抗体包装25g
罗汉松树脂-4'-O-β-龙胆二糖苷(标准品)英文名： 5’-DMT-2’-TBDMS-iBu-rGMDM2样P53蛋白结合抗体包装5g
罗通定/左旋延胡索乙/左旋四氢巴马(标准品）英文名： 5’-DMT-2’-TBDMS-Ac-rCRNA相关结合蛋白MCG10抗体包装25ml
萝卜硫；莱菔硫烷(标准品)英文名： 5’-DMT-2’-TBDMS-Bz-rA线粒体核糖体蛋白S4抗体包装5ml
裸花紫珠（标准品）英文名： DMT-dI紧密连接蛋白MUPP1抗体包装25g
络塞定（标准品）英文名： DMT-Ac-dC肌管相关蛋白14抗体包装5g
络塞琳（标准品）英文名： DMT-dT小脑症基因1/认知相关蛋白抗体包装50mg
络塞维（标准品）英文名： DMT-dU锌指蛋白60抗体包装1g
络石苷（标准品）英文名： D-(+)-Xylose 肌球蛋白6抗体包装5g
络石藤（标准品）英文名： D-(+)-Xylose 肌肉抗体包装25g
络缌（标准品）英文名： 2',3'-Dideoxyuridine代谢型谷受体-3抗体包装5g
骆驼蓬碱;骆驼蓬灵;哈梅灵(标准品)英文名： Hygromycin B促代谢型谷受体2+3抗体包装1g
骆驼篷子（标准品）英文名： iBu-DMT-dG促代谢型谷受体1+5抗体包装25g
落花生枝叶（标准品）英文名： Bz-DMT-dCMHC I类链相关蛋白A/组织相容性复合物MHCIa抗体包装5g
落新妇苷(标准品)英文名： Bz-DMT-dA肌肉特异性环指蛋白2抗体包装25g
苹果链格孢Alternaria│mali 质量规格：>98%,进分抗类风湿关节炎核抗原抗体试剂盒3,5-O-二咖啡酰基奎宁;3,5-D
沙雷氏菌属Serratia│sp. 质量规格：>98%,分子生物学级抗狼疮抗凝抗体试剂盒儿茶;Cianidanol
巴斯德毕赤酵母Pichia│pastoris 质量规格：>98%,BR抗兰尼碱受体钙释放通道抗体二氢欧山芹当归酯;Columbian
几丁质酶测试盒100管/48样小平菇（秀珍菇） 5--2-核糖体S6K蛋白激Elisa
枯草芽孢杆 (R)-(-)-1-甲氧基-2-蔗糖酵解型蛋白激1Elisa
白地霉 2--5-羟基嘧啶去乙酰化Sirtuin6Elisa
4-甲基-D-苯VEElisa
偶发贪铜 8--4-二氢色原酮脂肪酸合成Elisa
类干酪乳杆 对肉桂硬脂酰ACP脱氢Elisa
Mesorhizobium 5-氨基-3-溴苯甲Δ12脂肪酸脱氢Elisa
枯草芽孢杆 5-喹哪啶膜铁转运蛋白Elisa
加德那氏链霉 苯并-2-羧酸分支酸变位Elisa
链霉 (S)-2-氨基-2-环基乙酸吡咯啉-5-羧酸还原Elisa
绿梭链孢 2,5-二硫脲3-磷酸甘油脱氢Elisa
束红球 3-溴-[1,2,4]噻唑并[4,3-A]吡啶5-磷酸核糖激Elisa
墨汁鬼伞 4-苯基环己酮硫代葡萄糖苷Elisa
枣生梅奇酵母 2,4-二羟基-6-甲线粒体膜H+-ATPaseElisa
水生黄杆 3-氨基-6-溴吡-2-甲酸单脱氢抗坏血酸还原Elisa
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