详细介绍
商品介绍:
商品介绍 测定意义: 超氧阴离子自由基作为生物体代谢过程中产生的一种自由基,可攻击生物大分子,如脂质、蛋白质、核酸和聚不饱和脂肪酸等,使其交链或者断裂,引起细胞结构和功能的破坏,与机体衰老和病变有很密切的关系,清除超氧阴离子自由基的研究已经得到了广泛的关注。 测定原理: AP-TEMED系统产生超氧阴离子,与盐酸羟胺反应生成NO2-,NO2-与对氨基苯磺酸和α-萘胺的作用生成红色的偶氮化合物,在530nm处有特征吸收峰,样品对超氧阴离子的清除能力与530nm的吸光值呈负相关。 自备实验用品及仪器: 天平、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、恒温水浴锅。 |
公司产品仅供科研使用:
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
微量法 | 100管/96样 | AS632179 |
常见样本处理方法:
1、血清(浆)样品:直接检测。
2、细菌、细胞或组织样品的制备: 细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液) ,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次)8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。组织:按照组织质量(g) :提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
产品优点如下:
1、快速简便:双试剂,直接操作,快速、简便。
2、取样量微:需要的样本量是羟胺法的1/10。
3、灵敏度高:检测线0.5U/ml,是羟胺法5倍,邻苯三酚法的200倍
4、稳定性好:批内CV=5.50%,批间CV=3.32%,试剂盒2~8℃存放3个月有效。
5、再现性好:变异系数CV=1.2%。6、回收试验: X =102.3%。7、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。且特异性强,不受类SOD物质的干扰8、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等,效果均佳。
测定步骤:
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样,不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.温浴
1.加标本后和加结合物后,应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后,反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃,ELISA板可避光放在实验台上,以便 不时观察,待对照管显色适当时,即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅,在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果,准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
实验方法学:
一、肝素的配制:
市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。
Ⅱ型前胶原基端原肽(PⅡNT)英文名:PⅡNT ELISA Kit磷化热休克蛋白β5/α晶状体球蛋白B/αB-crystallin抗体包装50mg
Ⅱ型胶原交联羧基端肽(CTXⅡ)英文名:CTXⅡ ELISA Kit1号染色体开放阅读框167抗体包装1g
Ⅱ型胶原(COL2)英文名:COL2 ELISA Kit1号染色体开放阅读框168抗体包装250mg
ⅡD组磷脂A2(PLA2G2D)英文名:PLA2G2D ELISA Kit1号染色体开放阅读框170抗体包装250mg
ⅡA组磷脂A2(PLA2G2A)英文名:PLA2G2A ELISA Kit1号染色体开放阅读框172抗体包装1g
Ⅰ型前胶原羧基端原肽(PⅠCP)英文名:PⅠCP ELISA Kit1号染色体开放阅读框173抗体包装5g
Ⅰ型前胶原基端原肽(PⅠNP)英文名:PⅠNP ELISA Kit1号染色体开放阅读框174抗体包装25g
Ⅰ型前胶原(PCⅠ)英文名:PCⅠ ELISA Kit1号染色体开放阅读框177抗体包装5g
Ⅰ型胶原交联羧基端肽(CTXⅠ)英文名:CTXⅠ ELISA Kit1号染色体开放阅读框180抗体包装1g
Ⅰ型胶原交联基端肽(NTXⅠ)英文名:NTXⅠ ELISA Kit1号染色体开放阅读框182抗体包装1g
Ⅰ型胶原α2(COL1α2)英文名:COL1α2 ELISA Kit1号染色体开放阅读框183抗体包装25g
Ⅰ型胶原α1(COL1α1)英文名:COL1α1 ELISA Kit1号染色体开放阅读框187抗体包装5g
Ⅰ型胶原(COL1)英文名:COL1 ELISA Kit1号染色体开放阅读框189抗体包装5g
90kDa热休克蛋白β1(HSP90β1)英文名:HSP90β1 ELISA Kit1号染色体开放阅读框190抗体包装100ml
90kDa热休克蛋白αA1(HSP90αA1)英文名:HSP90αA1 ELISA Kit1号染色体开放阅读框192抗体包装25ml
轮枝菌Verticillium│sp. 质量规格:HPLC>98%,标准品乙肝表面抗原大蛋白试剂盒原花青B2;Procyanidin B
球孢白僵菌Beauveria│bassiana (Bals.-Criv.) Vuill. 质量规格:>98%,BR乙脱氢试剂盒原花青B1;Procyanidin B
链霉菌属菌种Streptomyces│sp. 质量规格:HPLC>98%,标准品乙呋试剂盒乙酰紫堇灵;Acetylcorynoli
超氧阴离子清除能力测试盒100管/96样 叔丁基二硫抗mannobioside糖抗体Elisa
亮白曲霉 2,2-二氟-3-羟基戊酸乙酯锌-α2脂蛋白Elisa
乌克兰毛霉 2-溴-3,4-二氟苯岩藻糖基化触珠蛋白Elisa
短柄帚霉 6-甲基-3H-噻吩[2,3-d]嘧啶-4-酮胆固-25-羟化Elisa
鼠李糖乳杆 磺S受体自身抗体Elisa
产气肠杆* 3,5-二溴-2-吡受体Elisa
新疆盐单胞 5-溴-4-甲基-1H-吲唑S转移Mu1Elisa
禾谷镰孢 2--3-氟-5-硝基吡啶乙酰CoA羧化Elisa
总状共头霉 噻吩并[3,2-b]吡啶-7-蛋白激M2Elisa
大孢联轭霉 5-溴吲唑-3-甲酸系统性红斑狼疮IgGElisa
黑曲霉 2-乙硫基-5-硝基吡啶系统性红斑狼疮IgAElisa
围小丛壳 L-肌肽锌系统性红斑狼疮IgMElisa
蜡样芽胞杆 4-苯氧基苄糖化血红蛋白Elisa
博斯氏属 2-叔丁苯纤维蛋白单体Elisa
叶球形微杆 4,6-二-2-甲氧基嘧啶酮酸激M2Elisa