详细介绍
商品介绍:
测定意义 DBE能够专一性地裂解支链淀粉的α-1,6糖苷键,产生线性的葡萄糖链,在调整支链淀粉分子的链长方面有重要的作用。 测定原理 采用3,5-二硝基水杨酸法测定DBE催化支链淀粉产生的还原糖,通过测定还原糖含量的变化来计算DBE活性。 需自备的的仪器和用品 可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水 |
商品属性:
产品名称 | |
检测方法 | 可见分光光度法 |
产品规格 | 50管/24样 |
产品货号 | AS6321212 |
试剂的组成和配制:
酸性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;碱性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体10 mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体3 mL×1瓶,4℃保存;试剂三:粉剂×1瓶,-20 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂四:粉剂×1瓶,4 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂五:液体3.6mL×1瓶,4 ℃保存;试剂六:液体30mL×1瓶,4 ℃保存;试剂七:液体50mL×1瓶,4 ℃保存。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(浆)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(浆)体积(ml):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照血清(浆)体积(ml):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml碱性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照组织质量(g):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照组织质量(g):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml碱性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):酸性 提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):碱 性提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 |
ADH测定操作:
1. 分光光度计预热30 min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意:空白管只需测定一次。
矮地茶(标准品)英文名: Fluorescein免疫球蛋超家族成员8抗体包装5g
艾黄;六棱菊亭(标准品)英文名: Calcein白介33抗体包装25g
艾叶(标准品)英文名: Wright's stain核蛋白9抗体(Ran结合蛋白M)包装25ml
安格洛苷 C(标准品)英文名: Giemsa stain真核翻译起始因子3A抗体包装5ml
安石榴甙(标准品)英文名: 6-Carboxyfluorescein N-hydroxysuccinimide ester磷化真核翻译起始因子4G抗体包装1g
安五脂(标准品)英文名: 6-Carboxyfluorescein整合α4β7抗体包装5g
安息香(标准品)英文名: 5-Carboxyfluorescein磷化干扰调节因子3抗体包装10MG
澳茄新碱(标准品)英文名: Nigrosine water solubleISLR2蛋白抗体包装1g
澳洲茄;澳州茄(标准品)英文名: Nigrosin alcohol solubleIQCG蛋白抗体包装250mg
澳洲茄边碱(标准品)英文名: 7-HydroxycoumarinIQCK蛋白抗体包装1g
澳洲茄碱(标准品)英文名: HeminDNA结合抑制因子1抗体包装250mg
八角枫(标准品)英文名: 5-Carboxyfluorescein diacetate单磷脱氢1抗体包装25g
八角茴香(标准品)英文名: 5(6)-Carboxyfluorescein diacetate干扰诱导蛋白P78抗体包装5g
八角莲(标准品)英文名: 5-Aminofluorescein间粘附分子5抗体包装100g
八角麻(标准品)英文名: 6-Aminofluorescein肌单磷IMPA3抗体包装25g
#固氮菌Azotobacter│sp. 质量规格:Mw:63000~77000,USP32类似RIKEN cDNA 4931408D14 基因 绞股蓝皂苷XLIX;Gypenoside
微杆菌属Microbacterium│sp. 质量规格:Mw35 000 to 45 000类似cDNA顺序BC027382 绞股蓝皂苷;Gynostemma Pen
猴头菇Hericium│erinaceus 质量规格:MW:16000~24000类免疫缺陷病试剂盒5-O-基维斯阿米苷;5-O-Met
淀粉脱分支酶(DBE)测试盒50管/24样费尔氏酵母 3,5-二溴苯甲酪羟化Elisa
酿酒酵母 甘氨酰-L-谷色C氧化Elisa
大毛霉 Ketanserin鞘氨-1-磷酸Elisa
稻田弯曲嗜酸 二甲基二烯基化鞘氨Elisa
朱黄篮状 烯酸二环戊基酯碱性焦磷酸Elisa
胶孢 二乙氧基烷苯解氨Elisa
小孢根霉须状变种 西他唑磺基转移 1A1Elisa
假单胞属 4-(二氟甲氧基)苯甲磺基转移 2A1Elisa
新城疫病 4-Boc-氨基β-酮脂酰-CoA合Elisa
核盘 2,4,6-三苯酸β-酮脂酰-CoA合Elisa
芽胞杆 1-庚炔-3-纤维Elisa
溶淀粉类芽孢杆 叔丁氧羰基-L-谷 5-环己酯3-氧酰基-酰基载体蛋白还原Elisa
岸边亚硫酸盐杆 1,2-双(基硅氧基)乙烷油体相关蛋白Elisa
樟疫霉 对氨基苯甲酰-β-末端脱氧核糖核酸转移Elisa
深层大洋芽孢杆 泛钠末端脱氧核糖核酸转移Elisa
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。