详细介绍
公司产品仅用于科研具有质量可靠、效果稳定、灵敏度高、操作简单、易保存等特点,咨询并订购!
产品名称 | 规格 | 货号 |
多聚赖氨酸溶液 | 50ml | FS-R7205 |
产品分类:免疫组化
储存条件:—20℃,避光,12个月
用途:一种粘附剂,常用于载玻片的包被
配制与标定的实验原理:
1、用EDTA二钠盐配制EDTA标准溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一种白色晶体粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室温溶解度为0.02g/100g H2O。
2、标定EDTA标准溶液的工作基准试剂,基准试剂的预处理:称量前一般应先用稀盐酸洗去氧化层,然后用水洗净,烘干。
配制步骤:
1、取适量锌片放在100mL烧杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自来水、纯水洗净,烘干、冷却。
2、用直接称量法在干燥小烧杯中准确称取0.15~0.2g Zn,盖好小表面皿。
3、用滴管从烧杯口加入5mL 1:1 盐酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地将溶液转移至250mL容量瓶中,用纯水稀释至标线,摇匀。
实验方法与判定:
1.对照品溶液的稳定性
2.对照品溶液的配制:精密量取脑对照品适量,加无水乙醇制成每1ml含脑1mg的溶液,作为对照品溶液。
3.色谱条件:以交联键合聚乙二醇为固定相的毛细管柱;柱温120℃;进样口温度250℃;检测器温度250℃;分流进样,分流比10:1。理论塔板数按脑计算应不低于10000。
4.实验方法:配制的对照品溶液,一份置冷处保存,一份置室温中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份对照品溶液,三种储备液同时稀释制成每1ml中约含50ug的溶液。照气相色谱法,并依据新对照品的峰面积计算原对照品溶液的含量。记录下来,保证原对照品溶液含量在考察期相对平均偏差不超过2.0%,验证对照品溶液在使用期内稳定可靠。
亲和链霉菌磷化细丝蛋白A抗体Human MCPIP(Monocyte Chemoattractant Protein-induced Protein 1) ELISA Kit马二(MDA)免疫试剂盒
苹果链格孢FMS样酪激3配体抗体Human ZNF71 ELISA Kit马白三烯B4(LTB4)免疫试剂盒
红细菌属F-box富含亮重复蛋白4抗体Human ZNF600 ELISA Kit马白介8(IL-8/CXCL8)免疫试剂盒
赖芽胞杆菌属免疫球蛋白E受体Fc ε RIγ抗体Human ZNF611 ELISA Kit马白介6(IL-6)免疫试剂盒
Bacillus Fcγ免疫球蛋白IgG结合蛋白抗体Human ZNF606 ELISA Kit马白介4(IL-4/CXCL4)免疫试剂盒
假单胞菌属磷肌结合蛋白1抗体Human ZNF597 ELISA Kit马白介1β(IL-1β)免疫试剂盒
酿酒酵母磷化成纤维生长因子受体3抗体Human ZNF711 ELISA Kit马白蛋白(Albumin)免疫试剂盒
球孢白僵菌叉头相关结构域包含蛋白1抗体Human ZNF622 ELISA Kit马β内啡肽(β-EP)免疫试剂盒
盘多毛孢串珠状纤维结构蛋白1抗体Human ZNF658 ELISA Kit马β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)免疫试剂盒
松口蘑纤维调节蛋白抗体Human ZNF645 ELISA Kit马C反应蛋白(CRP/PTX1)免疫试剂盒
干环褶孔菌磷化FANCD2抗体Human ZNF649 ELISA Kit马17羟孕(17-OHP)免疫试剂盒
稻离蠕孢范可贫血相关蛋白E抗体Human ZNF419 ELISA Kit鸡
酿酒酵母范可贫血相关蛋白M抗体Human ZNF549 ELISA Kit鸡转录因子AP-1(AP-1)免疫试剂盒
昆明链霉菌软骨Ezrin样蛋白抗体Human ZNF443 ELISA Kit鸡转化生长因子β3(TGFB3)免疫试剂盒
香菇(林研1号)慢性粒白血病33抗体Human ZNF557 ELISA Kit鸡转化生长因子β1(TGF-β1)免疫试剂盒
中间普氏菌白血病病C亚类受体蛋白FLVCR抗体Human ZNF446 ELISA Kit鸡肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体3(TRAIL-R3)免疫试剂盒
大肠埃希菌Escherichia│coli 质量规格:分析标准品,98.6%罗汉果皂苷IVa
腐生葡萄球菌Staphylococcus│saprophyticus 质量规格:100μg/ml,u=4%3-O-β-D-葡萄糖( 1→4)-[
香菇Lentinula│edodes 质量规格:10μg/ml,u=6%白头翁皂苷B
多聚赖氨酸溶液Human Soluble protein-0B,S-0B ELISA Kit 人S0B蛋白规格: 48T
Human macrophage inflammatory protein 2,MIP-2 ELISA Kit 人巨噬细胞炎性蛋白2规格: 48T
Human gelson ELISA Kit 人凝胶原蛋白规格: 48T
Human talin ELISA Kit 人踝蛋白规格: 48T
Human keratinocyte autocrine factor/Amphiregulin,KAF/AR ELISA Kit 人角化细胞内分泌因子规格: 48T
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意:用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。
一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
1) 第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
2) 根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。