详细介绍
商品属性:
产品名称 | |
检测方法 | 可见分光光度法 |
产品规格 | 50管/48样 |
产品货号 | AS6321188 |
商品介绍:
测定意义: TC 包括游离胆固醇和胆固醇酯。TC 是指组织中所有脂蛋白所含胆固醇之总和。 测定原理: 利用酯酶催化胆固醇酯水解生成游离胆固醇(FC)和游离脂肪酸(FFA),从而把胆固醇酯 转化为 FC;进一步利用胆固醇氧化酶催化 FC 氧化,生成△4-胆甾烯酮和 H2O2;最后利用 过氧化物酶催化 H2O2氧化 4-氨基安替bi林和酚,生成红色醌类化合物;在 500nm 有特征吸 收峰,其颜色深浅与 TC 含量成正比。 自备仪器和用品: 可见分光光度计、水浴锅、可调式移液枪、1mL 玻璃比色皿、异丙醇和蒸馏水。 |
试剂的组成和配制:
酸性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;碱性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体10 mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体3 mL×1瓶,4℃保存;试剂三:粉剂×1瓶,-20 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂四:粉剂×1瓶,4 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂五:液体3.6mL×1瓶,4 ℃保存;试剂六:液体30mL×1瓶,4 ℃保存;试剂七:液体50mL×1瓶,4 ℃保存。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(浆)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(浆)体积(ml):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照血清(浆)体积(ml):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml碱性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照组织质量(g):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照组织质量(g):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml碱性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):酸性 提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):碱 性提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 |
ADH测定操作:
1. 分光光度计预热30 min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意:空白管只需测定一次。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
梭砂贝母碱;湖贝(标准品)英文名: Indoxyl acetateHOXB4抗体包装100g
锁阳(标准品)英文名: α-Cyclodextrin磷化HER2受体抗体包装25g
塔萨敏;塔乌头(标准品)英文名: Xanthine Oxidase from bovine milk组蛋白去乙酰化6抗体包装5g
苔黑龙胆二糖苷英文名: Acylase from Aspergilus sp.磷化组蛋白去乙酰化6抗体包装5ml
苔黑葡萄糖苷;地衣二葡萄糖苷(标准品)英文名: Trypsin 1:250 fromPorcine pancreas组蛋白去乙酰化7抗体包装1g
太子参(标准品)英文名: Trypsin 1:2500 from Porcine pancreas磷化组蛋白去乙酰化7抗体包装250mg
太子参环肽B(标准品)英文名: Alibendol组蛋白去乙酰化8抗体包装1g
檀香(标准品)英文名: Ribonuclease A from bovine pancreas磷化HER4抗体包装5g
唐古特大黄(标准品)英文名: Pyridoxal 5-phosphate组tRNA连接抗体包装1g
桃金娘根(标准品)英文名: Coenzyme II reduced tetrasodium salt(NADPH)鸡新城疫血凝-神经抗体包装25g
桃仁(标准品)英文名: Coenzyme II reduced tetrasodium salt(NADPH)热休克蛋白105抗体包装5g
桃仁(山桃)(标准品)英文名: Glucose oxidase肝核因子1α抗体包装25g
桃叶干浸膏(标准品)英文名: Lysozyme,from egg white缺氧诱导因子1β /HIF-1β抗体包装5g
桃叶珊瑚苷(标准品)英文名: Peroxidase, Horseradish(HRP)热休克转录因子2抗体包装1g
桃枝(标准品)英文名: HyaluronidaseHA tag标签抗体包装5g
栗疫菌Cryphonectria│parasitica (Murrill) M. E. Barr 质量规格:HPLC≥98%,标准品膜联蛋白Ⅴ试剂盒莱苞迪甙A;Rebaudioside A
黄色赤杆菌Erythrobacter│flavus 质量规格:含量≥670µg/mg膜联蛋白Ⅴ试剂盒龙脑 ;Borneol
鲁氏不动杆菌Acinetobacter│lwoffii 质量规格:>99%膜联蛋白Ⅳ试剂盒硫软骨;Chondroitin 4-
总胆固醇(TC)含量测试盒50管/48样醋酸杆科 1,4-二代丁烷无翅型MMTV整合位点家族成员7BElisa
弯孢 2-羟基苯丝蛋白1Elisa
粉红单端孢 邻氨基苯酸盐酸盐易洛魁族同源盒基因5Elisa
纹孢青霉 三羧酸三乙酯接触蛋白相关蛋白样4Elisa
绳状青霉 乙二二硬脂酸受体相互作用蛋白1Elisa
传染性法氏囊病病 氟化氢吡啶络合物受体相互作用蛋白3Elisa
发酵乳杆 3-(三氟甲氧基)苯甲酰过氧化物4Elisa
纽缠丛梗孢 二乙氢盐,98%检测Arl6ip5Elisa
孟氏假单胞 4-溴-2-(三氟甲基)苯甲肝癌源性生长因子Elisa
假单胞属 N-烯自噬相关蛋白5Elisa
松生拟层孔 Fmoc-Leu-OPfp自噬相关蛋白7Elisa
苏云金芽孢杆 N-甲基正β-己糖亚基αElisa
运动发酵单胞运动亚种 6-羟基-2H-苯并-3-酮亚硝基还原Elisa
诺氏属 FMOC-L-缬五氟苯酯补体成分1q受体Elisa
黄单胞 2--6-硝基喹喔啉肾母过度表达基因Elisa