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详细介绍
商品属性：
产品名称 | |
检测方法 | 可见分光光度法 |
产品规格 | 50管/24样 |
产品货号 | AS6321115 |
商品介绍：
测定意义 半胱氨酰亚砜裂解酶（CSL）广泛存在于百合科葱属(如大蒜和洋葱)，十字花科芸薹属 (如卷心菜，菜花，西兰花)，以及豆科中的合金欢属中，并通常被称为蒜氨酸酶(Alliinase)。香菇酸在γ-谷氨酰转肽酶和半胱氨酸亚砜裂解酶的作用下转化成香菇精，以及产生丙酮酸、乙醛、甲醛和NH3。CSL是内源性甲醛生成的关键酶之一，测定CSL活性对于研究食品安全具有重要意义。 测定原理 CSL催化S-甲基-L-半胱氨酸亚砜反应产生丙酮酸，与2,4-二硝ji苯肼反应，在碱性条件下显棕红色，在510nm下有特征吸收峰。 自备实验用品及仪器 天平、研钵、离心机、分光光度计、1mL玻璃比色皿、恒温水浴锅、蒸馏水。 |
试剂的组成和配制：
酸性提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；碱性提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体10 mL×1瓶，4℃保存；试剂二：液体3 mL×1瓶，4℃保存；试剂三：粉剂×1瓶，-20 ℃保存，用时加入3mL蒸馏水，混匀，用不完的试剂4℃保存一周；试剂四：粉剂×1瓶，4 ℃保存，用时加入3mL蒸馏水，混匀，用不完的试剂4℃保存一周；试剂五：液体3.6mL×1瓶，4 ℃保存；试剂六：液体30mL×1瓶，4 ℃保存；试剂七：液体50mL×1瓶，4 ℃保存。
自备仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
NAD+和NADH的提取：
1、血清（浆）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取：按照血清（浆）体积（ml）：酸性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建 议取约0.1ml血清（浆），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）； 冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl碱性提取液使之中 和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提取：按照血清（浆）体积（ml）：碱性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建 议取约0.1ml血清（浆），加入1ml碱性提取液），95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）； 冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：按照组织质量（g）：酸性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建议取约0.1g 组织，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）；冰浴 中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提取：按照组织质量（g）：碱性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建议取约0.1g 组织，加入1ml碱性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）；冰浴 中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：先收集细胞或细菌到离心管内，弃上清，按照细菌或细胞数量（104个）：酸性 提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液）， 超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次），95℃水浴5min （盖紧，以防止水分散失）；冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加 入500μl碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提取：先收集细胞或细菌到离心管内，弃上清，按照细菌或细胞数量（104个）：碱 性提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液）， 超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次），95℃水浴5min （盖紧，以防止水分散失）；冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 |
ADH测定操作：
1. 分光光度计预热30 min，调节波长到340 nm，蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四，迅速混匀后于340nm测定吸光值变化，分别记录15s和75s时吸光值，分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四，迅速混匀后于340nm测定吸光值变化，分别记录15s和75s时吸光值，分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意：空白管只需测定一次。
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
化琥珀酰(标准品)英文名： Amidopyrine/aminopyrine1号染色体开放阅读框229抗体包装1g
化（标准品）英文名： Angiotensin II杀菌肽/天蚕抗菌肽抗体包装25g
（标准品）英文名： Vitamin D3Cullin 4a蛋白抗体包装5g
化乙酰(标准品)英文名： Pazopanib HCl角蛋白3抗体包装250mg
解磷定（标准品）英文名： Tiotropium bromide anhydrous 5号染色体开放阅读框52抗体包装10mg
雷他定(标准品)英文名： Formoterol fumarate 卷曲螺旋结构域蛋白85B抗体包装50mg
霉(标准品)英文名： Formoterol fumarate 紧密连接蛋白14抗体包装1g
霉二物（标准品）英文名： Faropenem sodium人巨病单克抗体包装100g
扎（标准品）英文名： Faropenem sodium癌胚抗原抗体包装25g
诺昔康(标准品)英文名： Orlistat(synthesis)表面趋化因子受体3抗体包装500g
普噻吨（标准品）英文名： Rifamycin sodium salt1号染色体开放阅读框33抗体包装1g
羟吡啶;吡多(标准品)英文名： Octreotide acetate磷化转录调节因子CEBP α 抗体包装5g
屈膦二钠(标准品)英文名： (S)-(+)-2-Amino-1-butanol 磷化转录调节因子CEBP β抗体包装100ml
噻（标准品）英文名： trans-D-erythro-sphingosine磷化转录调节因子CEBP β抗体包装25ml
噻（标准品）英文名： ribophytosphingosine hydrochloride磷化整合β2/Integrin β2抗体包装1g
40595=ATCC15722,CBS785.72,IMRU3751,ISP5595,JCM3045,JCM4805,RIA1445资源名称: 橄榄色菌核链霉菌 质量规格：>98,BR外基质磷糖蛋白试剂盒褪黑;Melatonine
苏云金芽孢杆菌Bacillus│thuringiensis 质量规格：>98%,BR色P450c21B/21-羟化试剂盒通关藤苷H;Tenacissoside
AS2.1182资源名称: 克鲁斯假丝酵母 质量规格：HPLC>98%,标准品色P450c21A/21-羟化试剂盒脱内酯琥珀半酯;Dehydro
半胱氨酰亚砜裂解酶（CSL)测试盒50管/24样绿色木霉 苯硫基乙酸胃癌抗原MG7Elisa
扩展青霉 3-(2-吡啶基氨基)酸乙酯IElisa
姬菇 1-苯基氨基脲IIIElisa
2--3-氟IVElisa
卫矛 3-(4-溴苯基)-9-苯基-9H-咔唑VElisa
枯草芽孢杆 2-甲氧基-3-溴-5-吡啶ⅦElisa
黄海鞘氨盒 氧化异佛尔酮ⅧElisa
香菇 3-甲基-2-苯基吡啶ⅨElisa
伯顿丝孢毕赤酵母 L-3-环基ⅪElisa
巴斯德毕赤酵母 3--5-甲氧基苯XIIElisa
费氏中华根瘤 3-溴苄ⅡElisa
澳型核果褐腐病 Fmoc-L-苯甘2,3-双加氧1Elisa
鞘氨单胞 N,N'-二苄基-1,3-二钙结合蛋白B1Elisa
银杏盘多毛孢 2,3-二磷脂A2Elisa
pESC-Ura 4'-甲氧基-2-苯基苯乙酮elabelaElisa
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