详细介绍
商品介绍:
测定意义 POD(EC 1.11.1.7)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,可催化过氧化氢氧化酚类和胺类化合物,具有消除过氧化氢和酚类、胺类毒性的双重作用。 测定原理 POD催化H2O2氧化特定底物,在470nm有特征光吸收。 需自备的仪器和用品 可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水 |
商品属性:
产品名称 | |
检测方法 | 可见分光光度法 |
产品规格 | 50管/48样 |
产品货号 | AS632149 |
试剂的组成和配制:
酸性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;碱性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体10 mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体3 mL×1瓶,4℃保存;试剂三:粉剂×1瓶,-20 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂四:粉剂×1瓶,4 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂五:液体3.6mL×1瓶,4 ℃保存;试剂六:液体30mL×1瓶,4 ℃保存;试剂七:液体50mL×1瓶,4 ℃保存。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(浆)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(浆)体积(ml):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照血清(浆)体积(ml):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml碱性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照组织质量(g):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照组织质量(g):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml碱性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):酸性 提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):碱 性提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 |
ADH测定操作:
1. 分光光度计预热30 min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意:空白管只需测定一次。
死亡关联蛋白激3(DAPK3)英文名:DAPK3 ELISA Kit电压依赖性钙通道CACNA1G+CACNA1H抗体包装5MG
死亡关联蛋白激1(DAPK1)英文名:DAPK1 ELISA Kit钙结合蛋白1抗体包装1g
斯钙1(STC1)英文名:STC1 ELISA Kit神经型一氧化氮合成结合蛋白抗体包装25g
丝切蛋白1(CFL1)英文名:CFL1 ELISA Kit蕈碱型乙酰受体M4抗体包装5g
丝裂原激活蛋白激激激激5(MAP4K5)英文名:MAP4K5 ELISA Kit钙/钙调依赖蛋白激2α抗体包装25g
丝聚蛋白(FLG)英文名:FLG ELISA Kit周期蛋白结合蛋白抗体包装5g
丝棕榈酰转移长链碱性亚基1(SPTLC1)英文名:SPTLC1 ELISA Kit分裂周期蛋白2抗体包装10MG
丝蛋白1(PRSS1)英文名:PRSS1 ELISA Kit分裂周期调控蛋白45抗体包装5mg
双调蛋白(AREG)英文名:AREG ELISA Kit染色体相关蛋白H抗体包装1g
双特异性磷5(DUSP5)英文名:DUSP5 ELISA Kit中心体蛋白质76抗体包装5g
双特异性磷1(DUSP1)英文名:DUSP1 ELISA Kit中心体蛋白152抗体包装2g
双特异性酪磷化调节激1A(DYRK1A)英文名:DYRK1A ELISA Kit酪蛋白激1γ2/casein kinase Iγ1抗体包装500mg
双糖链蛋白聚糖(BGN)英文名:BGN ELISA Kit唇裂和腭裂相关跨膜蛋白1抗体包装1g
双肾上腺皮质激样激1(DCLK1)英文名:DCLK1 ELISA Kit趋化样因子超家族成员8抗体包装250mg
双肾上腺皮质激(DCX)英文名:DCX ELISA Kit趋化样因子超家族成员1抗体包装1g
耶纳农球菌Agrococcus│jenensis 质量规格:>500U/mg,BR自然抗性相关巨噬蛋白1试剂盒竹红菌;hypocrellin A
节杆菌Arthrobacter│sp. 质量规格:含量测定转铁蛋白受体试剂盒紫萁;Osmundacetone
蛹虫草Cordyceps│militaris 质量规格:纯度>99%,BR转录中介因子1-β试剂盒藏红花;Potassium 7-Hyd
过氧化物酶(POD)测试盒50管/48样副干酪乳杆 氨基磺酸钠酰基化饥饿Elisa
Bacillus aryabhattai N-苯甲酰基-L-精线粒体呼吸链复合物Elisa
白鳞马勃 4-乙基苯磺酰线粒体呼吸链复合物IIIElisa
抗生链霉 N-三苯甲基咪唑线粒体呼吸链复合物IVElisa
燕麦镰孢 四氟酸硝酰阳离子线粒体融合2Elisa
木贼镰孢 N-Cbz-4-甲酸甲酯腺苷三磷酸结合盒转运体G1Elisa
空气近藤氏酵母 4-羟基-6-三氟甲基嘧啶腺苷三磷酸结合盒转运体G2Elisa
玫瑰黄链霉 三化钌三水合物腺苷酸环化Elisa
运动节杆 4-溴-2-苯甲腺苷酸环化1Elisa
灵芝 N-(2-氨基乙基)-4-吗啉甲酰草酸盐腺苷酸环化3Elisa
厌盐假诺氏 2,2,4,6,7-五甲基二氢苯并-5-磺酰腺苷脱氨Elisa
大肠埃希 1,2,4,5-四溴消退D1Elisa
异常毕赤酵母 2-(7-甲氧基萘-1-基)乙消退E1Elisa
苏云金芽孢杆松球亚种 1,3二甲基戊盐酸盐消退E2Elisa
大肠埃希氏 1,3-苯并恶唑-6-羧酸心肌肌钙蛋白ⅠElisa
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。