化工仪器网
详细介绍
试剂的组成和配制：
酸性提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；碱性提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体10 mL×1瓶，4℃保存；试剂二：液体3 mL×1瓶，4℃保存；试剂三：粉剂×1瓶，-20 ℃保存，用时加入3mL蒸馏水，混匀，用不完的试剂4℃保存一周；试剂四：粉剂×1瓶，4 ℃保存，用时加入3mL蒸馏水，混匀，用不完的试剂4℃保存一周；试剂五：液体3.6mL×1瓶，4 ℃保存；试剂六：液体30mL×1瓶，4 ℃保存；试剂七：液体50mL×1瓶，4 ℃保存。
自备仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
商品介绍：
测定意义： ME广泛存在于微生物、培养细胞、动物和植物胞浆中，尤其在植物组织中活性较高。ME催化苹果酸氧化脱羧的可逆反应，产生丙酮酸和CO2，以及伴随NAD(P)+的还原反应，是苹果酸代谢的关键酶。ME活性与生物合成和抗氧化密切相关。近年来植物ME活性测定较多，已经成为抗氧化研究的热点。根据辅酶专一性和对底物特异性的不同，可将ME分为NAD-ME(EC1.1.1.38)和NADP-ME(EC1.1.1.40)。 测定原理： NAD-ME催化NAD+还原成NADH，在340nm下测定NADH增加速率。 需自备的仪器和用品: 紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。 |
商品属性：
产品名称 | |
检测方法 | 微量法 |
产品规格 | 100管/96样 |
产品货号 | AS632121 |
NAD+和NADH的提取：
1、血清（浆）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取：按照血清（浆）体积（ml）：酸性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建 议取约0.1ml血清（浆），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）； 冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl碱性提取液使之中 和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提取：按照血清（浆）体积（ml）：碱性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建 议取约0.1ml血清（浆），加入1ml碱性提取液），95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）； 冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：按照组织质量（g）：酸性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建议取约0.1g 组织，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）；冰浴 中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提取：按照组织质量（g）：碱性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建议取约0.1g 组织，加入1ml碱性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）；冰浴 中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：先收集细胞或细菌到离心管内，弃上清，按照细菌或细胞数量（104个）：酸性 提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液）， 超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次），95℃水浴5min （盖紧，以防止水分散失）；冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加 入500μl碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提取：先收集细胞或细菌到离心管内，弃上清，按照细菌或细胞数量（104个）：碱 性提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液）， 超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次），95℃水浴5min （盖紧，以防止水分散失）；冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 |
ADH测定操作：
1. 分光光度计预热30 min，调节波长到340 nm，蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四，迅速混匀后于340nm测定吸光值变化，分别记录15s和75s时吸光值，分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四，迅速混匀后于340nm测定吸光值变化，分别记录15s和75s时吸光值，分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意：空白管只需测定一次。
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
骨粘连蛋白(ON)英文名：ON ELISA Kitβ淀粉样肽（1-28）抗体包装5g
骨形成蛋白6(BMP-6)英文名：BMP-6 ELISA Kit有丝分裂激B抗体包装5g
骨形成蛋白(BMPs)英文名：BMPs ELISA Kit软骨蛋白聚糖抗体包装25g
骨涎蛋白(BSP)英文名：BSP ELISA Kit去整合样金属蛋白10抗体包装5g
骨退化特异标志物(CTX-2)英文名：CTX-2 ELISA Kit含锚蛋白重复序列-因子信号抑制物盒蛋白家族9抗体包装100mg
骨特异性碱性磷B(ALP-B)英文名：ALP-B ELISA Kit含锚蛋白重复序列-因子信号抑制物盒蛋白家族8抗体包装1ml
骨特性碱性磷(BALP)英文名：BALP ELISA Kit植物生长激ABP1抗体包装25ml
骨桥(OPN)英文名：OPN ELISA Kit肌动蛋白相关蛋白1抗体包装5ml
骨胶原交联(Cr)英文名：Cr ELISA Kitα红分化相关因子抗体包装1g
骨钙/骨谷蛋白(OT/BGP)英文名：OT/BGP ELISA Kit血管紧张激活蛋白1抗体包装5g
骨钙(OT)英文名：OT ELISA KitAlpha清蛋白抗体包装1g
骨钙(BGP)英文名：BGP ELISA KitAFAP1L2抗体包装1g
骨成型蛋白受体Ⅱ(BMPR-Ⅱ)英文名：BMPR-Ⅱ ELISA Kit神经分化相关蛋白AHNAK抗体包装5MG
骨成型蛋白受体1A(BMPR-1A)英文名：BMPR-1A ELISA Kit粘合连接相关蛋白1抗体包装1g
骨成型蛋白9(BMP-9)英文名：BMP-9 ELISA Kit去整合样金属蛋白13抗体包装5g
脊髓小脑共济失调2型蛋白抗体转铁蛋白(TRF)Fluticasone Propionate is a synthetic glucocorticoid, used to treat non-allergic
NAD苹果酸酶（NADME）测试盒100管/96样新疆溶杆 2-氨基异丁酸乙酯盐酸盐谷氧还蛋白1Elisa
黑木耳 2-基苯基酸1,3-酯谷氧还蛋白2Elisa
拟青霉 福沙吡坦骨保护Elisa
坚强芽孢杆 5-甲氧基-1H--3-甲酸甲酯骨成型蛋白2Elisa
皱环球盖菇 1-N-Cbz-4-N-(Boc-氨甲基)骨成型蛋白4Elisa
米兰链霉 3-氨基-2-基-6-溴吡骨成型蛋白6Elisa
规则东方喜盐 苄基-2-乙骨成型蛋白7Elisa
枯草芽孢杆 3-溴-5-(三氟甲基)苄骨成型蛋白受体2Elisa
白酒 铅 2-氨基-4,6-二-5-甲酰基嘧啶骨钙Elisa
酿酒酵母 道古霉骨碱性磷酸Elisa
玫瑰淡紫链霉 对羟基乙酯骨碱性磷酸Elisa
黑色浅灰链霉 PD158780骨桥蛋白抗体(分泌型磷蛋白1)Elisa
弗吉尼亚链霉 2,4-二甲基吡咯-3-羧酸骨桥蛋白抗体(分泌型磷蛋白1)Elisa
镰刀 4-溴-3-甲氧基甲酯骨桥Elisa
根瘤 (4-溴-2-基)甲骨特异性碱性磷酸Elisa
化工仪器网