详细介绍
公司产品仅供科研使用:
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
微量法 | 100管/96样 | AS6321188 |
商品介绍:
商品介绍 测定意义: TC 包括游离胆固醇和胆固醇酯。TC 是指组织中所有脂蛋白所含胆固醇之总和。 测定原理: 利用酯酶催化胆固醇酯水解生成游离胆固醇(FC)和游离脂肪酸(FFA),从而把胆固醇酯 转化为 FC;进一步利用胆固醇氧化酶催化 FC 氧化,生成△4-胆甾烯酮和 H2O2;最后利用 过氧化物酶催化 H2O2氧化 4-氨基安替bi林和酚,生成红色醌类化合物;在 500nm 有特征吸 收峰,其颜色深浅与 TC 含量成正比。 自备仪器和用品: 水浴锅、可调式移液枪、酶标仪、96 孔板。 |
常见样本处理方法:
1、血清(浆)样品:直接检测。
2、细菌、细胞或组织样品的制备: 细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液) ,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次)8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。组织:按照组织质量(g) :提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
产品优点如下:
1、快速简便:双试剂,直接操作,快速、简便。
2、取样量微:需要的样本量是羟胺法的1/10。
3、灵敏度高:检测线0.5U/ml,是羟胺法5倍,邻苯三酚法的200倍
4、稳定性好:批内CV=5.50%,批间CV=3.32%,试剂盒2~8℃存放3个月有效。
5、再现性好:变异系数CV=1.2%。6、回收试验: X =102.3%。7、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。且特异性强,不受类SOD物质的干扰8、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等,效果均佳。
测定步骤:
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样,不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.温浴
1.加标本后和加结合物后,应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后,反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃,ELISA板可避光放在实验台上,以便 不时观察,待对照管显色适当时,即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅,在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果,准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
松萝(标准品)英文名: Proteinase K乙酰肝2抗体包装5g
松萝;D-地衣(标准品)英文名: Proteinase K人血清抗体包装1g
松塔(标准品)英文名: Chymostatin血红氧合 1/热休克蛋白32抗体包装5g
松叶(标准品)英文名: Leupeptin 磷化HER3受体抗体包装1g
松脂二葡萄糖苷(标准品)英文名: Pepstatin A microbial磷化组蛋白去乙酰化4/5/7抗体包装1g
松脂;松脂,松脂(标准品)英文名: L-(-)-Fucose 异染色质蛋白1-γ抗体包装100g
松脂二英文名: Pectinase组蛋白H1抗体包装25g
苏合香(标准品)英文名: beta-Amylase组蛋白去乙酰化1抗体包装5g
苏木(标准品)英文名: beta-AmylaseHAUS3蛋白抗体包装25g
浆苦味L(标准品)英文名: Deoxyribonuclease热休克蛋白93抗体包装5g
枣仁(标准品)英文名: Taka-Diastase from Aspergillus oryzae 磷化组蛋白去乙酰化3抗体包装25g
枣仁皂苷A(标准品)英文名: Taka-Diastase from Aspergillus oryzae 组蛋白H2B抗体包装5g
枣仁皂苷B(标准品)英文名: Glyceraldehyde-3-phosphate Dehydrogenase短链L-3羟烷基脱氢抗体包装1g
蒜(标准品)英文名: Bromelain from pineapple stem 组蛋白去乙酰化9抗体包装5g
穗花杉双黄(标准品)英文名: Thiamine pyrophosphate组蛋白去乙酰化10抗体包装1g
小单孢菌属Micromonospora│sp. 质量规格:>98%,BR,可用于培养膜联蛋白Ⅶ试剂盒化矢车菊;Cyanidin Chlo
成对杆菌Dyadobacter│alkalitolerans 质量规格:HPLC>98%,标准品膜联蛋白Ⅵ试剂盒酪;4-Hydroxyphenethy
盖孔菌Filoboletus│sp. 质量规格:>99%,BR膜联蛋白Ⅴ试剂盒胡黄连苷III;Picroside II
总胆固醇(TC)含量测试盒100管/96样大肠埃希 2-甲基-3,5二甲基-4-甲氧基吡啶盐酸盐氨基转移Elisa
芽孢杆属 1,7-庚二腱调蛋白Elisa
科氏葡萄球 4-叔丁基苯磺酰偶对蛋白Elisa
酿酒酵母 8-喹啉酸Synerginγ蛋白Elisa
杨生盾壳霉 苯基胍碳酸盐Strabismus蛋白Elisa
季也蒙假丝酵母季也蒙变种 己酸-2-苯乙酯Stomatin蛋白Elisa
麦根腐平脐蠕孢 已二酰二监理蛋白Elisa
梨黑斑链格孢 2,4-二氟-α-(1H-1,2,4-三唑基)乙酰苯14-3-3蛋白etaElisa
松口蘑 2--3-氟异碳酸酐3Elisa
暗黄紫色小单孢 二乙二二乙酸酯碳酸酐9Elisa
酿酒酵母 9,10-蒽二酸二频哪酯碳酸酐4Elisa
Arenibacter troitsensis 4-苯酮碳酸酐5Elisa
卷枝毛霉卷枝变型 2-基丁二酸二甲酯碳酸酐7Elisa
串珠皮状新丝孢酵母 二甲酰肼碳酸酐8Elisa
鞘氨单胞属 环沙星高温需求因子A1Elisa
实验方法学:
一、肝素的配制:
市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。