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详细介绍
商品属性：
产品名称 | |
检测方法 | 可见分光光度法 |
产品规格 | 50管/24样 |
产品货号 | AS632189 |
商品介绍：
测定意义 硝酸还原酶（NiR）是一类能催化亚硝酸盐还原的酶，广泛存在于微生物及植物体内，是自然界氮循环过程中的关键酶，可以将亚硝酸盐降解为NO或NH3，从而减少环境中亚硝态氮的积累，降低因亚硝酸盐累积而造成的对生物体的毒害作用。 测定原理 亚硝酸还原酶可将NO2—还原为NO，使样品中参与重氮化反应生成紫红色化合物的NO2—减少，即540nm处吸光值的变化可反应亚硝酸还原酶的活性。 需自备的仪器和用品 天平、研钵、可见分光光度计、水浴锅、低温离心机、1mL玻璃比色皿。 |
试剂的组成和配制：
酸性提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；碱性提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体10 mL×1瓶，4℃保存；试剂二：液体3 mL×1瓶，4℃保存；试剂三：粉剂×1瓶，-20 ℃保存，用时加入3mL蒸馏水，混匀，用不完的试剂4℃保存一周；试剂四：粉剂×1瓶，4 ℃保存，用时加入3mL蒸馏水，混匀，用不完的试剂4℃保存一周；试剂五：液体3.6mL×1瓶，4 ℃保存；试剂六：液体30mL×1瓶，4 ℃保存；试剂七：液体50mL×1瓶，4 ℃保存。
自备仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
NAD+和NADH的提取：
1、血清（浆）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取：按照血清（浆）体积（ml）：酸性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建 议取约0.1ml血清（浆），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）； 冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl碱性提取液使之中 和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提取：按照血清（浆）体积（ml）：碱性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建 议取约0.1ml血清（浆），加入1ml碱性提取液），95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）； 冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：按照组织质量（g）：酸性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建议取约0.1g 组织，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）；冰浴 中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提取：按照组织质量（g）：碱性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建议取约0.1g 组织，加入1ml碱性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）；冰浴 中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：先收集细胞或细菌到离心管内，弃上清，按照细菌或细胞数量（104个）：酸性 提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液）， 超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次），95℃水浴5min （盖紧，以防止水分散失）；冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加 入500μl碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提取：先收集细胞或细菌到离心管内，弃上清，按照细菌或细胞数量（104个）：碱 性提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液）， 超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次），95℃水浴5min （盖紧，以防止水分散失）；冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 |
ADH测定操作：
1. 分光光度计预热30 min，调节波长到340 nm，蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四，迅速混匀后于340nm测定吸光值变化，分别记录15s和75s时吸光值，分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四，迅速混匀后于340nm测定吸光值变化，分别记录15s和75s时吸光值，分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意：空白管只需测定一次。
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
17b-hydroxyandrost-4-ene-3-...英文名： OxaliplatinCD163蛋白样1抗体包装1mg
17α-Methyltestosterone（标准品）英文名： Oxiconazole Nitrate周期依赖性激5调节蛋白1样蛋白1抗体包装1g
1，3-（标准品）英文名： Oxytetracycline HCl22号染色体开放阅读框31抗体包装250mg
1，6-二氢-2-基-6-氧代-（3，4’-二吡啶）...英文名： Oxytetracycline HCl分裂周期37样蛋白1抗体包装1g
2,3,4-三氧基（标准品）英文名： Oxytocin Acetate羧肽X(M14家族1)抗体包装250mg
2,3,4-三氧基（标准品）英文名： Paclitaxel卷曲螺旋结构域蛋白135抗体包装100g
2,3,4-三氧基（标准品）英文名： Paclitaxel跨膜结构域边缘蛋白CEE抗体包装25g
2,3-丁二(标准品,≥99.0%(GC))英文名： Palonosetron HCl分子伴侣CESK1蛋白抗体包装500g
2,3-二氢-6-基咪唑【2,1-b】噻唑盐盐（盐...英文名： Paromomycin Sulfate卷曲螺旋结构域蛋白124抗体包装5g
2,6-二（标准品）英文名： Paromomycin SulfateCDK5激活结合蛋白1抗体包装100g
2,6-二基（标准品）英文名： Pazufloxacin Mesilate磷化表面趋化因子受体4相关蛋白2抗体包装25g
2-（4-异丁酰基）（标准品）英文名： Pazufloxacin Mesilate肿瘤/抗原1B/1A包装25g
2-基-4-（标准品）英文名： Pefloxacin mesylate dihydrate磷化分裂周期蛋白25B抗体包装5g
2-乙酰（标准品）英文名： Pefloxacin mesylate dihydrate跨膜蛋白12抗体包装1g
2-单硝异山梨酯（标准品）英文名： Pemetrexed Disodium免疫球蛋白超家族成员16抗体包装250mg
红曲霉（斜面）Monascus anka 质量规格：>95%血小板相关免疫球蛋白试剂盒亚麻木;Secoisolaricir
白鲍鱼菇Pleurotus│sp. 质量规格：≥595 µg/mg,BR血小板相关抗体IgM试剂盒氧化苦参碱;Ammothamnine
亮叶耳环根瘤菌Rhizobium│sp. 质量规格：含量测定血小板生成自身抗体试剂盒野黄芩苷;Scularin
亚硝酸还原酶(NiR)测试盒50管/24样扭曲毛壳 2-氨基-3-甲酸甲酯同型半胱酸Elisa
*蛹虫草 (R)-(+)-1-(4-甲氧基苯)乙3-羧基-4-甲基-5-基-2酸Elisa
米曲霉 N,N-二(4-基)苯ESRI 抗体Elisa
酿酒酵母 3,5-二叔丁基苯致癌物质Elisa
酿酒酵母 还原桃红R致癌物质Elisa
泡盛曲霉 2--5-甲基噻吩蛋白磷酸脂Elisa
赭黄裸伞 3-氧代环丁烷基羧酸天门冬酰Elisa
沙漠奇异球 三乙酰基-β-环糊精血管紧张转化抑制剂Elisa
大肠埃希 3,4-(亚甲二氧)肉桂酸阶段特异性胚胎表面抗原4Elisa
乳杆属 1,2-二溴-4-氟苯表皮生长因子受体-T790MElisa
枯草芽孢杆 6-吡-2-羧酸血管内皮生长因子165Elisa
旋柄腐霉 2-氟苯肼V LeidenElisa
枯草芽孢杆 8-氨基异喹啉凝血原20210AElisa
巴氏醋杆 6-氨基异喹啉弓蛔虫Elisa
热带头梗霉 屈西多巴神经调节－1Elisa
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