详细介绍
试剂的组成和配制:
酸性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;碱性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体10 mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体3 mL×1瓶,4℃保存;试剂三:粉剂×1瓶,-20 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂四:粉剂×1瓶,4 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂五:液体3.6mL×1瓶,4 ℃保存;试剂六:液体30mL×1瓶,4 ℃保存;试剂七:液体50mL×1瓶,4 ℃保存。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
商品介绍:
测定意义TG是长链脂肪酸和甘油形成的脂肪分子,是体内能量的主要来源。血清甘油三酯/三酰甘油(TG)是一项重要的临床血脂常规测定指标,特别是随着对其致动脉粥样硬化(AS)作用研究的深入,TG作为冠心病的一项独立的危险因素日益受到重视。测定原理血清中加入异丙醇抽提取甘油三酯,经KOH皂化使甘油三酯水解生成甘油及脂肪酸,甘油在过碘酸作用下氧化成甲醛,在氯离子存在下甲醛与乙酰丙酮缩合生成黄色的3,5二乙酰,1,4二氢甲基吡啶,其颜色的深浅与甘油三酯的含量成正比。实验中所需仪器及设备可见分光光度计、水浴锅、可调式移液枪、1ml玻璃比色皿、双蒸水 |
商品属性:
产品名称 | |
检测方法 | 可见分光光度法 |
产品规格 | 50管/48样 |
产品货号 | AS6321187 |
NAD+和NADH的提取:
1、血清(浆)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(浆)体积(ml):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照血清(浆)体积(ml):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml碱性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照组织质量(g):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照组织质量(g):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml碱性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):酸性 提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):碱 性提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 |
ADH测定操作:
1. 分光光度计预热30 min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意:空白管只需测定一次。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
牛角粉(标准品)英文名: Laminarin from Laminaria digitataγ-谷酰转肽5轻链抗体包装5g
翁花(标准品)英文名: Pancreatinγ-谷酰转肽7轻链抗体包装50mg
仙苷(标准品)英文名: Papain溶体累积病相关蛋白/口吃相关蛋白抗体包装1g
杨苷(标准品)英文名: Papain糖原合激3α+β抗体包装5g
杨梅根(标准品)英文名: PancreatinG2期/S期应答相关蛋白1抗体包装25g
杨酯(标准品)英文名: Pancreatin生长分化因子8/肌肉抑制抗体包装5g
蛭(蚂蟥)(标准品)英文名: Orphenadrine citrate磷化糖原合激3α/β抗体包装25g
丝瓜甙B英文名: β-GalactosidaseSEC63域内含蛋白1抗体包装5g
丝石竹皂苷元-3-O-β-D-葡萄糖酯英文名: Abscisic acid,S-ABAA型病H7N9 M1蛋白抗体包装1g
斯皮诺(标准品)英文名: Abscisic acid,S-ABA人类状瘤病33 E6蛋白抗体包装5g
四氢小檗碱(标准品)英文名: Abscisic acid,S-ABABeta基己糖苷beta亚基蛋白A链抗体包装10MG
四氢鸭脚木碱英文名: PEPSIN磷化热休克蛋白-70抗体包装100g
松柏;4-羟基-3-氧基肉桂(标准品)英文名: Ribonuclease A from bovine pancreas磷化热休克蛋白-70抗体包装25g
松果菊苷(标准品)英文名: Andarine19号染色体开放阅读框38抗体包装5g
松苓新英文名: PEPSIN乙酰肝抗体包装10mg
光滑假丝酵母Candida│glabrata 质量规格:>97%,BR末端补体复合物C5b-9试剂盒内酯;Triptolide,14
阴沟肠杆菌Enterobacter│cloacae 质量规格:HPLC>97%,标准品膜内酰基肽试剂盒路路通;Liquidambaric a
雷夫松氏菌Leifsonia│sp. 质量规格:>95%,蛋白≤0.1%膜联蛋白A2试剂盒灵-B;(-)-Licarin B
甘油三酯(TG)含量测试盒50管/48样硬结节杆 4-甲基邻苯二白关联球蛋白样受体1Elisa
鞘氨 4-氟-2-甲白关联球蛋白样受体2Elisa
*灰葡萄孢 甘油缩甲γ谷氨酰转移Elisa
粪肠球 3-溴-5-甲酸甲酯(易)酪激受体BElisa
毛霉属 环戊基苯酸β位淀粉样前体蛋白裂解2Elisa
弓形虫(GJS-3株) 盐酸特唑磷酸化蛋白激C亚性D型Elisa
北京掷孢酵母 2-甲氧基-6-突触核蛋白βElisa
盖替隐球酵母 1,4-二溴-2,3-丁二酮丰富重复G蛋白偶联受体5Elisa
浅灰小双孢 1-(4-吡啶基)酮激锚定蛋白4Elisa
广西腐霉 3-氨基-2-吡啶紧密连接蛋白4Elisa
黑曲霉 4-环己酮羧酸甲酯可溶性Klotho蛋白Elisa
空肠弯曲杆 5--1H-吡咯并[2,3-B]吡啶不饱和脂肪酸Elisa
近缘毛壳 3-乙酰氨基邻苯二甲酸酐饱和脂肪酸Elisa
鞘氨杆 1,7-二-4-氧杂庚烷人可溶性EndoglinElisa
酿酒酵母 5-香草酸蛋白激D2Elisa