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详细介绍
商品属性：
产品名称 | |
检测方法 | 可见分光光度法 |
产品规格 | 50管/24样 |
产品货号 | AS6321186 |
商品介绍：
测定意义 肝酯酶是脂肪分解酶，在肝实质细胞中合成，存在于肝脏窦周间隙内皮细胞表面和窦周间隙腔面的肝细胞微绒毛表面，可促进脂蛋白中的胆固醇向类固醇激素转化，血浆中的HL活性增高时，血浆中小颗粒可导致LDL水平升高，加速动脉粥样硬化的发生。 测定原理 肝酯酶水解α-乙酸萘酯产生α-萘酚，可与固蓝B盐形成紫红色偶氮化合物，在595nm有特征吸收峰，颜色深浅在一定范围内与肝酯酶活性成正相关。 自备实验用品及仪器 天平、冷冻离心机、研钵、水浴锅、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿。 |
试剂的组成和配制：
酸性提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；碱性提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体10 mL×1瓶，4℃保存；试剂二：液体3 mL×1瓶，4℃保存；试剂三：粉剂×1瓶，-20 ℃保存，用时加入3mL蒸馏水，混匀，用不完的试剂4℃保存一周；试剂四：粉剂×1瓶，4 ℃保存，用时加入3mL蒸馏水，混匀，用不完的试剂4℃保存一周；试剂五：液体3.6mL×1瓶，4 ℃保存；试剂六：液体30mL×1瓶，4 ℃保存；试剂七：液体50mL×1瓶，4 ℃保存。
自备仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
NAD+和NADH的提取：
1、血清（浆）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取：按照血清（浆）体积（ml）：酸性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建 议取约0.1ml血清（浆），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）； 冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl碱性提取液使之中 和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提取：按照血清（浆）体积（ml）：碱性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建 议取约0.1ml血清（浆），加入1ml碱性提取液），95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）； 冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：按照组织质量（g）：酸性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建议取约0.1g 组织，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）；冰浴 中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提取：按照组织质量（g）：碱性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建议取约0.1g 组织，加入1ml碱性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）；冰浴 中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：先收集细胞或细菌到离心管内，弃上清，按照细菌或细胞数量（104个）：酸性 提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液）， 超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次），95℃水浴5min （盖紧，以防止水分散失）；冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加 入500μl碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提取：先收集细胞或细菌到离心管内，弃上清，按照细菌或细胞数量（104个）：碱 性提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液）， 超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次），95℃水浴5min （盖紧，以防止水分散失）；冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 |
ADH测定操作：
1. 分光光度计预热30 min，调节波长到340 nm，蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四，迅速混匀后于340nm测定吸光值变化，分别记录15s和75s时吸光值，分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四，迅速混匀后于340nm测定吸光值变化，分别记录15s和75s时吸光值，分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意：空白管只需测定一次。
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
石吊兰英文名： D-Mannose神经生长相关蛋白43包装1g
石斛（标准品）英文名： N-Octanoyl-N-methylglucamine3-磷甘油脱氢（兔来源免疫组化用抗体）包装5g
石斛碱（标准品）英文名： N-Decanoyl-N-methylglucamine 3-磷甘油脱氢单克抗体(内参抗体)包装1g
石见穿（标准品）英文名： n-Octyl-β-D-Thioglucopyranoside生长停滞特异性蛋白2家族1抗体包装5g
石椒草（标准品）英文名： D(+)-Raffinose pentahydrateG蛋白偶联受体97抗体包装1g
石榴皮（标准品）英文名： D-SorbitolG蛋白结合蛋白7抗体包装250mg
石榴皮鞣；安石榴林（标准品）英文名： N-Octyl-β-D-glucopyranoside绿色荧光蛋白抗体包装25g
石榴子（标准品）英文名： L-(+)-Ribose绿色荧光蛋白抗体包装5g
石杉碱（标准品）英文名： L-(+)-RiboseG蛋白通路抑制蛋白1抗体包装1g
矢车菊-3-O-葡萄糖苷(标准品）英文名： 2-Deoxy-L-ribose胶质系源性神经营养因子受体α2抗体包装5g
使君子（使君子仁）（标准品）英文名： 4-Methylumbelliferyl-β-D-xylopyranoside Printable Reviews核突触蛋白-γ抗体包装1g
首乌藤（标准品）英文名： 2-Deoxy-D-Ribose粒-巨噬克激因子抗体包装5g
熟地黄（标准品）英文名： D-Galactose还原抗体包装5ml
鼠尾草（标准品）英文名： D-Galactose胰高血糖样肽-1抗体包装1g
鼠尾草（标准品）英文名： Hydrazine dihydrochloride颗粒蛋白前体抗体包装25g
绳索状芽孢杆菌Bacillus│funiculus 质量规格：>95%,BR内皮2试剂盒络石苷;Tracheloside
鲁氏不动杆菌Acinetobacter│lwoffii 质量规格：HPLC>95%,标准品内皮1受体试剂盒莨菪碱;L-Hyoscyamine
日本慢生根瘤菌Bradyrhizobium│japonicum 质量规格：>99%,BR内皮1试剂盒镰叶芹二;Falcarindiol
肝脂酶（HL）测试盒50管/24样Fusarium venenatum Nirenberg N-乙烯基吡咯烷酮肌腱蛋白NElisa
短小芽孢杆 2-乙基丁酸肌腱蛋白XElisa
草木樨中华根瘤 trans-N-tert-Butyloxycarbonyl-4-tosyloxy-L-proline神经生长因子诱导蛋白BElisa
光滑青霉 六Taperin蛋白Elisa
蜂房哈夫尼 2-甲基-3-(三氟甲基)苯甲Talpid3蛋白Elisa
豌豆根瘤 2,5-二氢-6-羟基-2-甲基-5-氧-3-巯基-1,2,4-三新城疫病sIgA抗体Elisa
香菇 5-溴-3-甲几丁质Elisa
孟氏假单胞 4-基苯乙锁链Elisa
麦根腐平脐蠕孢 1-溴-3-苯氧基烷基质金属蛋白抑制因子9Elisa
灰葡萄孢* (1S,2S)-(+)-N,N'-二甲基环己烷-1,2-二Tsukushin蛋白Elisa
球孢白僵 间苯甲莱姆病抗体Elisa
克鲁斯假丝酵母 4,5-二氟-2-莱姆病IgM抗体Elisa
桑炭疽盘 3-溴-5-氟-4-甲氧基苯高迁移率族AT Hook蛋白2Elisa
乳酸乳球乳亚种 4-乙酰基脂质转运蛋白2Elisa
粉拟青霉 3-甲氧基溴苄Notch同源物3Elisa
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