详细介绍
试剂的组成和配制:
酸性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;碱性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体10 mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体3 mL×1瓶,4℃保存;试剂三:粉剂×1瓶,-20 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂四:粉剂×1瓶,4 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂五:液体3.6mL×1瓶,4 ℃保存;试剂六:液体30mL×1瓶,4 ℃保存;试剂七:液体50mL×1瓶,4 ℃保存。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
商品介绍:
测定意义 低密度脂蛋白为血清蛋白之一,主要由肝脏合成,与冠心病的发生和动脉粥样硬化损伤呈正相关,是脂类疾病分类和风险预测的一个重要指标。 测定原理 用沉淀剂分离血清中的低密度脂蛋白胆固醇,利用酯酶催化胆固醇酯水解生成游离胆固醇和游离脂肪酸,从而把胆固醇酯转化为FC;进一步利用胆固醇氧化酶催化FC氧化,生成△4-胆甾烯酮和H2O2;再利用过氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基安替bi林和酚,生成红色醌类化合物;在500nm有特征吸收峰。 需自备的仪器和用品 离心机,恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水。 |
商品属性:
产品名称 | |
检测方法 | 微量法 |
产品规格 | 100管/96样 |
产品货号 | AS6321200 |
NAD+和NADH的提取:
1、血清(浆)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(浆)体积(ml):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照血清(浆)体积(ml):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml碱性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照组织质量(g):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照组织质量(g):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml碱性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):酸性 提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):碱 性提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 |
ADH测定操作:
1. 分光光度计预热30 min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意:空白管只需测定一次。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
盐药根碱(标准品)英文名: L-Lysine methyl ester dihydrochloride同源盒蛋白C6抗体包装10g
盐伊立替康(标准品)英文名: L-Methionine Methyl Ester Hydrochloride同源盒蛋白C4抗体包装10mg
盐益母草碱(标准品)英文名: Sodium cholesteryl sulfate同源盒蛋白D13抗体包装50mg
盐育亨宾(标准品)英文名: O-tert-Butyl-L-serine methyl ester hydrochloride组蛋白H1.4样蛋白抗体包装5g
羊胆粉(标准品)英文名: L-Valine methyl ester hydrochloride 组蛋白H1FOO抗体包装1g
羊耳菊(标准品)英文名: L-Valinamide hydrochloride 同源盒蛋白B6抗体包装1g
羊开口(标准品)英文名: Cysteamine Hydrochloride错构蛋白抗体包装25g
羊奶奶叶(标准品)英文名: Glycinamide hydrochloride磷化组蛋白H1FOO抗体包装5g
杨梅苷(标准品)英文名: L-4-Hydroxyproline methyl ester hydrochloride单纯疱疹病1型转录调节因子ICP22抗体包装100g
杨梅-3-O-半乳糖苷英文名: D-Leucine methyl ester hydrochlorideH2A组蛋白家族E蛋白抗体包装25g
杨梅/杨梅(标准品)英文名: (s)-2-phenylglycine methyl ester hydrochlorideH2B组蛋白家族M蛋白抗体包装500g
杨芽黄(标准品)英文名: H-D-Ala-OEt·HClH2B组蛋白家族成员W蛋白抗体(特异性)包装1g
洋艾(标准品)英文名: LinagliptinPWWP域包含蛋白1抗体包装5g
洋川芎内酯A(标准品)英文名: L-Glutamic Acid 1-Benzyl Ester高密度脂蛋白抗体包装5g
洋川芎内酯H(标准品)英文名: H-Leu-OEt·HClHEAT重复内含蛋白1蛋白抗体包装100g
热带假丝酵母Candida│tropicalis 质量规格:>98.5%,BR,可用于培养卵泡抑试剂盒苦丁冬青甙H;3-O-alpha-L-A
产黄青霉Penicillium│chrysogenum 质量规格:HPLC>99%,标准品开环异落叶松树脂;Secoisolar
CAAS251=CCTCCAB207010=JCM14814资源名称: 黄色涅斯特连科氏菌 质量规格:≥98.0% 相关物质及对应异构体均小于1%胆固酰基转移试剂盒D-(-)-奎宁;Quinic aci
血清低密度脂蛋白(LDLC)测试盒100管/96样大肠埃希氏 Z-谷安酸叔丁基酯过氧化物Elisa
酿酒酵母 对氟乙酯还原型Elisa
霍氏瓶霉 DL-10-樟脑磺酸海藻糖Elisa
酿酒酵母 3-甲基戊酸乙酯红色叶绿降解产物还原Elisa
汉逊德巴酵母 2-溴对苯二酸胡萝卜Elisa
疣孢青霉 5-溴-2-糠酸环磷酸腺苷Elisa
无花果拟盘多毛孢 2,6-二叔丁基吡啶活性氧Elisa
竹瘤座 2-甲基烟酰肌酸激Elisa
食用香料 折光指数、相对密度 3-溴-2-氟苯脱落酸Elisa
盐敏芽孢杆 DL-谷氨酰几丁质Elisa
多带革孔 酸性棕14己糖激Elisa
少根根霉 N,1-二-Fmoc-L-组交替氧化Elisa
多主葡萄壳 3-硝基三氟甲苯精Elisa
长双歧杆长亚种 苯并噻吩-2-酸抗坏血酸过氧化物Elisa
滑菇 N-Boc-DL--2-甲酸可溶性蛋白质Elisa