详细介绍
试剂的组成和配制:
酸性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;碱性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体10 mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体3 mL×1瓶,4℃保存;试剂三:粉剂×1瓶,-20 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂四:粉剂×1瓶,4 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂五:液体3.6mL×1瓶,4 ℃保存;试剂六:液体30mL×1瓶,4 ℃保存;试剂七:液体50mL×1瓶,4 ℃保存。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
商品介绍:
测定意义: 天冬酰胺合成酶是广泛存在于生物体内的一类氨基转移酶,催化谷氨酞胺的氨基向天冬氨酸转移。当植物处于氨毒时天冬酞胺的形成是一种解毒反应。 测定原理: AS催化L-天冬酰胺水解成L-天冬氨酸和氨,利用奈氏试剂检测氨增加的速率,即可计算其酶活性。 |
商品属性:
产品名称 | |
检测方法 | 微量法 |
产品规格 | 100管/96样 |
产品货号 | AS6321106 |
NAD+和NADH的提取:
1、血清(浆)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(浆)体积(ml):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照血清(浆)体积(ml):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml碱性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照组织质量(g):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照组织质量(g):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml碱性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):酸性 提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):碱 性提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 |
ADH测定操作:
1. 分光光度计预热30 min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意:空白管只需测定一次。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
咪唑(标准品)英文名: Minocycline hydrochlorideCUE结构域蛋白2抗体包装1g
尼考(标准品)英文名: Mitoxantrone HCl线粒体复合物NDUFS1蛋白抗体包装5g
比洛芬(标准品)英文名: Mitoxantrone HCl血栓合成抗体包装1g
达宾(标准品)英文名: Mitoxantrone HCl多癌基因下调蛋白抗体包装250mg
伐他钠(标准品)英文名: Mizoribine色C氧化蛋白5B抗体包装1ml
芬那,灭(标准品)英文名: Moguisteine色C氧化亚基3抗体包装1g
喹(标准品)英文名: Moguisteine色C氧化亚基6B抗体包装250mg
康唑(标准品)英文名: Mometasone furoate磷化致癌基因C-Myc抗体包装100g
喹(标准品)英文名: Mometasone furoate磷化致癌基因C-Myc抗体包装25g
西林钠(标准品)英文名: Natamycin,Pimaricin色P450 11B1抗体包装5g
罗沙星(标准品)英文名: Natamycin,Pimaricin环磷鸟苷抗体包装100g
马西尼/马泽尼(标准品)英文名: Nifedipine内皮因子维生B12受体抗体包装25g
尼(标准品)英文名: Nifedipine原癌基因cMAF抗体包装5g
尼辛葡(标准品)英文名: Nimodipine18号染色体开放阅读框56抗体包装1g
,5-脲嘧啶,5-(标准品)英文名: Nimodipine3号染色体开放阅读框22抗体包装25g
毛壳菌属Chaetomium│sp. 质量规格:>98%信号传导子及转录激活子4试剂盒环戊烯二;Linderone
黑曲霉Aspergillus│niger 质量规格:≥98%,培养级信号传导子及转录激活子3试剂盒无梗五加苷B;Eleutheroside
短小芽孢杆菌Bacillus│pumilus 质量规格:≥98%,标准品信号传导子及转录激活子2试剂盒伪金丝桃;Pseudohyperici
天冬酰胺合成酶(AS)测试盒100管/96样发酵成对杆 5-氨磺酰基-2-甲氧基蛋白 DJ-1Elisa
节杆 1-(嘧啶-2-基)-1H-类缺陷病抗体Elisa
酮丛毛单胞 1,3-二溴-2,2-二甲氧基烷神经源性丝蛋白抑制剂Elisa
香气红冬孢锁掷孢酵母 5,5-二甲氧基-1,2,3,4-四环戊二烯β内啡肽受体Elisa
柠檬原小单孢 4-甲氧基间苯二甲酸kappa型受体Elisa
牛肝 N-甲基四氢-2H-吡喃-4-二氢还原Elisa
大肠埃希氏杆 2-溴-3',5'-二氟苯乙酮蛋白激GElisa
酿酒酵母 4-(2-羟基乙氧基)苯甲Ⅱ型胶原螺旋肽Elisa
布氏白僵(卵孢白僵) 3-(4-甲氧基苯基)-3-氧代酸甲酯五型腺病抗体Elisa
肠产性大肠埃希氏 3,4,5-三氟苯乙分泌性白蛋白抑制因子Elisa
谷棒杆 3,4,5-三氟苯乙酮麦溶蛋白Elisa
云芝栓孔 (变色栓) 3,5-二氟苄抗乙糖苷甘露糖抗体Elisa
枯草芽孢杆 3-溴-4-甲氧苯抗细鞭毛蛋白抗体Elisa
芹侧耳(杏鲍菇) 吡咯-2-羧酸乙酯8-羟基鸟糖苷1Elisa
巨型艾耳球虫 (S)-3-甲基-1-[2-(1-基)苯基]丁.N-乙酰-L-谷盐抗Chitobioside糖IgA抗体Elisa