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详细介绍
商品属性：
产品名称 | |
检测方法 | 可见分光光度法 |
产品规格 | 50管/24样 |
产品货号 | AS6321211 |
商品介绍：
测定意义SBE（EC 2.4.1.18）主要存在于植物中，是参与支链淀粉合成的关键酶，测定SBE活性在淀粉生物合成、优质农作物品种选育和品质遗传改良研究中具有重要意义。测定原理淀粉和碘结合后在660nm有特征光吸收，SBE可切断支链淀粉侧支，从而降低了淀粉-碘复合物在660nm吸收值，一定时间内吸光度下降的百分率可以反映SBE活性。需自备的的仪器和用品可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水 |
试剂的组成和配制：
酸性提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；碱性提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体10 mL×1瓶，4℃保存；试剂二：液体3 mL×1瓶，4℃保存；试剂三：粉剂×1瓶，-20 ℃保存，用时加入3mL蒸馏水，混匀，用不完的试剂4℃保存一周；试剂四：粉剂×1瓶，4 ℃保存，用时加入3mL蒸馏水，混匀，用不完的试剂4℃保存一周；试剂五：液体3.6mL×1瓶，4 ℃保存；试剂六：液体30mL×1瓶，4 ℃保存；试剂七：液体50mL×1瓶，4 ℃保存。
自备仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
NAD+和NADH的提取：
1、血清（浆）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取：按照血清（浆）体积（ml）：酸性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建 议取约0.1ml血清（浆），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）； 冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl碱性提取液使之中 和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提取：按照血清（浆）体积（ml）：碱性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建 议取约0.1ml血清（浆），加入1ml碱性提取液），95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）； 冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：按照组织质量（g）：酸性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建议取约0.1g 组织，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）；冰浴 中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提取：按照组织质量（g）：碱性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建议取约0.1g 组织，加入1ml碱性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）；冰浴 中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：先收集细胞或细菌到离心管内，弃上清，按照细菌或细胞数量（104个）：酸性 提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液）， 超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次），95℃水浴5min （盖紧，以防止水分散失）；冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加 入500μl碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提取：先收集细胞或细菌到离心管内，弃上清，按照细菌或细胞数量（104个）：碱 性提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液）， 超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次），95℃水浴5min （盖紧，以防止水分散失）；冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 |
ADH测定操作：
1. 分光光度计预热30 min，调节波长到340 nm，蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四，迅速混匀后于340nm测定吸光值变化，分别记录15s和75s时吸光值，分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四，迅速混匀后于340nm测定吸光值变化，分别记录15s和75s时吸光值，分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意：空白管只需测定一次。
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
Prosapogenin CP6英文名： MagnesonII白介16抗体包装1g
Raddeanoside 20英文名： Ferron抑制βB/Inhibin β B抗体包装250mg
Sapindoside A英文名： 3-Methyl-2-benzothialinone白介11抗体包装1g
Smyrindioloside英文名： Miglitol白介22受体抗体包装5g
Thonningianin A英文名： Miglitol白介26抗体包装1g
Tokinolide B英文名： 1-Naphtholphthalein白介-17D抗体包装25g
Triptonine B英文名： Dapoxetine hydrochloride环指蛋白217抗体包装5g
α-倒捻子(标准品)英文名： Dapoxetine hydrochloride白介2抗体(人)包装1g
α-蒎烯英文名： Fast Black K Salt白介-23受体抗体包装500mg
α-乳香英文名： Amido black 10B胰岛样生长因子结合蛋白3抗体包装5g
α-石竹烯英文名： Naltrexone hydrochloride白介6受体β抗体IL-6Rβ包装1g
α-细辛脑,细辛(标准品)英文名： Triphenylarsine oxide干扰-gamma受体1抗体包装25g
α-香附(标准品)英文名： 5,7,4’-Trihydroxy-8-methylflavanone白介1α前肽/IL-1α前肽抗体包装5g
α－常春藤皂苷（标准品）英文名： Aloin B整合α11抗体包装1g
β,β-二基烯酰阿宁（标准品）英文名： Arctigenin 4'-O-β-gentiobioside胰岛生长因子样家族成员2抗体包装5g
弗氏志贺菌Shigella│flexneri 质量规格：>99%,BR什曼原虫试剂盒L-精;L(+)-Arginine
曲霉属Aspergillus│sp. 质量规格：>95%,BR,可用于培养尿肽试剂盒积雪草;Asiatic acid
弧菌Vibrio│sp. 质量规格：>98%,USP,BR李斯特菌抗体试剂盒金雀花碱;Cytisine
淀粉分支酶（SBE）测试盒50管/24样冷温木克酵母 3-溴苯甲二乙缩琥珀酸脱氢Elisa
泗川假黄单胞 2-溴-5-甲氧基苯甲α-淀粉Elisa
枯草芽孢杆 3--2-甲酸磷酸化组蛋白Elisa
坚强芽孢杆 三氟甲磺镓豆酸Elisa
植物乳杆 苯氧乙酸烯酯Elisa
炭球 硫酸铷生长Elisa
固氮假单胞 亚硫酸锌蔗糖合成Elisa
酿酒酵母 BOC-L-羟脯甲酯神经酰-1-磷酸Elisa
地衣芽孢杆 2-羟基-2-酮鞘糖脂Elisa
粪产碱杆 氨基三甘单甲脂肪酸去饱和Elisa
大肠埃希氏(大肠杆)* 4-溴-3,5-二N-乙酰葡糖Elisa
芽胞杆 4-氨基-2-嘧啶磷酸核酮糖激Elisa
格氏糖多孢 二乙二双(对甲苯磺酸酯)神经酰Elisa
白僵 α,ω-双{2-[(3-羧基-1-氧基)氨基]乙基}聚乙二神经鞘氨Elisa
枯草芽孢杆 α,ω-双{2-[(3-羧基-1-氧基)氨基]乙基}聚乙二1磷酸鞘氨Elisa
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