KRBH缓冲液

KRBH缓冲液公司正在销售的产品：豚鼠水通道蛋白2(AQP-2)试剂盒 Anti-IL3RA Antibody肿瘤坏死因子配体超家族成员18抗体
豚鼠β甘露糖苷酶(β Manase)试剂盒 Anti-IL4 Antibody肿瘤坏死因子受体超家族成员14抗体
豚鼠黑素瘤黏附分子(MCAM)试剂盒Anti-IL4 Antibody磷酸化血管生成素受体2抗体
豚鼠黑色素瘤标记物(MART/Melan-

公司产品仅用于科研具有质量可靠、效果稳定、灵敏度高、操作简单、易保存等特点，咨询并订购！

产品分类：细胞其他

储存条件：4℃,3个月

用途：全称为Krebs-Ringer bicarbonate HEPES buffer,主要由HEPES、氯化钠、碳suan氢钠、磷酸二氢钾、氯化钙、硫suan镁等组成。用于动物离体实验,肌体灌流、清洗组织。并维持离体组织的正常生理功能。

注意事项：无菌溶液，主要防止微生物污染。

 

 

配制与标定的实验原理：

1、用EDTA二钠盐配制EDTA标准溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一种白色晶体粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室温溶解度为0.02g/100g H2O。

2、标定EDTA标准溶液的工作基准试剂，基准试剂的预处理：称量前一般应先用稀盐酸洗去氧化层，然后用水洗净，烘干。

配制步骤：

1、取适量锌片放在100mL烧杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自来水、纯水洗净，烘干、冷却。

2、用直接称量法在干燥小烧杯中准确称取0.15～0.2g Zn，盖好小表面皿。

3、用滴管从烧杯口加入5mL 1:1 盐酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地将溶液转移至250mL容量瓶中，用纯水稀释至标线，摇匀。

 

 

实验方法与判定：

1.对照品溶液的稳定性

2.对照品溶液的配制：精密量取脑对照品适量，加无水乙醇制成每1ml含脑1mg的溶液，作为对照品溶液。

3.色谱条件：以交联键合聚乙二醇为固定相的毛细管柱；柱温120℃；进样口温度250℃；检测器温度250℃；分流进样，分流比10:1。理论塔板数按脑计算应不低于10000。

4.实验方法：配制的对照品溶液，一份置冷处保存，一份置室温中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份对照品溶液，三种储备液同时稀释制成每1ml中约含50ug的溶液。照气相色谱法，并依据新对照品的峰面积计算原对照品溶液的含量。记录下来，保证原对照品溶液含量在考察期相对平均偏差不超过2.0%，验证对照品溶液在使用期内稳定可靠。

levatin Ammonium oxalate hydrateEFHD1蛋白抗体包装5g

Lup-20(29)-en-28-oic acid, ... Adenosine-5'-monophosphate, free acid突触结合蛋白2抗体包装100g

Monnieriside G Aluminum sulfate, hexadecahydrate核苷焦磷2抗体包装25g

Multicaulisin Glucose-6-phosphate dehydrogenase长链烯脂酰化抗体包装25g

N-阿魏酰真蛸 Malate dehydrogenase神经元，肌肉特异性烯化抗体包装5g

N-苄基-(9Z,12Z)-十八碳二烯酰 N-Hydroxysuccinimide内皮分化型G蛋白偶联受体3抗体包装1g

N-苄基-(9Z,12Z,15Z)-十八碳三烯酰 Gallic acid monohydrate发育相关蛋白ERCC6L抗体（乙致畸因子）包装25g

N-苄基十六烷酰 Gallic acid monohydrate猪源产肠性大肠杆菌K99抗体包装5g

N-反式-阿魏酰基酪 a-Ketoglutaric acid, disodium salt, dihydrateα内磺肽抗体包装100g

N-反式-对-香豆酰基去辛弗林 Calcium hydroxide磷化转录因子E2F-1抗体包装25g

N-反式-对香豆酰酪(标准品) HPC, hydroxypropyl cellulose表皮生长因子样激受体1抗体包装500g

N-基野靛碱（标准品） L(+)Sodium tartrate dihydrateCREB结合蛋白p300抗体包装1g

Nudicaucin A Pyridoxamine, dihydrochlorideEB病LMP-2A蛋白抗体包装5g

Nudicaucin B Sodium salicylateEB病核抗原1抗体包装25g

Odoratisol A CAPS, sodium salt磷化雌激受体β抗体包装5g

烟草根黑腐病菌Thielaviopsis│basicola 质量规格：>98.5%,BR性磷试剂盒肉豆蔻木脂;Myrislignan

护岸植物红树杆菌Mangrovibacter│plantisponsor 质量规格：HPLC>98%,标准品性富亮核磷蛋白32家族成员E试剂盒L-肉碱;L(-)-Carnitine

: AS3.2783资源名称: 宇佐曲霉 质量规格：>98.5%性成纤维生长因子试剂盒20(S)-原人参二;Protopan
KRBH缓冲液STAT4 /FITC  荧光标记信号转导和转录激活因子4IgG

Phospho-Stat4 (Tyr693) /FITC   荧光标记化信号转导和转录激活因子4IgG

STAT5/FITC  荧光标记信号转导和转录激活因子5(STAT5)IgG

STAT6 /FITC  荧光标记信号转导和转录激活因子6IgG

STEAP1/FITC  荧光标记前列腺跨膜上皮抗原1IgG

StAR/StARD1/FITC  荧光标记促黄体激诱导蛋白IgG

STK/CK I Alpha/FITC  荧光标记属丝/苏氨蛋白质激IgG

STK/CK II Alpha/FITC  荧光标记丝/苏氨蛋白质激IgG

使用方法：

1.  常用筛选浓度

注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线（kill curve），即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。

一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL；细菌/植物细胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 杀灭曲线的建立

注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线（剂量反应曲线）来实现，至少选择5个浓度。

1）  第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜；注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。

2）  根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。

3）  第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。

4）  接下来每3-4天更换新的含药物培养基。

5）  按照固定的周期（如每2天）进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数（通常是7-10天）内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。

3.   稳定转染细胞的筛选

1）  转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞（直接传代或者稀释后传代）。

注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%

2）  每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。

3）  筛选7天后观察并评估细胞克隆（集落）的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。

4）   挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。

5）   之后更换正常培养基培养即可。