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微量BCA蛋白定量试剂盒

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更新时间:2022-08-30 12:17:57浏览次数:405

联系我们时请说明是化工仪器网上看到的信息,谢谢!

产品简介

供货周期 现货 规格 250T
货号 FS-R7545 应用领域 化工
主要用途 仅供科研 货号 FS-R7545
微量BCA蛋白定量试剂盒公司正在销售的产品:Bacillus flexus人激肽释放酶6
Bacillus fusiformis人果糖1,6二磷酸缩酶
Bacillus globigii人组织蛋白酶D
Bacillus gibsonii人敏感性脂肪酶
Bacillus fusiformis人胰激肽原酶
Bacillus globigii人乌头酸酶2
Bacillus globigii人26S蛋白酶

详细介绍

产品分类:蛋白检测

储存条件:室温,避光,12个月

用途:总蛋白定量的二喹啉甲酸/BCA微量分析

注意事项:主用用于微量蛋白质的检测,主要由BCA溶液BSA标准品组成,在562nm处测吸光值,检测范围在2.5-200ug/ml。

公司产品仅用于科研具有质量可靠、效果稳定、灵敏度高、操作简单、易保存等特点,咨询并订购!

产品名称

规格

货号

微量BCA蛋白定量试剂盒

250T

FS-R7545

 

63.jpg 

 

配制与标定的实验原理:

1、用EDTA二钠盐配制EDTA标准溶液的原因;

EDTA是四元酸,是一种白色晶体粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室温溶解度为0.02g/100g H2O。

2、标定EDTA标准溶液的工作基准试剂,基准试剂的预处理:称量前一般应先用稀盐酸洗去氧化层,然后用水洗净,烘干。

配制步骤:

1、取适量锌片放在100mL烧杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自来水、纯水洗净,烘干、冷却。

2、用直接称量法在干燥小烧杯中准确称取0.15~0.2g Zn,盖好小表面皿。

3、用滴管从烧杯口加入5mL 1:1 盐酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地将溶液转移至250mL容量瓶中,用纯水稀释至标线,摇匀。

13.jpg 

 

实验方法与判定:

1.对照品溶液的稳定性

2.对照品溶液的配制:精密量取脑对照品适量,加无水乙醇制成每1ml含脑1mg的溶液,作为对照品溶液。

3.色谱条件:以交联键合聚乙二醇为固定相的毛细管柱;柱温120℃;进样口温度250℃;检测器温度250℃;分流进样,分流比10:1。理论塔板数按脑计算应不低于10000。

4.实验方法:配制的对照品溶液,一份置冷处保存,一份置室温中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份对照品溶液,三种储备液同时稀释制成每1ml中约含50ug的溶液。照气相色谱法,并依据新对照品的峰面积计算原对照品溶液的含量。记录下来,保证原对照品溶液含量在考察期相对平均偏差不超过2.0%,验证对照品溶液在使用期内稳定可靠。

使用方法:

1.  常用筛选浓度

注意:用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。

一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

2. 杀灭曲线的建立

注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。

1)  第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。

2)  根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。

3)  第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。

4)  接下来每3-4天更换新的含药物培养基。

5)  按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。

3.   稳定转染细胞的筛选

1)  转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。

注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%

2)  每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。

3)  筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。

4)   挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。

5)   之后更换正常培养基培养即可。

Acinetobacter soli Kim et al. 锌指转录蛋白Sall1抗体Anti-GH1 Antibody腺苷A2b受体(ADORA2b)

拟枝孢镰孢锌指转录蛋白Sall4抗体Anti-GFRA1 Antibody腺苷A2a受体(ADORA2a)

鲁考弗奇酵母转录因子SOX17抗体Anti-GH1 Antibody线粒体转录因子A(TFAM)

蜥蜴纤细芽孢杆菌溴化太林相关蛋白2抗体Anti-GH1 Antibody线粒体乙脱氢(ALDM)

湿链霉菌S100钙结合蛋白A8抗体Anti-GHR Antibody线粒体外膜转位70A(TOMM70A)

黄曲霉唾液结合性免疫球蛋白样凝集抗体Anti-GILT/IFI30 Antibody线粒体铁蛋白(MFRN)

冷温木克酵母唾液结合性免疫球蛋白样凝集1抗体Anti-GHR Antibody线粒体铁蛋白(FTMT)

枯草芽孢杆菌转录因子SP3抗体Anti-GILT/IFI30 Antibody线粒体融合2(MFN2)

香菇转录因子SP6抗体Anti-GIP Antibody线粒体融合1(MFN1)

PaenibacillusSPOP蛋白抗体Anti-GIP Antibody线粒体解偶联蛋白2(UCP2)

污黑腐皮壳钠离子/牛磺胆共转运蛋白抗体Anti-GJA1 Antibody线粒体解偶联蛋白1(UCP1)

糖化酵母生长抑14抗体Anti-GJA4 Antibody线粒体肌激1B(CKMT1B)

根白蚁伞碳氢钠协同转运蛋白4-A4抗体Anti-GJA3 Antibody线粒体肌激1A(CKMT1A)

匍枝根霉原变种肺表面活性蛋白D抗体Anti-GJA1 Antibody线粒体甘油-3-磷酰基转移(GPAM)

断裂诺氏菌血影蛋白A链红型抗体Anti-GJB1 Antibody线粒体超氧化物歧化(SOD2)

蕈状芽孢杆菌分选连接蛋白5抗体Anti-GJA5 Antibody线粒体GTP1(MTG1)

抑基因SSDP2抗体刺囊毛霉人支气管平滑肌细胞

鲨烯环氧抗体休哈塔假丝酵母休哈塔亚种人直肠平滑肌细胞

信号转导和转录激活因子5b抗体棘孢木霉人小肠平滑肌细胞

同源转录调节蛋白Sin3A抗体长枝木霉人结肠平滑肌细胞
微量BCA蛋白定量试剂盒组织脂质比色法定量检测试剂盒20次人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤;NK-92 [NK92]小鼠抗心磷脂IgM(ACA-IgM)ELISA试剂盒,

植物脂质比色法定量检测试剂盒20次人B淋巴母;HMy2.CIR小鼠新生甲状腺(NN-T4)ELISA试剂盒,

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细胞培养基片剂专题人脐静脉内皮;HUV-EC-C军团菌IgG(LP Ab-IgG)ELISA试剂盒--动物,人


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