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蛋白酶抑制剂混合液

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更新时间:2022-08-30 11:50:52浏览次数:263

联系我们时请说明是化工仪器网上看到的信息,谢谢!

产品简介

供货周期 现货 规格 1ml
货号 FS-R7515 应用领域 化工
主要用途 仅供科研 货号 FS-R7515
蛋白酶抑制剂混合液公司正在销售的产品:Anti-ZDHHC23 Antibody人低密度脂蛋白
Anti-ZFHX3 Antibody人花生四烯酸
Anti-ZFYVE19 Antibody人骨涎蛋白
Anti-ZFP36L2 Antibody人骨碱性磷酸酶
Anti-ZFPM2 Antibody人环磷酰
Anti-ZFP91 Antibody人1,3-二磷酸甘油酸
Anti-ZFP42 Anti

详细介绍

63.jpg
产品分类:酶抑制剂

储存条件:—20℃,避光,12个月

用途:蛋白酶抑制剂

注意事项:主要由亮抑酶肽、胰凝乳蛋白酶抑制剂、抑胃肽酶A、PMSF等组成。

公司产品仅用于科研具有质量可靠、效果稳定、灵敏度高、操作简单、易保存等特点,咨询并订购!

产品名称

规格

货号

蛋白酶抑制剂混合液

1ml

FS-R7515

 

配制与标定的实验原理:

1、用EDTA二钠盐配制EDTA标准溶液的原因;

EDTA是四元酸,是一种白色晶体粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室温溶解度为0.02g/100g H2O。

2、标定EDTA标准溶液的工作基准试剂,基准试剂的预处理:称量前一般应先用稀盐酸洗去氧化层,然后用水洗净,烘干。

配制步骤:

1、取适量锌片放在100mL烧杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自来水、纯水洗净,烘干、冷却。

2、用直接称量法在干燥小烧杯中准确称取0.15~0.2g Zn,盖好小表面皿。

3、用滴管从烧杯口加入5mL 1:1 盐酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地将溶液转移至250mL容量瓶中,用纯水稀释至标线,摇匀。

13.jpg 

 

实验方法与判定:

1.对照品溶液的稳定性

2.对照品溶液的配制:精密量取脑对照品适量,加无水乙醇制成每1ml含脑1mg的溶液,作为对照品溶液。

3.色谱条件:以交联键合聚乙二醇为固定相的毛细管柱;柱温120℃;进样口温度250℃;检测器温度250℃;分流进样,分流比10:1。理论塔板数按脑计算应不低于10000。

4.实验方法:配制的对照品溶液,一份置冷处保存,一份置室温中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份对照品溶液,三种储备液同时稀释制成每1ml中约含50ug的溶液。照气相色谱法,并依据新对照品的峰面积计算原对照品溶液的含量。记录下来,保证原对照品溶液含量在考察期相对平均偏差不超过2.0%,验证对照品溶液在使用期内稳定可靠。

使用方法:

1.  常用筛选浓度

注意:用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。

一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

2. 杀灭曲线的建立

注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。

1)  第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。

2)  根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。

3)  第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。

4)  接下来每3-4天更换新的含药物培养基。

5)  按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。

3.   稳定转染细胞的筛选

1)  转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。

注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%

2)  每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。

3)  筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。

4)   挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。

5)   之后更换正常培养基培养即可。

松口蘑衰老标记蛋白30抗体Anti-Cytochrome P450 1A2/Cyp1a2 Antibody着丝粒蛋白E(CENPE)

枯草芽胞杆菌环指蛋白56Anti-DAPK1 Antibody着丝粒蛋白B(CENPB)

膜醭毕赤酵母受体活性修饰蛋白1抗体Anti-CYP7A1 Antibody着丝粒蛋白36(CENP36)

黑乳菇胞内接头蛋白P14抗体Anti-Cyt 19/As3mt Antibody着丝粒蛋白32(CENP32)

约氏不动杆菌RNA结合蛋白X-连锁蛋白2抗体Anti-DAPK2 Antibody蔗糖异麦芽糖(SI)

产气荚膜梭菌 C型视网膜母瘤相关蛋白p130抗体Anti-DAXX Antibody遮蔽蛋白(OBSCN)

折叠马赛菌磷化A-Raf抗体Anti-DAXX Antibody张力蛋白3(TNS3)

大肠埃希氏菌环指蛋白10抗体Anti-DAXX Antibody张力蛋白2(TNS2)

蓝色犁头霉RAN结合蛋白2/核孔蛋白抗体Anti-DARS2 Antibody张力蛋白1(TNS1)

聚贪噬菌环指蛋白11抗体Anti-DAZAP1 Antibody粘脂蛋白3(MCOLN3)

苏云金芽孢杆菌性核糖体磷蛋白P2抗体Anti-DBI Antibody粘脂蛋白2(MCOLN2)

弹性马鞍菌肿瘤相关表面抗原RCAS1抗体Anti-DBF4 Antibody粘脂蛋白1(MCOLN1)

植物乳杆菌植物亚种心肌兰碱受体抗体(脑肌兰碱受体)Anti-DAZL Antibody粘着斑激(FAK)

松鼠葡萄球菌松鼠亚种RASSF5抗体Anti-DBP Antibody粘膜关联上皮趋化因子(MEC)

苍白杆菌环指蛋白93抗体Anti-DBH Antibody粘蛋白7(MUC7)

喜热单胞菌属环指蛋白111抗体Anti-DCC Antibody粘蛋白6(MUC6)

苏云金芽孢杆菌Bacillus│thuringiensis 质量规格:>90%(T),BR

苏云金芽孢杆菌Bacillus│thuringiensis 质量规格:0.98

唐菖蒲伯克霍尔德氏菌Burkholderia│gladioli 质量规格:BR
蛋白酶抑制剂混合液ARIP2B/FITC  荧光su标记激活su受体2B/激活su受体相互作用蛋白2bIgG规格: 0.2ml

Aromatase P450/FITC  荧光su标记芳香化mei蛋白IgG规格: 0.2ml

Aromatase P450/FITC  荧光su标记芳香化mei/细胞色suP450/P450IgG规格: 0.2ml

ART/FITC  荧光su标记胶质细胞系源性神经营养因子GDNF的一种IgG规格: 0.2ml

ASCL1/MASH1 /FITC  荧光su标记神经母细胞特异性转移因子IgG规格: 0.2ml

 


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