详细介绍
试剂的组成和配制:
酸性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;碱性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体10 mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体3 mL×1瓶,4℃保存;试剂三:粉剂×1瓶,-20 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂四:粉剂×1瓶,4 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂五:液体3.6mL×1瓶,4 ℃保存;试剂六:液体30mL×1瓶,4 ℃保存;试剂七:液体50mL×1瓶,4 ℃保存。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
商品介绍:
测定意义GBSS(EC 2.4.1.21)以束缚态存在于淀粉体中,催化淀粉链的加长反应,主要负责直链淀粉的合成。测定原理GBSS催化ADPG与淀粉引物(葡聚糖)反应,将葡萄糖分子转移到淀粉引物上,同时生成ADP;进一步通过反应体系中添加的丙酮酸激酶、己糖激酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶依次催化NADP+还原为NADPH,其中NADPH生成量与前一步反应生成的ADP数量呈正比,通过340nm下测定NADPH的增加量,可以计算GBSS活性。需自备的的仪器和用品紫外分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。 |
商品属性:
产品名称 | |
检测方法 | 紫外分光光度法 |
产品规格 | 50管/48样 |
产品货号 | AS6321210 |
NAD+和NADH的提取:
1、血清(浆)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(浆)体积(ml):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照血清(浆)体积(ml):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml碱性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照组织质量(g):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照组织质量(g):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml碱性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):酸性 提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):碱 性提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 |
ADH测定操作:
1. 分光光度计预热30 min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意:空白管只需测定一次。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
Clematiunicinoside E英文名: Methyl Green磷化胰岛受体底物-1抗体包装1g
Clematomandshurica saponin ...英文名: Alizarin green磷化胰岛受体底物-1抗体包装5g
Corylifol A(标准品)英文名: Naphthol Green B磷化胰岛受体底物-1抗体包装25g
Crassicauline A(标准品)英文名: Fast Green FCF白介28B抗体包装5g
Crovatin英文名: Alphazurine A即刻早期应答基因2蛋白抗体包装1g
Croverin英文名: Light Green SF Yellowish三磷肌抗体包装1g
D(十)-无葡萄糖(标准品)英文名: Janus Green B白介18结合蛋白抗体包装5g
D-(-)-奎宁(标准品)英文名: Guinea Green B草酰琥珀脱羧抗体包装25g
D-阿伯糖(标准品)英文名: Lissamine™ Green BIgLON家族蛋白5抗体包装5g
D-果糖(标准品)英文名: Acid Green A锌指蛋白IKAROS抗体包装500g
D-四氢药根碱(标准品)英文名: Indocyanine Green免疫球蛋白j链抗体包装1g
D-松(标准品)英文名: Indigotin5-三磷肌受体1抗体包装5g
DL-薄荷(标准品)英文名: Methyl blue5-三磷肌受体2抗体包装1g
Euojaponine D英文名: Evans BlueDNA结合抑制因子3抗体包装100g
Eupeasaponin I英文名: Trypan Blue诱导协同激分子配体CD275抗体包装25g
ATCC10248=LMG2216资源名称: 唐菖蒲伯克霍尔德氏菌 质量规格:HPLC>98%,标准品亮基肽3试剂盒8-姜;8-Gingerol
大肠埃希氏菌Escherichia│coli 质量规格:>99%,BR链激试剂盒6-姜;6-Gingerol
杨链格孢Alternaria│populi 质量规格:>98%,标准品连蛋白试剂盒2-金刚烷;2-Adamantanol
结合态淀粉合成酶(GBSS)测试盒50管/48样木犀青霉 3-苯乙炔硫氧化还原蛋白Elisa
葡萄球属 3-乙炔线粒体呼吸链复合物IElisa
丁香假单胞 二基硅烷线粒体呼吸链复合物IIElisa
马来西亚链霉 3,6-壬二烯(异构体的混合物)线粒体呼吸链复合物IIIElisa
鲍氏桑黄 2-乙炔苯线粒体呼吸链复合物IVElisa
黄曲霉 5-溴-2-氟吡啶总抗氧化能力Elisa
大豆慢生根瘤 2,5-二溴三氟甲苯超氧阴离子Elisa
汉逊德巴酵母 3-羟基异喹啉总蛋白Elisa
糙孢曲霉 苄基二苯基膦总蛋白Elisa
链格孢 三环戊基膦核孤儿受体4A1Elisa
贝形侧耳、鹰翅 化钯9-顺式环氧类胡萝卜双加氧Elisa
考克氏 对酸甲酯9-顺式环氧类胡萝卜双加氧Elisa
构巢曲霉 硫酸铈水合物内源Elisa
产氨棒杆 L(-)-阿洛糖β-胡萝卜羟化Elisa
核盘 Fmoc-N'-三氟乙酰基-L-赖扩展蛋白Elisa