详细介绍
商品属性:
产品名称 | |
检测方法 | 可见分光光度法 |
产品规格 | 50管/48样 |
产品货号 | AS6321202 |
商品介绍:
测定意义淀粉是植物中糖的主要储存形式,其含量测定对于评价食品营养价值和调查植物体内糖代谢都有重要意义。 |
试剂的组成和配制:
酸性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;碱性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体10 mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体3 mL×1瓶,4℃保存;试剂三:粉剂×1瓶,-20 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂四:粉剂×1瓶,4 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂五:液体3.6mL×1瓶,4 ℃保存;试剂六:液体30mL×1瓶,4 ℃保存;试剂七:液体50mL×1瓶,4 ℃保存。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(浆)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(浆)体积(ml):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照血清(浆)体积(ml):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml碱性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照组织质量(g):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照组织质量(g):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml碱性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):酸性 提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):碱 性提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 |
ADH测定操作:
1. 分光光度计预热30 min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意:空白管只需测定一次。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
异黄芪皂苷II(标准品)英文名: Tianeptine sodium salt硫乙酰肝6脑苷脂转硫1抗体包装250mg
异黄芪皂苷IV(标准品)英文名: D-Glutamine 神经保护肽HN抗体包装5g
异茴芹内酯(标准品)英文名: Zaltoprofen大鼠细小病H-1株(H-1)抗体(N端)包装100g
异苦参英文名: Sodium Glycocholate Hydrate透明质合成1抗体包装25g
异类叶升麻苷;异毛蕊花糖苷(标准品)英文名: Mannitol;D-Mannitol缺氧诱导因子3α/HIF-3α抗体包装1g
异莲心碱(标准品)英文名: D-Cysteine hydrochloride monohydrate缺氧诱导因子脯酰4羟化抗体包装5g
异绿原A(标准品)英文名: Calpain Inhibitor II(ALLM)透明质2/玻璃2抗体包装100g
异绿原B(标准品)英文名: Ethisterone心脏钙粘蛋白抗体包装25g
异绿原C(标准品)英文名: Ethisterone17-β-羟脱氢6抗体包装5g
异罗汉果皂苷 V英文名: D-CystineH5亚型全病抗体包装1g
异芒果苷(标准品)英文名: DL-Tryptophan人类疱疹病8 ORF14抗体包装250mg
异牡荆(标准品)英文名: DL-Serine透明质2/玻璃2抗体包装25MG
异南五味子木脂宁英文名: L-Methionine同源盒蛋白B2抗体包装250mg
异欧前胡(标准品)英文名: DL-Phenylalanine同源盒蛋白B8抗体包装5mg
异皮啶(标准品)英文名: DL-Asparagine monohydrate热休克蛋白70家族蛋白6抗体包装10mg
球孢白僵菌Beauveria│bassiana 质量规格:>98.0%,熔点18硫软骨N-乙酰半乳糖基转移1试剂盒苦杏仁苷;Amygdalin
43846=ATCC33205=IFO14230=JCM3312=KCCA-0312=NBRC14230资源名称: 中间型高温放线菌 质量规格:>98.5%,BR硫软骨试剂盒假荆芥属苷;Nepitrin
埃及曲霉Aspergillus│egyptiacus 质量规格:>99%,BR硫皮肤-硫软骨PG试剂盒5-O-维阿斯米;5-O-Methy
淀粉含量测试盒50管/48样钩状木霉 3-氨基-5-溴-2-氟嘧啶异柠檬酸脱氢Elisa
链格孢属 5-溴-2-甲氧基-4-甲基-3-硝基吡啶异戊烯基腺Elisa
绿叶假单胞 6-氟-2-甲基-3丁酸Elisa
枯草芽孢杆 3-溴-5--2-氟吡啶酸Elisa
东方伊萨酵母 5-氟-2-甲氧基乙酸Elisa
短小芽孢杆 3-溴-5-氟-2-甲氧基吡啶乙酸氧化Elisa
酿酒酵母 6--3-氟-2-吡啶羧酸油菜内酯Elisa
Luteolibacter 2--5-氟异油菜甾Elisa
埃希氏属 2-氟-4-游离氨基酸Elisa
白乳菇 2--5-氟-4-吡啶游离脯Elisa
高地芽胞杆 2-溴-3-氟-4-游离脂肪酸Elisa
晦涩小粘束霉 2--3-溴-5-氟吡啶玉米Elisa
果生链核盘 2-叔丁基环己基乙酸酯玉米核苷Elisa
云南球盖菇 1-甲基-4-甲氧羰基吡唑-5-磺酰蔗糖合成Elisa
骚动厄氏 2-溴-5--1,3-二氟苯蔗糖磷酸合成Elisa