详细介绍
商品介绍:
测定意义 漆酶(Laccase)是一种含铜的多酚氧化酶,属于铜蓝氧化酶家族,广泛分布于真菌和高等植物中,具有较强的氧化还原能力,在纸浆生物漂白,环境污染物降解和木质纤维素降解以及生物检测方面有非常广泛的应用。 测定原理 漆酶分解底物ABTS产生ABTS自由基,在420nm处的吸光系数远大于底物ABTS,测定ABTS自由基的增加速率,可计算得漆酶活性。 自备实验用品及仪器 天平、常温离心机、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿、震荡仪。 |
商品属性:
产品名称 | |
检测方法 | 可见分光光度法 |
产品规格 | 50管/24样 |
产品货号 | AS6321311 |
试剂的组成和配制:
酸性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;碱性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体10 mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体3 mL×1瓶,4℃保存;试剂三:粉剂×1瓶,-20 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂四:粉剂×1瓶,4 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂五:液体3.6mL×1瓶,4 ℃保存;试剂六:液体30mL×1瓶,4 ℃保存;试剂七:液体50mL×1瓶,4 ℃保存。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(浆)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(浆)体积(ml):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照血清(浆)体积(ml):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml碱性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照组织质量(g):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照组织质量(g):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml碱性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):酸性 提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):碱 性提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 |
ADH测定操作:
1. 分光光度计预热30 min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意:空白管只需测定一次。
Methylobacterium神经分化相关蛋白AHNAK抗体Human KCNE4 ELISA Kit小鼠Ⅶ(FⅦ)免疫试剂盒
嘴突凸脐蠕孢粘合连接相关蛋白1抗体Human KCNE1 ELISA Kit小鼠Ⅵ(FⅥ)免疫试剂盒
球毛壳去整合样金属蛋白13抗体Human KCNF1 ELISA Kit小鼠Ⅴ(FⅤ)免疫试剂盒
Marisediminicola聚集蛋白抗体Human KCNG4 ELISA Kit小鼠Ⅳ(FⅣ)免疫试剂盒
新月弯孢转录因子AP2α+β抗体Human KARS ELISA Kit小鼠Ⅲ(FⅢ)免疫试剂盒
Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum磷化腺瘤样息肉抗体Human ITPKC ELISA Kit小鼠Ⅱ(FⅡ)免疫试剂盒
香菇磷化周期末期促进复合蛋白APC1抗体Human JAML ELISA Kit小鼠Ⅰ(FⅠ)免疫试剂盒
耐辐射奇球菌突变株周期后期促进蛋白亚基10抗体Human JIP1 ELISA Kit小鼠凝血原片段F1+2(F1+2)免疫试剂盒
柱状环伞菌(柳菇、茶新菇)周期后期促进蛋白亚基11抗体Human IVD(Isovaleryl-CoA dehydrogenase) ELISA Kit小鼠凝血受体(TR)免疫试剂盒
高大毛壳腺瘤性结肠息肉病蛋白2抗体Human ITPR1 ELISA Kit小鼠凝血抗凝血复合物(TAT)免疫试剂盒
Achromobacter denitrificans磷化分裂周期蛋白16抗体Human ISG20 ELISA Kit小鼠凝溶胶蛋白(Gelsolin)免疫试剂盒
米根霉DNA修复相互作用蛋白抗体Human IVNS1ABP ELISA Kit小鼠尿微量白蛋白(ALB)免疫试剂盒
嗜果刀孢脂肪膜相关蛋白抗体Human ISM2 ELISA Kit小鼠核苷磷化1(UPP1)免疫试剂盒
暗产色链霉菌载脂蛋白A1结合蛋白抗体抗体Human IWS1 ELISA Kit小鼠尿激型纤溶原激活物受体(PLAUR/uPAR)免疫试剂盒
链霉菌载脂蛋白B-mRNA编辑复合物1抗体Human ISYNA1 ELISA Kit小鼠尿激型纤溶原激活物(uPA)免疫试剂盒
大肠埃希氏杆菌载脂蛋白B-mRNA编辑复合物2抗体Human ISG20L2 ELISA Kit小鼠脑源性神经营养因子(BDNF)免疫试剂盒
粉褶侧耳Pleurotus│rhodophyllus 质量规格:>98%白介24试剂盒
: Fb17资源名称: 变色多孔菌 质量规格:>98%,BC白介23受体试剂盒乌司
Chlamydomyces palmarumChlamydomyces│palmarum 质量规格:>98%,BR 白介23A试剂盒吴茱萸新碱
土壤漆酶测试盒50管/24样黑木耳 正丁酯骨涎蛋白Elisa
松口蘑 2-氨基异甲酯受磷蛋白Elisa
Corynebacterium urealyticum 硫代二酸双十八酯HAX-1蛋白Elisa
中慢生华癸根瘤 4-氨基-2-甲酸甲酯肌质网钙泵2α亚型Elisa
杀鲑气单胞 4-溴-3-多巴受体D3Elisa
糙孢篮状 L-异亮叔丁酯盐酸盐可溶性补体激活产物SC5b9Elisa
弯孢 3-甲氧基喹啉组织蛋白LElisa
谷棒杆 1-氨基-4-甲基哌核因子κB受体活化因子Elisa
佛罗里达侧耳 3,6-二溴-1,2-苯二伤寒沙门氏抗体Elisa
葡萄座腔 α-环乙酮抗肌联蛋白抗体Elisa
假单胞 6-喹喔啉羧酸肌联蛋白Elisa
黑曲霉 2-溴-3-甲苯纤溶Elisa
波兰青霉 环己六和精Elisa
猴头 3-氨基己内狂犬病特异性IgA抗体Elisa
苏云金芽胞杆 1,1-环烷二甲酸二甲酯肝钠Elisa
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。