详细介绍
商品介绍:
商品介绍 测定意义 高密度脂蛋白为血清蛋白之一,主要由肝脏合成,运载周围组织中的胆固醇,再转化为胆汁酸或直接通过胆汁从肠道排出,是一种抗动脉粥样硬化的血浆脂蛋白,是冠心病的保护因子,俗称“血管清道夫",对冠心病的临床诊断是一个重要的参考指标。 测定原理 用沉淀剂分离血清中的高密度脂蛋白胆固醇,利用酯酶催化胆固醇酯水解生成游离胆固醇和游离脂肪酸,从而把胆固醇酯转化为FC;进一步利用胆固醇氧化酶催化FC氧化,生成△4-胆甾烯酮和H2O2;再利用过氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基安替bi林和酚,生成红色醌类化合物;在500nm有特征吸收峰。 需自备的仪器和用品 离心机,恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水。 |
公司产品仅供科研使用:
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
微量法 | 100管/96样 | AS6321199 |
常见样本处理方法:
1、血清(浆)样品:直接检测。
2、细菌、细胞或组织样品的制备: 细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液) ,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次)8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。组织:按照组织质量(g) :提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
产品优点如下:
1、快速简便:双试剂,直接操作,快速、简便。
2、取样量微:需要的样本量是羟胺法的1/10。
3、灵敏度高:检测线0.5U/ml,是羟胺法5倍,邻苯三酚法的200倍
4、稳定性好:批内CV=5.50%,批间CV=3.32%,试剂盒2~8℃存放3个月有效。
5、再现性好:变异系数CV=1.2%。6、回收试验: X =102.3%。7、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。且特异性强,不受类SOD物质的干扰8、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等,效果均佳。
测定步骤:
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样,不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.温浴
1.加标本后和加结合物后,应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后,反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃,ELISA板可避光放在实验台上,以便 不时观察,待对照管显色适当时,即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅,在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果,准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
实验方法学:
一、肝素的配制:
市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。
血竭高盐(标准品)英文名: L-Cysteine methyl ester hydrochloride高密度脂蛋白抗体包装10MG
鸦胆子(标准品)英文名: Glycine methyl ester hydrochloride蛋白激底物相关蛋白抗体包装5MG
鸦胆子苦(标准品)英文名: L-Glutamic acid dimethyl ester hydrochloride艾滋病病抗体包装1g
鸦胆子D(标准品)英文名: L-Leucine methyl ester hydrochloride流感病H3N2血凝抗体包装250mg
鸭脚树叶碱(标准品)英文名: L-Phenylalanine methyl ester hydrochloride人瘤病16型L2抗体包装5g
鸭跖草(标准品)英文名: L-Proline methyl ester hydrochlorideA型病H7N9 M1蛋白抗体包装1g
亚硫氢钠内酯(标准品)英文名: L-Serine methyl ester hydrochloride蛭抗体包装25g
亚麻木(标准品)英文名: L-Tryptophan methyl ester hydrochloride副肿瘤综合症小脑变性相关蛋白抗体包装5g
烟碱(标准品)英文名: L-Tyrosine methyl ester 植物热休克蛋白93抗体包装25g
延胡索(元胡)(标准品)英文名: L-Cysteine ethyl ester hydrochloride重组人瘤病抗体包装5g
延胡索(标准品)英文名: H-Phe-OEt.HCl长链烯脂酰脱氢抗体包装25g
延胡索乙;消旋延胡索乙(标准品)英文名: Glycine ethyl ester hydrochloride羟脱氢β抗体包装5g
延龄草苷;地索苷(标准品)英文名: L-Methionine ethyl ester hydrochloride三羟基三基裂解抗体包装1g
芫花(标准品)英文名: L-Tyrosine ethyl ester hydrochloride 高密度脂蛋白抗体包装250mg
芫花条(标准品)英文名: L-Aspartic acid β-benzyl ester磷化三羟基三基还原抗体包装1g
硬结节杆菌Arthrobacter│scleromae 质量规格:>98%轮状病试剂盒柯伊-7-O-葡萄糖苷;Chryso
链霉菌属菌种Streptomyces│sp. 质量规格:>98%,叔丁盐形式轮状病试剂盒柯诺辛B;Corynoxine B
橙黄色粘球菌Myxococcus│xanthus 质量规格:>98%,USP卵清蛋白特异性IgG试剂盒柯诺辛;Corynoxine
血清高密度脂蛋白(HDLC)测试盒100管/96样青色糖单孢 3-氨基-2-萘甲酸二烯氧化物合Elisa
暗色节菱孢* 1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸酮酸激Elisa
豇豆慢生根瘤 羟钴盐酸盐査尔酮合Elisa
橙色杆状 维生B1超氧化物歧化Elisa
印度毛壳 磺异恶唑赤霉Elisa
草木樨中华根瘤 磺异恶唑赤霉3Elisa
牧草红酵母 2-氨基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸单脱氢抗坏血酸还原Elisa
枯草芽孢杆 3,4,5-三氟胆色原脱氨Elisa
光滑青霉 3-(磺酰)-2-噻吩羧酸甲酯淀粉Elisa
土曲霉原变种 3-噻吩-2-羧酸独脚金内酯Elisa
秀珍菇 2-氨基-4-硝苯多氧化Elisa
耶尔森氏属 2-羟基-5-多氧化Elisa
肠道致病性大肠埃希氏 5-羧酸多聚半乳糖酸Elisa
亚罗酵母属 丁酯二磷酸核酮糖羧化Elisa
金黄色葡萄球 丁酯二酰基甘油Elisa