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详细介绍
商品介绍：
测定意义 土壤羟胺还原酶能将土壤中氮代谢过程中形成的中间产物羟胺还原为氨，土壤中的还原态化合物可作为氢的供体，其强弱影响到土壤氮代谢过程中氮素的氨挥发损失，间接影响氮肥的利用效率。 测定原理 硫酸铁铵中的Fe3+可将羟胺氧化为氮气，自身被还原为Fe2+，Fe2+在弱酸条件下与邻菲罗琳形成橙红色配合物，在510nm处有吸收峰，羟胺还原酶作用于羟胺，使配合物形成量减少，510nm处吸光值的减少可反映羟胺还原酶的活性。 自备实验用品及仪器 天平、常温离心机、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿、震荡仪、氮吹仪。 |
商品属性：
产品名称 | |
检测方法 | 可见分光光度法 |
产品规格 | 50管/24样 |
产品货号 | AS6321309 |
试剂的组成和配制：
酸性提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；碱性提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体10 mL×1瓶，4℃保存；试剂二：液体3 mL×1瓶，4℃保存；试剂三：粉剂×1瓶，-20 ℃保存，用时加入3mL蒸馏水，混匀，用不完的试剂4℃保存一周；试剂四：粉剂×1瓶，4 ℃保存，用时加入3mL蒸馏水，混匀，用不完的试剂4℃保存一周；试剂五：液体3.6mL×1瓶，4 ℃保存；试剂六：液体30mL×1瓶，4 ℃保存；试剂七：液体50mL×1瓶，4 ℃保存。
自备仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
NAD+和NADH的提取：
1、血清（浆）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取：按照血清（浆）体积（ml）：酸性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建 议取约0.1ml血清（浆），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）； 冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl碱性提取液使之中 和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提取：按照血清（浆）体积（ml）：碱性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建 议取约0.1ml血清（浆），加入1ml碱性提取液），95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）； 冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：按照组织质量（g）：酸性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建议取约0.1g 组织，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）；冰浴 中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提取：按照组织质量（g）：碱性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建议取约0.1g 组织，加入1ml碱性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）；冰浴 中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：先收集细胞或细菌到离心管内，弃上清，按照细菌或细胞数量（104个）：酸性 提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液）， 超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次），95℃水浴5min （盖紧，以防止水分散失）；冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加 入500μl碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提取：先收集细胞或细菌到离心管内，弃上清，按照细菌或细胞数量（104个）：碱 性提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液）， 超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次），95℃水浴5min （盖紧，以防止水分散失）；冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 |
ADH测定操作：
1. 分光光度计预热30 min，调节波长到340 nm，蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四，迅速混匀后于340nm测定吸光值变化，分别记录15s和75s时吸光值，分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四，迅速混匀后于340nm测定吸光值变化，分别记录15s和75s时吸光值，分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意：空白管只需测定一次。
平滑假丝酵母精加压受体2抗体Human KLF17 ELISA Kit小鼠肾损伤分子1(Kim-1)免疫试剂盒
香蕉骨架肌动蛋白样蛋白3抗体Human KIF1C ELISA Kit小鼠肾前体免疫试剂盒
灵芝(红芝, 赤芝)膜粘连蛋白8抗体Human KIF22 ELISA Kit小鼠肾(Renin)免疫试剂盒
泰塔温沙壤土杆菌水通道蛋白8抗体Human KIF20A ELISA Kit小鼠肾上腺髓质(ADM)免疫试剂盒
中慢生华癸根瘤菌锚蛋白重复结构域蛋白40抗体Human KIF1B ELISA Kit小鼠肾上腺能a1A受体(ADRA1A)免疫试剂盒
肉梭菌 C型凋亡抑制因子5抗体Human KIF26B ELISA Kit小鼠肾上腺(EPI)免疫试剂盒
炭黑曲霉水通道蛋白-3抗体Human KIF2A ELISA Kit小鼠神经营养因子4(NT-4)免疫试剂盒
芽胞杆菌载脂蛋白D抗体Human KIF1B ELISA Kit小鼠神经营养因子3(NT-3)免疫试剂盒
酿酒酵母丁酰基合成3抗体Human KIF1C ELISA Kit小鼠神经型一氧化氮合成(nNOS/NOS1)免疫试剂盒
黄溶链霉菌脂肪源性亮基肽抗体（血管内皮生长因子诱导蛋白）Human KIF19 ELISA Kit小鼠神经粘附分子1(NCAM1)免疫试剂盒
大豆慢生根瘤菌线粒体凋亡诱导因子2抗体Human KIF20A ELISA Kit小鼠神经特异性烯化(NSE)免疫试剂盒
食砜节杆菌ABL2蛋白抗体Human KIF26B ELISA Kit小鼠神经肽Y(NPY)免疫试剂盒
糖多孢菌血管紧张转换ACE1抗体Human KIF22 ELISA Kit小鼠神经丝蛋白L(NF-L)免疫试剂盒
黑根霉血管紧张转换2抗体Human KIF2B ELISA Kit小鼠神经生长因子前体(proNGF)免疫试剂盒
大豆慢生根瘤菌Acinus抗体Human KIF2C ELISA Kit小鼠神经生长因子(NGF)免疫试剂盒
副猪嗜血杆菌醋激1抗体Human KIF2A ELISA Kit小鼠神经胶质纤维性蛋白(GFAP)免疫试剂盒
枯草芽孢杆菌Bacillus│subtilis 质量规格：>98%,BS白介37试剂盒新对叶百部碱
: ATCC12291资源名称: 假肠膜明串珠菌 质量规格：>97%，BR白介35试剂盒小芸木
大肠埃希菌Escherichia│coli 质量规格：>98%,BR白介33试剂盒莶精
土壤羟胺还原酶（HR）测试盒50管/24样豌豆根瘤 苯氧基乙酰谷草转氨;天门冬氨基转移1Elisa
褐黄木耳（琥珀木耳） 丁二酸与4-羟基-2,2,6,6-四甲基-1-的聚合物谷草转氨;天门冬氨基转移2Elisa
芥黄蜜环 5-溴-2-甲氧基血小板内皮粘附分子1Elisa
BL21(DE3)star Boc-D-脯酰肿瘤坏死因子受体超家族成员4Elisa
滑假丝酵母 3-氟苯磺酰腺核苷酸Elisa
中慢生华癸根瘤 2,7-二芴逆转录病Elisa
酿酒酵母 1-溴-2-异氧基苯乌头酸2Elisa
鼠李糖乳杆 西咪替丁盐酸盐I型胶原羟基端肽β降解产物Elisa
枯草芽胞杆 2-羟基-6-甲氧基苯甲乌头酸1Elisa
酿酒酵母 3,4,5-三氟苯甲酮乌头酸2Elisa
大豆根瘤 3-（2-吡咯基）酸甲酯粘蛋白4Elisa
草茎点霉 N-甲基-N-(4-)粘蛋白;粘液5BElisa
球孢白僵 3-溴-2-甲基三氟甲苯c-fosElisa
土壤玫瑰单胞 N-环己基脲糖皮质受体βElisa
玉米大斑凸脐蠕孢 3,4-二氟苄核转录因子p50Elisa
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
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