Tricine加样缓冲液

Tricine加样缓冲液公司正在销售的产品：Anti-TNFRSF6B Antibody人型肝炎IgM
Anti-TNFRSF9 Antibody大鼠游离状腺原
Anti-TNFSF10 Antibody人型肝炎IgG
Anti-TNFSF11 Antibody大鼠新生甲状腺素
Anti-TNFSF4 Antibody大鼠胰岛素
Anti-TNFSF12 Antibody人糖蛋白130
Anti-

公司产品仅用于科研具有质量可靠、效果稳定、灵敏度高、操作简单、易保存等特点，咨询并订购！

产品分类：蛋白电泳

储存条件：—20℃,12个月

用途：又称三羟甲基甘氨酸加样缓冲液,Tris-tricine缓冲系统的PAGE电泳

注意事项：主要由Tris-HCl、DTT、G-250等组成。

 

 

配制与标定的实验原理：

1、用EDTA二钠盐配制EDTA标准溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一种白色晶体粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室温溶解度为0.02g/100g H2O。

2、标定EDTA标准溶液的工作基准试剂，基准试剂的预处理：称量前一般应先用稀盐酸洗去氧化层，然后用水洗净，烘干。

配制步骤：

1、取适量锌片放在100mL烧杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自来水、纯水洗净，烘干、冷却。

2、用直接称量法在干燥小烧杯中准确称取0.15～0.2g Zn，盖好小表面皿。

3、用滴管从烧杯口加入5mL 1:1 盐酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地将溶液转移至250mL容量瓶中，用纯水稀释至标线，摇匀。

 

 

实验方法与判定：

1.对照品溶液的稳定性

2.对照品溶液的配制：精密量取脑对照品适量，加无水乙醇制成每1ml含脑1mg的溶液，作为对照品溶液。

3.色谱条件：以交联键合聚乙二醇为固定相的毛细管柱；柱温120℃；进样口温度250℃；检测器温度250℃；分流进样，分流比10:1。理论塔板数按脑计算应不低于10000。

4.实验方法：配制的对照品溶液，一份置冷处保存，一份置室温中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份对照品溶液，三种储备液同时稀释制成每1ml中约含50ug的溶液。照气相色谱法，并依据新对照品的峰面积计算原对照品溶液的含量。记录下来，保证原对照品溶液含量在考察期相对平均偏差不超过2.0%，验证对照品溶液在使用期内稳定可靠。

红色蜡蘑一种肿瘤抑制基因抗体（N端）Anti-CASP8(P10) AntibodyN端中段骨钙(N-MID-OT)

香港洛克氏菌腺苷单磷活化蛋白激α1/AMPK α 1抗体Anti-CASP8 AntibodyN端外显肽(Ext-N)

白僵菌维生K依赖的蛋白C重链抗体Anti-CASP8(P18) AntibodyN端前脑钠(NT-proBNP)

长蠕孢菌神经丛蛋白A1抗体Anti-CASP8 AntibodyNOGO-A抗体(Nogo-A Ab)

p21激活激4抗体Anti-CASP9(small)(p10) AntibodyNOD样受体(NLR)

Aquimonas磷化p21激活激4/5/6抗体Anti-CASP8(P18) AntibodyNADPH氧化3(NOX3/MOX2)

Microbacterium marinilacus磷化p21激活激1/2抗体Anti-CASP9(p35) AntibodyNADPH氧化1(NOX1/MOX1/NOH1)

变异链霉菌磷化p21激活激1/2抗体Anti-Caspase-1(P20)/CASP1 AntibodyNa+/H+交换体3(NHE3)

干草鞘单胞菌磷化p21激活激2抗体Anti-CASP9(large) AntibodyN(ε)羧乙基赖(CEL)

蜡状芽孢杆菌磷酯Cγ2抗体Anti-Caspase-9 p35/Casp9 AntibodyMYC诱导核抗原(MINA)

枯草芽胞杆菌磷化血小板源性生长因子受体-α抗体Anti-CAST AntibodyMAX二聚化蛋白1(mxd1)

产碱普罗威登斯菌磷化血小板源性生长因子受体-α抗体Anti-CAT AntibodyMAP磷双特异性磷1(DUSP-1)

假单胞菌P73肿瘤抑制基因抗体Anti-CAV1 AntibodyM2肾激(M2-PK)

盐假单胞菌表观抑制因子Polycomb家族成员PCGFl蛋白抗体Anti-CASR Antibody(PB0970)L选择(L-Selectin/CD62L)

苏云金芽孢杆菌拟步行甲亚种G蛋白偶联受体p2y10抗体Anti-CAV2 AntibodyL-乳脱氢(L-LDH)

哈茨木霉腺苷环化激活肽-27/38抗体Anti-CAV2 Antibody(PB0108)L-解(PAL)

链霉菌属菌种Streptomyces│sp. 质量规格：>98%,BR

O1群霍乱弧菌Vibrio│cholerae non-O1 质量规格：>98%,BR

坚强芽孢杆菌Bacillus│firmus Bredemann and Werner 质量规格：>98%,BR
Tricine加样缓冲液BTK/ATK /FITC  荧光su标记兔抗人、大、小鼠蛋白酪氨suan激meiATKIgG规格： 0.2ml

Phospho-Btk(Tyr223) /FITC  荧光su标记兔抗人、大、小鼠蛋白酪氨suan激meiATKIgG规格： 0.2ml

Phospho-Btk(Ser180) /FITC  荧光su标记兔抗人、大、小鼠蛋白酪氨suan激meiATKIgG规格： 0.2ml

ABCA1/FITC  荧光su标记腺三磷suan结合盒转运体A1IgG规格： 0.2ml

Tap1/ABCB2 /FITC   荧光su标记ATP结合转运因子1IgG规格： 0.2ml

使用方法：

1.  常用筛选浓度

注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线（kill curve），即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。

一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL；细菌/植物细胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 杀灭曲线的建立

注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线（剂量反应曲线）来实现，至少选择5个浓度。

1）  第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜；注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。

2）  根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。

3）  第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。

4）  接下来每3-4天更换新的含药物培养基。

5）  按照固定的周期（如每2天）进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数（通常是7-10天）内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。

3.   稳定转染细胞的筛选

1）  转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞（直接传代或者稀释后传代）。

注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%

2）  每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。

3）  筛选7天后观察并评估细胞克隆（集落）的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。

4）   挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。

5）   之后更换正常培养基培养即可。